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草鱼在低氧胁迫下鳃的差异蛋白质组学及热休克诱导草鱼四倍体育种研究

摘要第4-6页
abstract第6-8页
引言第11-17页
第一章 草鱼鳃组织蛋白双向电泳技术的建立及优化第17-27页
    1.1 材料与方法第17-20页
        1.1.1 实验材料第17页
        1.1.2 试剂与仪器第17-18页
        1.1.3 草鱼鳃组织蛋白的提取与纯化第18-19页
        1.1.4 第一向等电聚焦电泳(Isoelectricfocusing,IEF)第19页
        1.1.5 胶条的平衡第19页
        1.1.6 SDS-PAGE垂直凝胶电泳(二向)第19-20页
        1.1.7 考马斯亮蓝G-250染色(每块凝胶需250mL)第20页
        1.1.8 硝酸银银染(每块凝胶需250mL)第20页
        1.1.9 图象扫描与软件分析第20页
    1.2 结果及分析第20-24页
        1.2.1 不同裂解液配方和蛋白纯化方法的2-DE图谱第20-22页
        1.2.2 IPG胶条分离范围的选择第22页
        1.2.3 不同上样量的优化第22-23页
        1.2.4 不同染色方法的影响第23-24页
    1.3 讨论第24-27页
第二章 低氧胁迫下草鱼鳃的适应性分析及差异蛋白质双向电泳分析第27-42页
    2.1 材料和方法第27-33页
        2.1.1 实验材料第27-28页
        2.1.2 试剂与仪器第28页
        2.1.3 实验鱼的低氧胁迫第28-29页
        2.1.4 LOE的测定第29页
        2.1.5 石蜡组织切片样品处理第29-32页
        2.1.6 草鱼鳃组织总蛋白的提取与纯化第32页
        2.1.7 蛋白水化、等电聚焦电泳、第二向垂直电泳第32页
        2.1.8 LC-MS/MS(Q-TOF)质谱分析与数据检索第32-33页
    2.2 实验结果与分析第33-38页
        2.2.1 草鱼耐低氧能力LOE值的测定第33页
        2.2.2 低氧胁迫后草鱼鳃组织石蜡切片观察与分析第33-34页
        2.2.3 低氧胁迫后草鱼鳃组织差异蛋白筛选第34-35页
        2.2.4 低氧胁迫后草鱼鳃组织差异蛋白鉴定第35-37页
        2.2.5 部分差异蛋白在低氧诱导因子1信号通路中的关系第37-38页
    2.3 讨论第38-42页
第三章 热休克诱导草鱼四倍体育种第42-47页
    3.1 材料与方法第42-43页
        3.1.1 实验材料第42页
        3.1.2 试剂与仪器第42-43页
        3.1.3 草鱼人工催产“授精”及染色体加倍处理第43页
        3.1.4 草鱼倍性检测第43页
    3.2 结果第43-45页
        3.2.1 多样品上样倍性分析仪快速检测建立第43-44页
        3.2.2 热休克诱导草鱼四倍体胚胎孵化期存活率第44页
        3.2.3 热休克诱导草鱼四倍体倍性检测及分析第44-45页
    3.3 讨论第45-47页
结论与展望第47-49页
    (一)结论第47-48页
    (二)展望第48-49页
参考文献第49-59页
致谢第59-60页
硕士期间发表的论文第60页

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