摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
引言 | 第11-17页 |
第一章 草鱼鳃组织蛋白双向电泳技术的建立及优化 | 第17-27页 |
1.1 材料与方法 | 第17-20页 |
1.1.1 实验材料 | 第17页 |
1.1.2 试剂与仪器 | 第17-18页 |
1.1.3 草鱼鳃组织蛋白的提取与纯化 | 第18-19页 |
1.1.4 第一向等电聚焦电泳(Isoelectricfocusing,IEF) | 第19页 |
1.1.5 胶条的平衡 | 第19页 |
1.1.6 SDS-PAGE垂直凝胶电泳(二向) | 第19-20页 |
1.1.7 考马斯亮蓝G-250染色(每块凝胶需250mL) | 第20页 |
1.1.8 硝酸银银染(每块凝胶需250mL) | 第20页 |
1.1.9 图象扫描与软件分析 | 第20页 |
1.2 结果及分析 | 第20-24页 |
1.2.1 不同裂解液配方和蛋白纯化方法的2-DE图谱 | 第20-22页 |
1.2.2 IPG胶条分离范围的选择 | 第22页 |
1.2.3 不同上样量的优化 | 第22-23页 |
1.2.4 不同染色方法的影响 | 第23-24页 |
1.3 讨论 | 第24-27页 |
第二章 低氧胁迫下草鱼鳃的适应性分析及差异蛋白质双向电泳分析 | 第27-42页 |
2.1 材料和方法 | 第27-33页 |
2.1.1 实验材料 | 第27-28页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第28页 |
2.1.3 实验鱼的低氧胁迫 | 第28-29页 |
2.1.4 LOE的测定 | 第29页 |
2.1.5 石蜡组织切片样品处理 | 第29-32页 |
2.1.6 草鱼鳃组织总蛋白的提取与纯化 | 第32页 |
2.1.7 蛋白水化、等电聚焦电泳、第二向垂直电泳 | 第32页 |
2.1.8 LC-MS/MS(Q-TOF)质谱分析与数据检索 | 第32-33页 |
2.2 实验结果与分析 | 第33-38页 |
2.2.1 草鱼耐低氧能力LOE值的测定 | 第33页 |
2.2.2 低氧胁迫后草鱼鳃组织石蜡切片观察与分析 | 第33-34页 |
2.2.3 低氧胁迫后草鱼鳃组织差异蛋白筛选 | 第34-35页 |
2.2.4 低氧胁迫后草鱼鳃组织差异蛋白鉴定 | 第35-37页 |
2.2.5 部分差异蛋白在低氧诱导因子1信号通路中的关系 | 第37-38页 |
2.3 讨论 | 第38-42页 |
第三章 热休克诱导草鱼四倍体育种 | 第42-47页 |
3.1 材料与方法 | 第42-43页 |
3.1.1 实验材料 | 第42页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第42-43页 |
3.1.3 草鱼人工催产“授精”及染色体加倍处理 | 第43页 |
3.1.4 草鱼倍性检测 | 第43页 |
3.2 结果 | 第43-45页 |
3.2.1 多样品上样倍性分析仪快速检测建立 | 第43-44页 |
3.2.2 热休克诱导草鱼四倍体胚胎孵化期存活率 | 第44页 |
3.2.3 热休克诱导草鱼四倍体倍性检测及分析 | 第44-45页 |
3.3 讨论 | 第45-47页 |
结论与展望 | 第47-49页 |
(一)结论 | 第47-48页 |
(二)展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
硕士期间发表的论文 | 第60页 |