| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-29页 |
| 第一部分 HTNVGN-CTY-R-T-L序列对VLP释放的影响 | 第29-47页 |
| 1 材料 | 第29-32页 |
| 1.1 菌种、载体 | 第29页 |
| 1.2 细胞 | 第29页 |
| 1.3 试剂 | 第29-30页 |
| 1.4 培养液(基)与缓冲液 | 第30-31页 |
| 1.5 仪器与器材 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-35页 |
| 2.1 HTNVGn-CT突变载体的构建 | 第32-34页 |
| 2.2 HTNVGn-CT突变对VLP释放的影响 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-44页 |
| 3.1 成功构建了HTNVGn-CTY-R-T-L序列的突变载体 | 第35-38页 |
| 3.2 HTNVGn-CT中Y-R-T-L序列突变影响VLP的释放 | 第38-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 第二部分 明确参与HTNV出芽相关宿主ESCRT分子 | 第47-60页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| 1.1 病毒 | 第47页 |
| 1.2 细胞 | 第47页 |
| 1.3 抗体 | 第47页 |
| 1.4 其它试剂 | 第47页 |
| 1.5 培养液(基)与缓冲液 | 第47-48页 |
| 1.6 仪器与器材 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-51页 |
| 2.1 ESCRT关键分子ALIX、TSG101、Nedd4及Vps4AsiRNA的设计筛选及验证 | 第48-49页 |
| 2.2 ESCRT关键分子表达降低对HTNV出芽的影响 | 第49-51页 |
| 3 结果 | 第51-58页 |
| 3.1 构建的siRNA能有效抑制ALIX、TSG101、Nedd4及Vps4A表达 | 第51-54页 |
| 3.2 ALIX、TSG101、Nedd4及Vps4A表达降低后可抑制HTNV出芽 | 第54-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第三部分 明确HTNVGN-CT与宿主ESCRT相互作用介导病毒出芽的机制 | 第60-74页 |
| 1 材料 | 第60-61页 |
| 1.1 病毒 | 第60页 |
| 1.2 细胞 | 第60页 |
| 1.3 抗体 | 第60页 |
| 1.4 其它试剂 | 第60页 |
| 1.5 培养液(基)与缓冲液 | 第60-61页 |
| 1.6 仪器与器材 | 第61页 |
| 2 方法 | 第61-63页 |
| 2.1 筛选与HTNV包膜糖蛋白相互作用的分子 | 第61-62页 |
| 2.2 明确ALIX与HTNVGn相互作用的位置 | 第62页 |
| 2.3 检测ALIX过表达对HTNV出芽的影响 | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63-70页 |
| 3.1 Co-IP检测HTNVGn-CT与ALIX、Vps4A、Nedd4及TSG101的相互作用 | 第63-65页 |
| 3.2 检测HTNVGn-CT与ALIX相互作用位点 | 第65-66页 |
| 3.3 检测ALIX过表达对HTNVGn-CT相互作用的影响 | 第66-68页 |
| 3.4 检测ALIX过表达对HTNV出芽及HTNVVLP释放的影响 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-74页 |
| 小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 个人简历和研究成果 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
