| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-31页 |
| 1.1 动植物寄生线虫的危害 | 第12-13页 |
| 1.1.1 动物寄生线虫的危害 | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物寄生线虫的危害 | 第13页 |
| 1.2 动植物寄生线虫的防治 | 第13-15页 |
| 1.2.1 动物寄生线虫病的防治 | 第13-14页 |
| 1.2.2 植物寄生线虫的防治 | 第14-15页 |
| 1.3 苏云金芽胞杆菌和杀虫晶体蛋白 | 第15-16页 |
| 1.4 Cry蛋白杀昆虫机制的研究 | 第16-19页 |
| 1.4.1 昆虫肠道内Cry蛋白的主要受体 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Cry晶体蛋白杀昆虫作用机制 | 第17-19页 |
| 1.5 Cry蛋白杀线虫机制的研究 | 第19-24页 |
| 1.5.1 Cry蛋白杀动植物寄生线虫的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.5.2 Cry 5Ba蛋白杀线虫机制的研究 | 第21-24页 |
| 1.6 秀丽隐杆线虫的防御机制研究进展 | 第24-28页 |
| 1.6.1 秀丽隐杆线虫防御Cry蛋白的天然免疫信号通路 | 第24-26页 |
| 1.6.2 参与秀丽隐杆线虫免疫防御相关的下游effectors | 第26-27页 |
| 1.6.3 秀丽隐杆线虫细胞水平的防御机制 | 第27-28页 |
| 1.7 金属蛋白酶类似物MNP-1可参与秀丽隐杆线虫对Cry5B的防御 | 第28-30页 |
| 1.8 本研究目的与意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-51页 |
| 2.1 材料 | 第31-41页 |
| 2.1.1 菌株、质粒、引物、线虫突变体 | 第31-37页 |
| 2.1.2 培养基 | 第37-38页 |
| 2.1.3 试剂 | 第38-40页 |
| 2.1.4 仪器 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-51页 |
| 2.2.1 DNA常规操作 | 第41-42页 |
| 2.2.2 蛋白质相关操作 | 第42-44页 |
| 2.2.3 秀丽隐杆线虫的相关操作 | 第44-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-101页 |
| 3.1 MNP-1参与C.elegans防御多种穿孔毒素 | 第51-55页 |
| 3.1.1 MNP-1参与C.elegans对其他类Cry蛋白的防御 | 第51-53页 |
| 3.1.2 MNP-1不参与穿孔类化合物毒素的防御反应 | 第53-54页 |
| 3.1.3 MNP-1可被多种PFTs诱导上调表达 | 第54-55页 |
| 3.2 MNP-1调控C.elegans天然免疫效应因子 | 第55-60页 |
| 3.2.1 Cry5Ba处理后防御相关差异基因筛选 | 第56-57页 |
| 3.2.2 mnp-1突变使免疫相关防御基因下调 | 第57-60页 |
| 3.3 MNP-1调控C.elegans的insulin-like信号通路防御Cry5Ba | 第60-62页 |
| 3.4 MNP-1调控insulin-like信号通路防御Cry5Ba机制研究 | 第62-68页 |
| 3.4.1 MNP-1负调控insulin-like信号通路受体DAF-2 | 第63-65页 |
| 3.4.2 MNP-1激活转录因子DAF-16定位于细胞核 | 第65-68页 |
| 3.5 MNP-1正调控DAF-2抑制剂INS-1 | 第68-74页 |
| 3.5.1 mnp-1突变使daf-2上游的抑制剂ins-1表达下调 | 第68-69页 |
| 3.5.2 用于ins-1 RNAi菌株的构建 | 第69-70页 |
| 3.5.3 MNP-1位于INS-1的上游并正调控INS-1 | 第70-71页 |
| 3.5.4 ins-1通过改变DAF-16的定位防御Cry5Ba | 第71-73页 |
| 3.5.5 其他INS类神经肽分子突变体生物活性测定 | 第73-74页 |
| 3.6 防御相关蛋白酶类效应因子参与C.elegans防御Cry5Ba | 第74-80页 |
| 3.6.1 Cry5Ba处理daf-2突变体蛋白酶类效应因子基因表达下调 | 第74-75页 |
| 3.6.2 蛋白酶类效应因子基因参与MNP-1/DAF-2/DAF-16通路 | 第75-77页 |
| 3.6.3 蛋白酶类效应因子基因突变体对Cry5Ba敏感 | 第77-78页 |
| 3.6.4 RNAi蛋白酶effectors基因对Cry5Ba敏感 | 第78-80页 |
| 3.7 MNP-1/DAF-2/DAF-16信号通路调控蛋白酶类效应因子降解Cry5Ba | 第80-87页 |
| 3.7.1 mnp-1突变影响蛋白酶对Cry5Ba的降解作用 | 第81页 |
| 3.7.2 mnp-1突变体与野生型N2差异基因聚类分析研究 | 第81-83页 |
| 3.7.3 mnp-1突变体与野生型N2差异基因KEGG pathway分析研究 | 第83页 |
| 3.7.4 MNP-1/DAF-2/DAF-16信号通路关键基因突变体的降解 | 第83-86页 |
| 3.7.5 防御相关蛋白酶效应基因突变影响Cry5Ba的降解 | 第86-87页 |
| 3.8 MNP-1参与调控p38 MAPK信号通路 | 第87-92页 |
| 3.8.1 MNP-1调控p38 MAPK信号通路关键基因的表达 | 第88-89页 |
| 3.8.2 抑制剂处理mnp-1突变体相对野生型N2更敏感 | 第89-90页 |
| 3.8.3 关键基因突变体蛋白酶类effector基因的表达变化 | 第90-92页 |
| 3.9 MNP-1参与调控JNK MAPK信号通路 | 第92-96页 |
| 3.9.1 MNP-1调控JNK MAPK信号通路关键基因的表达 | 第92-93页 |
| 3.9.2 抑制剂测定mnp-1突变体比野生型N2更敏感 | 第93-94页 |
| 3.9.3 JNK MAPK信号通路关键基因突变体蛋白酶effector基因的表达 | 第94-96页 |
| 3.10 MNP-1也参与C.elegans对病原菌的防御 | 第96-97页 |
| 3.11 MNP-1同源蛋白保守存在于其他物种中 | 第97-99页 |
| 3.12 MNP-1介导的C.elegans防御Cry5Ba信号传导模型 | 第99-101页 |
| 4 结论与讨论 | 第101-106页 |
| 4.1 结论 | 第101-102页 |
| 4.2 讨论 | 第102-106页 |
| 4.2.1 MNP-1可能还参与其他通路防御PFTs | 第102-103页 |
| 4.2.3 MNP-1介导的天然免疫信号通路可能广泛存在其他物种中 | 第103页 |
| 4.2.4 MNP-1可能参与宿主解毒以及泛素化过程 | 第103-104页 |
| 4.2.5 MNP-1可作为调节天然免疫信号通路的药物靶标 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-114页 |
| 附录 | 第114-120页 |
| 己发表和待发表论文 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
