| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第8-24页 |
| 1.1 帕金森病 | 第8-11页 |
| 1.1.1 帕金森综合征 | 第8页 |
| 1.1.2 PD | 第8-9页 |
| 1.1.3 与PD相关基因 | 第9-11页 |
| 1.2 PINK | 第11-17页 |
| 1.2.1 hPINK1(Human) | 第12页 |
| 1.2.2 TcPINK1(Tribolium castaneum) | 第12-13页 |
| 1.2.3 PINK1 在线粒体上的定位机制 | 第13-14页 |
| 1.2.4 PINK1 与线粒体自噬 | 第14-17页 |
| 1.3 PINK1 与其他疾病 | 第17-18页 |
| 1.3.1 PINK1 与肿瘤 | 第17页 |
| 1.3.2 PINK1 与糖尿病 | 第17页 |
| 1.3.3 PINK1 与免疫反应 | 第17-18页 |
| 1.4 PINK1 结构与功能研究进展 | 第18-22页 |
| 1.4.1 TcPINK | 第18-20页 |
| 1.4.2 PhPINK | 第20-22页 |
| 1.5 研究内容及意义 | 第22-24页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第24-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-30页 |
| 2.1.1 载体 | 第24页 |
| 2.1.2 基因 | 第24页 |
| 2.1.3 引物 | 第24-25页 |
| 2.1.4 菌株和细胞 | 第25-26页 |
| 2.1.5 实验试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-56页 |
| 2.2.1 分子克隆 | 第30-44页 |
| 2.2.2 蛋白的表达 | 第44-46页 |
| 2.2.3 蛋白纯化方法 | 第46-49页 |
| 2.2.4 PINK1 蛋白激酶活性的检测 | 第49页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE和 Western blot | 第49-53页 |
| 2.2.6 细胞生物学实验 | 第53-56页 |
| 第3章 泛素Ub的表达与纯化 | 第56-60页 |
| 3.1 Ub表达载体的选择与构建 | 第56-57页 |
| 3.2 Ub蛋白表达菌株的选择 | 第57页 |
| 3.3 Ub蛋白纯化 | 第57-60页 |
| 第4章 具有生物学活性的PINK1 的表达、纯化 | 第60-78页 |
| 4.1 hPINK1(130-581)的表达、纯化与激酶活性检测 | 第60-65页 |
| 4.1.1 hPINK1 表达载体的选择与构建 | 第60-61页 |
| 4.1.2 hPINK1(130-581)蛋白表达菌株的选择 | 第61页 |
| 4.1.3 hPINK1(130-581)的纯化 | 第61-65页 |
| 4.1.4 hPINK1(130-581)的激酶活性 | 第65页 |
| 4.2 TcPINK1(135-570)的表达、纯化与激酶活性检测 | 第65-71页 |
| 4.2.1 Tc PINK1(135-570)表达载体的选择与构建 | 第65-67页 |
| 4.2.2 TcPINK1(135-570)蛋白表达菌株的选择 | 第67页 |
| 4.2.3 TcPINK1(135-570)蛋白纯化 | 第67-69页 |
| 4.2.4 TcPINK1(135-570)的激酶活性 | 第69-70页 |
| 4.2.5 TcPINK1(135-570)和hPINK1(130-581)激酶活性检测 | 第70-71页 |
| 4.3 TcPINK1 突变1 与突变2 蛋白的表达、纯化与激酶活性检测 | 第71-74页 |
| 4.3.1 TcPINK1 突变1 与突变2 表达载体及表达菌株的选择 | 第71-72页 |
| 4.3.2 TcPINK1(突变1/2)蛋白的纯化 | 第72页 |
| 4.3.3 TcPINK1(突变1/2)激酶活性 | 第72-74页 |
| 4.4 TcPINK1(N)+hPINK1(C)蛋白的表达、纯化与激酶活性检测 | 第74-76页 |
| 4.4.1 TcPINK1(N)+hP(C)表达载体及表达菌株选择 | 第74页 |
| 4.4.2 TcPINK1(N)+hPINK1(C)蛋白的纯化 | 第74-75页 |
| 4.4.3 TcPINK1(N)+hPINK1(C)激酶活性检测 | 第75-76页 |
| 4.5 hPINK1(N)+TcPINK1(C)蛋白的表达、纯化与激酶活性检测 | 第76-78页 |
| 4.5.1 TcPINK1(N)+hP(C)表达载体及表达菌株选择 | 第76页 |
| 4.5.2 hP(N)+TcP(C)蛋白的纯化及激酶活性检测 | 第76-78页 |
| 第5章 研究结论及意义 | 第78-80页 |
| 5.1 功能性Tc PINK1 的表达与纯化体系 | 第78页 |
| 5.2 不同突变、拼接体对PINK1 生物学活性的影响 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
