摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-27页 |
1.1 DNA拓扑异构酶 | 第11-19页 |
1.1.1 DNA拓扑异构酶的分类 | 第11-12页 |
1.1.2 DNA拓扑异构酶的催化机理 | 第12-14页 |
1.1.3 DNA拓扑异构酶Ⅰ的结构 | 第14页 |
1.1.4 DNA拓扑异构酶Ⅰ的生物学功能 | 第14-16页 |
1.1.5 植物中TOP Ⅰ的研究现状 | 第16-17页 |
1.1.6 DNA拓扑异构酶Ⅰ的抑制剂 | 第17-19页 |
1.2 植物根结构简介 | 第19-20页 |
1.3 生长素对植物根系发育的影响 | 第20-22页 |
1.3.1 生长素的生物合成及信号通路 | 第20-21页 |
1.3.2 生长素对植物根系影响的研究现状 | 第21-22页 |
1.4 R-loop对植物生长发育的影响 | 第22-26页 |
1.4.1 R-loop的结构及作用 | 第22-24页 |
1.4.2 R-loop与DNA拓扑异构酶Ⅰ的关联 | 第24-25页 |
1.4.3 R-loop在植物生长发育中的研究现状 | 第25-26页 |
1.5 研究目的和意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-39页 |
2.1 材料 | 第27-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 菌株 | 第27页 |
2.1.3 质粒载体 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-39页 |
2.2.1 OsTOPⅠ过表达载体的构建 | 第28-29页 |
2.2.2 OsTOPⅠ启动子融合表达载体的构建 | 第29-30页 |
2.2.3 OsTOPⅠRNAi载体及雌二醇诱导表达RNAi载体的构建 | 第30-31页 |
2.2.4 DNA的抽提及PCR阳性检测 | 第31-32页 |
2.2.5 GUS组织化学染色 | 第32-33页 |
2.2.6 mRNA表达量的检测 | 第33-34页 |
2.2.7 水稻幼苗的培养与根系观察 | 第34-36页 |
2.2.8 RNA-seq及DRIP-seq取材 | 第36-37页 |
2.2.9 Western Blot实验 | 第37-39页 |
3. 结果与分析 | 第39-48页 |
3.1 OsTOPⅠ遗传材料的鉴定 | 第39-40页 |
3.2 RNA干涉家系的表型 | 第40-43页 |
3.2.1 干涉家系在培养皿上的表型 | 第40-42页 |
3.2.2 干涉家系的水培生长状况 | 第42-43页 |
3.3 CPT处理对根中生长素的影响 | 第43页 |
3.4 RNA-seq结果分析 | 第43-45页 |
3.5 DRIP-seq结果分析 | 第45-46页 |
3.6 qPCR检测生长素信号相关基因 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-53页 |
4.1 OsTOPⅠ表达模式的分析及其与生长素信号的关联 | 第48-49页 |
4.2 OsTOPⅠ对水稻地上部分的影响 | 第49页 |
4.3 OsTOPⅠ对水稻根尖干细胞区域的影响 | 第49-50页 |
4.4 OsTOPⅠ、Auxin及R-loop三者间的关联 | 第50-51页 |
4.6 工作展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-64页 |
附录 | 第64-76页 |
附录1 附图 | 第64-66页 |
附录2 引物信息 | 第66-67页 |
附录3 qRT-PCR验证RNA-seq数据 | 第67页 |
附录4 DRIP(DNA:RNA hybrid Immunoprecipitation) | 第67-76页 |
致谢 | 第76页 |