| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 部分英文缩写表 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 问题的提出及研究意义 | 第12-13页 |
| 1.1.1 问题的提出 | 第12-13页 |
| 1.1.2 研究意义 | 第13页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第13-22页 |
| 1.2.1 肝纤维化与基质硬度 | 第13-16页 |
| 1.2.2 肝细胞与肝纤维化 | 第16-20页 |
| 1.2.3 基质硬度对细胞行为的影响 | 第20-22页 |
| 1.3 研究目的及主要内容 | 第22-24页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第22页 |
| 1.3.2 研究内容及技术路线 | 第22-24页 |
| 1.4 创新点 | 第24-26页 |
| 2 不同基质硬度作用下肝细胞转录组测序及生物信息学分析 | 第26-58页 |
| 2.1 引言 | 第26-27页 |
| 2.2 试剂与材料 | 第27-29页 |
| 2.2.1 实验仪器及耗材 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第28页 |
| 2.2.3 实验试剂的配置 | 第28-29页 |
| 2.3 实验路线及实验方法 | 第29-36页 |
| 2.3.1 实验路线 | 第29页 |
| 2.3.2 不同硬度PVA水凝胶基质的制备及表征 | 第29-31页 |
| 2.3.3 PVA基质对肝细胞细胞相容性影响 | 第31页 |
| 2.3.4 RNA提取和质量检测 | 第31-32页 |
| 2.3.5 RNA-Seq实验流程和生物信息学分析流程 | 第32-34页 |
| 2.3.6 qRT-PCR验证 | 第34-36页 |
| 2.3.7 统计学分析 | 第36页 |
| 2.4 实验结果 | 第36-53页 |
| 2.4.1 不同硬度PVA水凝胶基质的力学性能 | 第36-37页 |
| 2.4.2 不同硬度PVA水凝胶基质的微观结构和亲水性 | 第37-39页 |
| 2.4.3 不同基质硬度对肝细胞细胞相容性的影响 | 第39-41页 |
| 2.4.4 真核转录组测序质控分析 | 第41-43页 |
| 2.4.5 不同基质硬度对肝细胞基因表达的差异分析 | 第43-46页 |
| 2.4.6 不同基质硬度对肝细胞表达差异基因的聚类分析 | 第46-48页 |
| 2.4.7 差异基因的GO功能和Pathway显著性富集分析 | 第48-52页 |
| 2.4.8 qRT-PCR验证结果 | 第52-53页 |
| 2.5 分析与讨论 | 第53-55页 |
| 2.6 小结 | 第55-58页 |
| 3 不同2D基质硬度对肝细胞生物学行为和力学特性的影响 | 第58-110页 |
| 3.1 引言 | 第58-59页 |
| 3.2 试剂与材料 | 第59-63页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第59页 |
| 3.2.2 实验仪器及耗材 | 第59-60页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第60-61页 |
| 3.2.4 实验试剂的配置 | 第61-63页 |
| 3.3 实验路线及实验方法 | 第63-74页 |
| 3.3.1 实验路线 | 第63页 |
| 3.3.2 不同基质硬度对肝细胞形貌和表型影响 | 第63-67页 |
| 3.3.3 不同基质硬度对肝细胞活/死细胞影响 | 第67-68页 |
| 3.3.4 不同基质硬度对肝细胞迁移影响 | 第68页 |
| 3.3.5 不同基质硬度对肝细胞力学特性影响 | 第68-71页 |
| 3.3.6 体内外水平研究不同基质硬度对迁移和力学特性影响的机制 | 第71-74页 |
| 3.3.7 统计学分析 | 第74页 |
| 3.4 实验结果 | 第74-105页 |
| 3.4.1 不同基质硬度影响肝细胞形貌和表型 | 第74-81页 |
| 3.4.2 不同基质硬度对肝细胞活/死细胞影响 | 第81-83页 |
| 3.4.3 不同基质硬度和不同裱衬蛋白浓度调控肝细胞迁移行为 | 第83-90页 |
| 3.4.4 不同基质硬度影响肝细胞力学特性 | 第90-93页 |
| 3.4.5 不同基质硬度上细胞三维模型构建和应力应变分布 | 第93-97页 |
| 3.4.6 体内外探究不同基质硬度对肝细胞迁移和力学特性影响的机制 | 第97-105页 |
| 3.5 分析与讨论 | 第105-108页 |
| 3.6 小结 | 第108-110页 |
| 4 不同3D基质硬度对肝细胞生物学功能的影响 | 第110-122页 |
| 4.1 引言 | 第110-111页 |
| 4.2 试剂与材料 | 第111-112页 |
| 4.2.1 实验仪器及耗材 | 第111页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第111-112页 |
| 4.3 实验路线及实验方法 | 第112-114页 |
| 4.3.1 实验路线 | 第112页 |
| 4.3.2 3D不同基质硬度内细胞培养 | 第112-113页 |
| 4.3.3 肝细胞的活/死细胞检测 | 第113页 |
| 4.3.4 3D基质内的细胞迁移实验 | 第113-114页 |
| 4.3.5 免疫荧光 | 第114页 |
| 4.3.6 统计学分析 | 第114页 |
| 4.4 实验结果 | 第114-119页 |
| 4.4.1 不同3D基质硬度对肝细胞活细胞/死细胞的影响 | 第114-115页 |
| 4.4.2 不同3D基质硬度对肝细胞骨架的影响 | 第115-116页 |
| 4.4.3 不同3D基质硬度对肝细胞迁移行为的影响 | 第116-117页 |
| 4.4.4 不同3D基质硬度对细胞β-catenin和Integrin-β1表达的影响 | 第117-119页 |
| 4.5 分析与讨论 | 第119-121页 |
| 4.6 小结 | 第121-122页 |
| 5 结论与展望 | 第122-124页 |
| 5.1 结论 | 第122页 |
| 5.2 后续研究展望 | 第122-124页 |
| 致谢 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-138页 |
| 附录 | 第138-139页 |
