| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-17页 |
| 1 食源性致病菌概况 | 第13页 |
| 2 E.coliO157:H7及其检测方法 | 第13-14页 |
| 2.1 E.coliO157:H7概述 | 第13-14页 |
| 2.2 E.coliO157:H7的检测方法 | 第14页 |
| 3 环介导等温扩增及活菌检测 | 第14-15页 |
| 3.1 环介导等温扩增 | 第14页 |
| 3.2 致病菌活菌的检测方法 | 第14-15页 |
| 4 研究内容及意义 | 第15-17页 |
| 4.1 本研究的主要内容 | 第15页 |
| 4.2 本研究的目的及意义 | 第15-17页 |
| 第二章 Rti-LAMP非预增菌快速检测鸡肉中大肠杆菌O157:H7方法的建立 | 第17-26页 |
| 1 材料与仪器 | 第17-18页 |
| 1.1 实验菌株与原料 | 第17页 |
| 1.2 主要材料与试剂 | 第17页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.1 引物设计与合成 | 第18页 |
| 2.2 细菌培养、计数及细菌DNA提取 | 第18-19页 |
| 2.3 Rti-LAMP反应 | 第19页 |
| 2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| 2.5 蒙脱石封闭活性炭(BCAC)的制备 | 第19页 |
| 2.6 模拟E.coliO157:H7污染鸡肉样品 | 第19-20页 |
| 2.7 封闭活性炭对鸡肉样品前处理 | 第20页 |
| 2.8 样品中细菌DNA的提取 | 第20页 |
| 2.9 市售鸡肉样品的对比检测 | 第20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-25页 |
| 3.1 Rti-LAMP检测E.coliO157:H7方法的建立 | 第20-21页 |
| 3.2 预增菌前处理的Rti-LAMP检测模拟E.coliO157:H7污染的鸡肉样品 | 第21-23页 |
| 3.3 封闭活性炭前处理的Rti-LAMP检测模拟E.coliO157:H7污染的鸡肉样品 | 第23页 |
| 3.4 三种方法对比检测市售鸡肉样品 | 第23-25页 |
| 4 本章小结 | 第25-26页 |
| 第三章 EMA-Rti-LAMP非预增菌快速检测鸡肉中活的大肠杆菌O157:H7 | 第26-38页 |
| 1 材料与仪器 | 第26-27页 |
| 1.1 实验菌株与原料 | 第26页 |
| 1.2 主要材料与试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.1 引物设计与合成 | 第27页 |
| 2.2 细菌培养及计数 | 第27-28页 |
| 2.3 热杀死E.coliO157:H7 | 第28页 |
| 2.4 不同浓度EMA对LAMP扩增活细胞DNA的影响 | 第28页 |
| 2.5 不同浓度EMA对LAMP扩增死细胞DNA的影响 | 第28页 |
| 2.6 EMA-Rti-LAMP检测活的E.coliO157:H7标准曲线的建立 | 第28-29页 |
| 2.7 EMA-Rti-LAMP检测不同温度处理后E.coliO157:H7的存活率 | 第29页 |
| 2.8 制备模拟E.coliO157:H7污染的鸡肉样品 | 第29页 |
| 2.9 制备模拟污染鸡肉样品的E.coliO157:H7DNA模板 | 第29页 |
| 2.10 Rti-LAMP反应 | 第29页 |
| 2.11 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-37页 |
| 3.1 不抑制Rti-LAMP扩增活细胞DNA的EMA最大浓度 | 第29-30页 |
| 3.2 抑制Rti-LAMP扩增死细胞DNA的EMA最小浓度 | 第30-31页 |
| 3.3 EMA-Rti-LAMP从死菌中区分活菌能力的检测 | 第31-33页 |
| 3.4 EMA-Rti-LAMP定量检测活-死混合菌中活的E.coliO157:H7 | 第33-35页 |
| 3.5 EMA-Rti-LAMP检测不同温度处理后的E.coliO157:H7存活率 | 第35-36页 |
| 3.6 EMA-Rti-LAMP检测模拟污染鸡肉中活的E.coliO157:H7 | 第36-37页 |
| 4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第四章 EMA-Rti-LAMP非预增菌快速检测鸡肉中VBNC状态的大肠杆菌O157:H7 | 第38-51页 |
| 1 材料与仪器 | 第38-39页 |
| 1.1 实验菌株与原料 | 第38页 |
| 1.2 主要材料与试剂 | 第38-39页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-42页 |
| 2.1 引物设计与合成 | 第39-40页 |
| 2.2 细菌培养、计数及细菌DNA提取 | 第40页 |
| 2.3 EMA处理E.coliO157:H7样品 | 第40页 |
| 2.4 EMA-Rti-LAMP定量检测活的E.coliO157:H7 | 第40页 |
| 2.5 荧光显微镜计数法检测活的E.coliO157:H7 | 第40-41页 |
| 2.6 E.coliO157:H7菌悬液多次冻融试验 | 第41页 |
| 2.7 寡营养低温诱导E.coliO157:H7 | 第41页 |
| 2.8 VBNC状态E.coliO157:H7人工模拟污染鸡肉样品 | 第41页 |
| 2.9 Rti-LAMP反应 | 第41-42页 |
| 2.10 琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-50页 |
| 3.1 EMA-Rti-LAMP定量检测E.coliO157:H7活菌标准曲线的建立 | 第42页 |
| 3.2 荧光计数定量检测E.coliO157:H7活菌方法的建立 | 第42-44页 |
| 3.3 冻融后E.coliO157:H7活菌数及VBNC状态菌数的定量检测 | 第44-45页 |
| 3.4 EMA-Rti-LAMP监测低温诱导下VBNC状态的E.coliO157:H7 | 第45-47页 |
| 3.5 EMA-Rti-LAMP检测模拟污染鸡肉中VBNC状态的E.coliO157:H7 | 第47-49页 |
| 3.6 三种方法对比检测市售鸡肉样品中的E.coliO157:H7 | 第49-50页 |
| 4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第五章 总结与展望 | 第51-53页 |
| 1 总结 | 第51-52页 |
| 2 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |
