摘要 | 第4-6页 |
Abstract of Thesis | 第6-11页 |
引言 | 第11-12页 |
1 研究内容和技术路线 | 第12-14页 |
1.1 研究内容 | 第12-14页 |
1.1.1 构建过表达/缺失AC026166.2-001 的喉癌细胞株 | 第12页 |
1.1.2 喉癌细胞株转染效果的验证 | 第12页 |
1.1.3 AC026166.2-001 对喉癌细胞生长的影响 | 第12页 |
1.1.4 流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡 | 第12页 |
1.1.5 AC026166.2-001 对喉癌细胞迁移的影响 | 第12页 |
1.1.6 分析AC026166.2-001 影响喉癌细胞增殖的分子机制 | 第12-13页 |
1.1.7 建立裸鼠移植瘤动物模型 | 第13页 |
1.1.8 技术路线 | 第13-14页 |
2 材料与方法 | 第14-32页 |
2.1 材料 | 第14-16页 |
2.1.1 主要仪器 | 第14-15页 |
2.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
2.1.3 细胞株 | 第16页 |
2.1.4 动物实验 | 第16页 |
2.2 方法 | 第16-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第16-17页 |
2.2.2 细胞及组织总RNA提取 | 第17-18页 |
2.2.3 总RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第18-19页 |
2.2.4 实时定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR) | 第19-22页 |
2.2.5 细胞转染 | 第22-24页 |
2.2.6 RTCA检测细胞增殖 | 第24页 |
2.2.7 细胞平板克隆形成试验 | 第24-25页 |
2.2.8 流式细胞术 | 第25页 |
2.2.9 划痕实验 | 第25-26页 |
2.2.10 Transwell迁移实验 | 第26页 |
2.2.11 Western Blot | 第26-29页 |
2.2.12 双萤光素酶报告基因实验 | 第29-30页 |
2.2.13 动物实验 | 第30-31页 |
2.2.14 统计分析 | 第31-32页 |
3 实验结果 | 第32-50页 |
3.1 总RNA完整性检测 | 第32页 |
3.2 q RT-PCR扩增曲线 | 第32-33页 |
3.3 功能获得实验 | 第33-38页 |
3.3.1 荧光倒置显微镜观察转染效率 | 第33-34页 |
3.3.2 上调效果验证 | 第34-35页 |
3.3.3 上调AC026166.2-001 对喉癌细胞生长的影响 | 第35-36页 |
3.3.4 上调AC026166.2-001 对喉癌细胞周期的影响 | 第36-37页 |
3.3.5 上调AC026166.2-001 对喉癌细胞凋亡的影响 | 第37页 |
3.3.6 上调AC026166.2-001 对细胞迁移的影响 | 第37-38页 |
3.4 功能缺失实验 | 第38-42页 |
3.4.1 下调效果验证 | 第38-39页 |
3.4.2 下调AC026166.2-001 对喉癌细胞生长的影响 | 第39-40页 |
3.4.3 下调AC026166.2-001 对细胞周期的影响 | 第40-41页 |
3.4.4 下调AC026166.2-001 对细胞凋亡的影响 | 第41页 |
3.4.5 下调AC026166.2-001 对细胞迁移的影响 | 第41-42页 |
3.5 AC026166.2-001 可以作为mi R243p的分子海绵 | 第42-45页 |
3.5.1 生物信息学预测AC026166.2-001 互作mi RNA | 第42-43页 |
3.5.2 双萤光素酶报告基因实验 | 第43-44页 |
3.5.3 AC026166.2-001 抑制mi R243p的表达 | 第44-45页 |
3.6 AC026166.2-001 影响周期相关蛋白的表达 | 第45页 |
3.7 动物实验 | 第45-50页 |
3.7.1 AC026166.2-001 对裸鼠重量的影响 | 第46页 |
3.7.2 AC026166.2-001 对肿瘤体积的影响 | 第46页 |
3.7.3 AC026166.2-001 对肿瘤重量的影响 | 第46-47页 |
3.7.4 移植瘤中AC026166.2-001 的表达量 | 第47页 |
3.7.5 组织病理HE染色检查 | 第47-48页 |
3.7.6 肿瘤组织凋亡检测 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
附录A 缩略词 | 第56-57页 |
附录B 综述 环状RNA在头颈部肿瘤中的作用 | 第57-72页 |
参考文献 (References) | 第66-72页 |
在学研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |