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基于转录组分析探讨刀鲚幼鱼对环境因子变化的响应及调控机制研究

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
缩略语第16-17页
绪论第17-19页
第一章 文献综述第19-38页
    1.1 刀鲚研究进展第19-22页
        1.1.1 刀鲚生物学研究第19-21页
            1.1.1.1 刀鲚形态分类学研究第19-20页
            1.1.1.2 刀鲚同工酶分类学研究第20页
            1.1.1.3 刀鲚DNA分子水平分类学研究第20-21页
        1.1.2 刀鲚繁养殖研究第21页
        1.1.3 刀鲚应激研究第21-22页
        1.1.4 刀鲚洄游机理研究第22页
    1.2 环境因子对主要洄游性鱼类影响的研究进展第22-26页
        1.2.1 洄游以及洄游性鱼类第22-23页
        1.2.2 盐度对主要洄游性鱼类的影响研究第23-24页
            1.2.2.1 盐度对鲑鱼的影响研究第23-24页
            1.2.2.2 盐度对鲟鱼的影响研究第24页
        1.2.3 低温对主要洄游性鱼类的影响研究第24-25页
            1.2.3.1 低温对鲑鱼的影响研究第24-25页
            1.2.3.2 低温对鲟鱼的影响研究第25页
        1.2.4 饥饿对主要洄游性鱼类的影响研究第25-26页
            1.2.4.1 饥饿对鲑鱼的影响研究第25页
            1.2.4.2 饥饿对鲟鱼的影响研究第25-26页
    1.3 水产动物抗环境因子变化的关键调控基因研究第26-30页
        1.3.1 核因子相关因子2的相关研究第26-27页
            1.3.1.1 核因子相关因子2的概念及作用机理第26-27页
            1.3.1.2 核因子相关因子2在哺乳动物及水产动物上的相关研究第27页
        1.3.2 渗透调节蛋白水通道蛋白的研究进展第27-28页
            1.3.2.1 水通道蛋白的概念及作用机理第27-28页
            1.3.2.2 水通道蛋白在人、植物、水产动物上开展的研究第28页
        1.3.3 水产动物脂蛋白酯酶的相关研究第28-29页
        1.3.4 水产动物磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶的相关研究第29-30页
    1.4 高通量测序技术在主要洄游性鱼类研究中的应用第30-36页
        1.4.1 转录组概念第31页
        1.4.2 Illumina测序原理及工作流程第31-32页
        1.4.3 Illumina测序技术中生物信息分析相关数据库概念第32页
        1.4.4 高通量测序技术在主要洄游性鱼类研究中的应用第32-36页
            1.4.4.1 高通量测序技术在鲑鱼研究中的应用第33-34页
            1.4.4.2 高通量测序技术在鲟鱼研究中的应用第34-35页
            1.4.4.3 高通量测序技术在刀鲚研究中的应用第35-36页
    1.5 本论文的研究内容、技术路线、目的与意义第36-38页
        1.5.1 本论文的研究内容第36页
        1.5.2 本论文的目的与意义第36-37页
        1.5.3 本研究的技术路线第37-38页
第二章 刀鲚幼鱼对降温升盐协同作用响应的脑组织转录组分析第38-52页
    引言第38页
    2.1 材料与方法第38-40页
        2.1.1 实验鱼饲养管理第38页
        2.1.2 实验设计与样品采集第38-39页
        2.1.3 RNA的提取与检测、cDNA文库构建、测序及转录本装配第39页
        2.1.4 基因功能注释第39页
        2.1.5 差异基因的富集分析第39-40页
        2.1.6 差异表达基因的荧光定量PCR验证第40页
    2.2 结果第40-48页
        2.2.1 转录组测序及从头装配第40-41页
        2.2.2 基因KOG注释第41-42页
        2.2.3 差异表达基因的聚类分析第42页
        2.2.4 差异表达基因的GO富集分析第42-43页
