| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 螺虫乙酯概述 | 第10-15页 |
| 1.1.1 化学结构 | 第11页 |
| 1.1.2 理化性质 | 第11-12页 |
| 1.1.3 作用机制与杀虫谱 | 第12-13页 |
| 1.1.4 毒性与安全性评价 | 第13-14页 |
| 1.1.5 螺虫乙酯的应用发展与研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2 斑马鱼及其应用 | 第15页 |
| 1.2.1 斑马鱼的生物学特点 | 第15页 |
| 1.2.2 斑马鱼在毒理学及遗传学中的应用 | 第15页 |
| 1.3 试验方法简介 | 第15-18页 |
| 1.3.1 吖啶橙染色法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记染色法(TUNEL) | 第16页 |
| 1.3.3 微核试验 | 第16-17页 |
| 1.3.4 DNA Laddering检测法 | 第17页 |
| 1.3.5 Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术 | 第17页 |
| 1.3.6 实时荧光定量PCR技术 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 化学药品与试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 仪器设备 | 第19页 |
| 2.3 斑马鱼饲养与胚胎获取 | 第19-20页 |
| 2.4 技术路线 | 第20-21页 |
| 2.5 螺虫乙酯对斑马鱼胚胎的毒性研究方法 | 第21-26页 |
| 2.5.1 胚胎急性毒性试验方法 | 第21-22页 |
| 2.5.2 吖啶橙染色法检测 | 第22-23页 |
| 2.5.3 一步法TUNEL染色法检测 | 第23页 |
| 2.5.4 实时荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因表达 | 第23-26页 |
| 2.6 螺虫乙酯对斑马鱼幼鱼的急性毒性研究方法 | 第26-28页 |
| 2.6.1 斑马鱼外周血细胞微核试验 | 第27页 |
| 2.6.2 斑马鱼基因组DNA Laddering检测法 | 第27-28页 |
| 2.7 螺虫乙酯对斑马鱼幼鱼的慢性毒性研究方法 | 第28-31页 |
| 2.7.1 双染法流式细胞术检测斑马鱼肝组织细胞凋亡 | 第28-29页 |
| 2.7.2 qRT-PCR检测斑马鱼肝组织细胞凋亡相关基因表达 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-53页 |
| 3.1 螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育及细胞凋亡的影响 | 第31-40页 |
| 3.1.1 螺虫乙酯对斑马鱼胚胎的毒性结果 | 第31-36页 |
| 3.1.2 螺虫乙酯对初孵幼鱼细胞凋亡及相关基因表达的影响 | 第36-40页 |
| 3.2 螺虫乙酯急性暴露诱导斑马鱼幼鱼DNA损伤的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.1 阳性参比物检测结果 | 第40页 |
| 3.2.2 螺虫乙酯对斑马鱼幼鱼的毒性 | 第40页 |
| 3.2.3 微核试验结果 | 第40-41页 |
| 3.2.4 DNA Laddering检测结果 | 第41-42页 |
| 3.3 螺虫乙酯慢性暴露对斑马鱼幼鱼行为形态、肝脏细胞凋亡及氧化应激反应相关基因表达的影响 | 第42-53页 |
| 3.3.1 对行为形态的影响 | 第42页 |
| 3.3.2 螺虫乙酯对幼鱼肝组织细胞凋亡的影响 | 第42-45页 |
| 3.3.3 螺虫乙酯对幼鱼肝组织氧化应激反应相关基因表达的影响 | 第45-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录1 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