        2.2.5 差异表达基因的KEGG富集分析第43-44页
        2.2.6 差异表达基因分析第44-47页
        2.2.7 荧光定量PCR验证第47-48页
    2.3 讨论第48-51页
        2.3.1 降温升盐协同作用下刀鲚脑组织的信号转导调节第48-49页
        2.3.2 降温升盐协同作用下刀鲚脑组织的渗透调节第49页
        2.3.3 降温升盐协同作用下刀鲚脑组织的抗应激应答第49-51页
    2.4 本章小结第51-52页
第三章 刀鲚幼鱼对饥饿响应的肝组织转录组分析第52-66页
    引言第52页
    3.1 材料与方法第52-54页
        3.1.1 实验鱼饲养管理第52页
        3.1.2 实验设计与组织采集第52-53页
        3.1.3 RNA的提取与检测、cDNA文库构建、测序及转录本装配第53页
        3.1.4 基因功能注释第53页
        3.1.5 差异基因的富集分析第53-54页
        3.1.6 差异表达基因的荧光定量PCR验证第54页
    3.2 结果第54-62页
        3.2.1 转录组测序及从头装配第54-55页
        3.2.2 基因GO注释第55页
        3.2.3 差异表达基因的聚类分析第55-56页
        3.2.4 差异表达基因的GO富集分析第56-57页
        3.2.5 差异表达基因的KEGG富集分析第57-58页
        3.2.6 差异表达基因分析第58-61页
        3.2.7 荧光定量PCR验证第61-62页
    3.3 讨论第62-64页
        3.3.1 饥饿作用下刀鲚肝组织差异表达基因的KEGG富集分析第62-63页
        3.3.2 饥饿作用下刀鲚肝组织中差异表达基因分析第63-64页
            3.3.2.1 免疫应答相关基因第63页
            3.3.2.2 能源物质代谢相关基因第63-64页
    3.4 本章小结第64-66页
第四章 刀鲚核因子相关因子2的分子克隆及不同环境因子作用下的表达研究第66-81页
    引言第66页
    4.1 材料与方法第66-70页
        4.1.1 实验鱼第66页
        4.1.2 盐度实验第66-67页
        4.1.3 降温实验第67页
        4.1.4 总RNA的提取和Nrf2基因中间序列的获得第67页
        4.1.5 刀鲚Nrf2基因5'、3'RACE扩增试验第67-68页
        4.1.6 Nrf2核酸及推导的氨基酸序列分析第68页
        4.1.7 刀鲚Nrf2基因的组织表达分析第68-70页
            4.1.7.1 刀鲚Nrf2基因在各组织中的表达分析第68-69页
            4.1.7.2 刀鲚Nrf2基因在盐度作用下的组织表达分析第69页
            4.1.7.3 刀鲚Nrf2基因在降温作用下的组织表达分析第69-70页
    4.2 结果第70-79页
        4.2.1 刀鲚Nrf2的序列及结构分析第70页
        4.2.2 刀鲚Nrf2的系统进化分析第70-75页
        4.2.3 刀鲚Nrf2基因在不同组织中的表达分析第75-76页
        4.2.4 刀鲚Nrf2基因在盐度作用下的组织表达分析第76-78页
        4.2.5 刀鲚Nrf2基因在降温作用下的组织表达分析第78-79页
    4.3 讨论第79-80页
        4.3.1 刀鲚Nrf2的进化分析第79页
        4.3.2 刀鲚Nrf2的组织差异表达分析第79-80页
    4.4 小结第80-81页
第五章 刀鲚水通道蛋白1的分子克隆及不同环境因子作用下的表达分析第81-96页
    引言第81页
    5.1 材料与方法第81-85页
        5.1.1 实验鱼第81页
        5.1.2 盐度实验第81-82页
        5.1.3 降温实验第82页
        5.1.4 总RNA的提取和AQP1基因中间序列的获得第82页
        5.1.5 刀鲚AQP1基因5'、3'RACE扩增实验第82-83页
        5.1.6 AQP1核酸及推导的氨基酸序列分析第83-84页
        5.1.7 刀鲚AQP1基因的组织表达分析第84-85页
            5.1.7.1 刀鲚AQP1基因在不同组织中的表达分析第84页
            5.1.7.2 刀鲚AQP1基因在盐度作用下的组织表达分析第84页
            5.1.7.3 刀鲚AQP1基因在降温作用下的组织表达分析第84-85页
    5.2 结果第85-93页
        5.2.1 刀鲚AQP1的序列及结构分析第85页
        5.2.2 刀鲚AQP1的同源性分析第85-88页
        5.2.3 刀鲚AQP1的系统进化分析第88页
        5.2.4 刀鲚AQP1基因在不同组织中的表达分析第88-89页
        5.2.5 刀鲚AQP1基因在盐度作用下的组织表达分析第89-91页
        5.2.6 刀鲚AQP1基因在降温作用下的组织表达分析第91-93页
    5.3 讨论第93-95页
        5.3.1 刀鲚AQP1的序列特征第93页
        5.3.2 刀鲚AQP1的进化分析第93页
        5.3.3 刀鲚AQP1的组织表达差异第93-95页
    5.4 本章小结第95-96页
第六章 刀鲚脂蛋白酯酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶基因的分子克隆和表达研究第96-119页
    引言第96页
    6.1 材料与方法第96-101页
        6.1.1 实验鱼饲养管理第96-97页
        6.1.2 实验设计与组织采集第97页
        6.1.3 总RNA的提取和LPL基因中间序列的获得第97页
        6.1.4 刀鲚LPL基因5'、3'RACE扩增试验第97-98页
        6.1.5 总RNA的提取和PEPCK基因中间序列的获得第98页
        6.1.6 刀鲚PEPCK基因5'、3'RACE扩增试验验第98页
        6.1.7 LPL及PEPCK核酸及推导的氨基酸序列分析第98-100页
        6.1.8 刀鲚LPL基因的组织表达分析第100页
            6.1.8.1 刀鲚LPL基因在各组织中的表达分析第100页
            6.1.8.2 刀鲚LPL基因在饥饿作用下肝组织中的表达分析第100页
        6.1.9 刀鲚PEPCK基因的组织表达分析第100-101页
            6.1.9.1 刀鲚PEPCK基因在各组织中的表达分析第100页
            6.1.9.2 刀鲚PEPCK基因在饥饿作用下肝组织中的表达分析第100-101页
        6.1.10 刀鲚形态参数及血清指标的测定第101页
    6.2 结果第101-115页
        6.2.1 刀鲚LPL的序列及结构分析第101页
        6.2.2 刀鲚LPL的系统进化分析第101-106页
        6.2.3 刀鲚LPL的组织表达分析第106-108页
            6.2.3.1 刀鲚LPL基因的组织差异表达分析第106页
            6.2.3.2 饥饿作用下刀鲚肝组织中LPL基因的表达分析第106-108页
        6.2.4 刀鲚PEPCK的序列及结构分析第108-112页
        6.2.5 刀鲚PEPCK的系统进化分析第112-113页
        6.2.6 刀鲚PEPCK基因的组织表达分析第113-114页
            6.2.6.1 刀鲚PEPCK基因在各组织中的差异表达分析第113页
            6.2.6.2 饥饿作用下刀鲚肝组织中PEPCK基因的表达分析第113-114页
        6.2.7 饥饿对刀鲚形态指标及血清激素、免疫指标的影响第114-115页
    6.3 讨论第115-117页
        6.3.1 刀鲚LPL序列及结构的保守性及进化分析第115-116页
        6.3.2 饥饿作用下刀鲚LPL对鱼体的调控作用第116页
        6.3.3 刀鲚PEPCK的序列、结构及进化分析第116页
        6.3.4 饥饿作用下刀鲚PEPCK对鱼体的调控作用第116-117页
        6.3.5 饥饿作用对刀鲚形态、血清生化指标的影响第117页
    6.4 本章小结第117-119页
全文结论第119-120页
全文创新点第120-121页
参考文献第121-137页
致谢第137-138页
攻读博士学位期间发表的学术论文第138页
攻读博士学位期间已获授权的专利第138页
攻读博士学位期间参与的科研项目第138页
攻读博士学位期间获得的奖励第138-139页
攻读博士学位期间参与的学术活动第139页

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