| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 重要的水稻病害及研究进展概述 | 第12-13页 |
| 1.2 水稻细菌性条斑病(Bacterial leaf streak,BLS) | 第13页 |
| 1.3 水稻免疫机制研究进展 | 第13-19页 |
| 1.3.1 植物免疫机制概述 | 第13-14页 |
| 1.3.2 PAMP触发的免疫 | 第14-16页 |
| 1.3.2.1 Flagellin-OsFLS2介导的免疫 | 第15页 |
| 1.3.2.2 Chitin-LysM结构蛋白介导的免疫 | 第15-16页 |
| 1.3.2.3 PGN-LysM结构蛋白介导的免疫 | 第16页 |
| 1.3.2.4 Ax21-XA21介导的免疫 | 第16页 |
| 1.3.3 PAMP引发的下游信号传导 | 第16-18页 |
| 1.3.3.1 OsSERK2与水稻免疫 | 第16-17页 |
| 1.3.3.2 OsRAC1与水稻免疫 | 第17页 |
| 1.3.3.3 外源调节与PAMP信号传导 | 第17-18页 |
| 1.3.4 效应因子触发的免疫 | 第18页 |
| 1.3.5 激素与植物免疫信号传导 | 第18-19页 |
| 1.4 效应因子抑制PAMP信号传导 | 第19-22页 |
| 1.4.1 non-TAL效应因子概述 | 第20-21页 |
| 1.4.2 TAL效应因子概述 | 第21-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 Xoc效应因子缺失突变体的构建及表型鉴定 | 第23-42页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 供试细菌菌株和质粒 | 第23-24页 |
| 2.1.2 本章试验所用的引物序列 | 第24-26页 |
| 2.1.3 培养基和溶液 | 第26-27页 |
| 2.1.4 抗生素 | 第27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-35页 |
| 2.2.1 细菌基因组DNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.2 用于基因敲除的载体构建(以xopC2为例) | 第27-31页 |
| 2.2.2.1 目的片段上游下游基因的扩增 | 第27-28页 |
| 2.2.2.2 目的片段的纯化回收 | 第28-29页 |
| 2.2.2.3 目的片段上下游的拼接 | 第29页 |
| 2.2.2.4 拼接片段与pEASY-Blunt的连接与转化 | 第29-30页 |
| 2.2.2.5 质粒DNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.2.6 pUFR80重组载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.3 突变体的构建(以△xopC2为例) | 第31-33页 |
| 2.2.4 Southern blot验证突变体 | 第33-34页 |
| 2.2.5 Xoc致病性检测 | 第34页 |
| 2.2.6 Xoc在水稻叶片中菌量的测定 | 第34-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-41页 |
| 2.3.1 Xoc中26个non-TAL效应因子保守性分析 | 第35-36页 |
| 2.3.2 Xoc non-TAL效应因子缺失突变体的构建 | 第36-37页 |
| 2.3.3 效应因子突变体的Southern blot验证 | 第37-38页 |
| 2.3.4 Xoc中14个non-TAL效应因子突变体的致病性分析 | 第38-41页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 AvrBs2抑制水稻防卫反应并提高病原菌在寄主中的致病性 | 第42-65页 |
| 3.1 试验材料 | 第42-49页 |
| 3.1.1 供试细菌菌株和质粒 | 第42-43页 |
| 3.1.2 本章试验所用的引物序列 | 第43页 |
| 3.1.3 植物品种 | 第43-44页 |
| 3.1.4 培养基和溶液 | 第44-49页 |
| 3.1.4.1 用于诱导及培养水稻愈伤的培养基 | 第44-46页 |
| 3.1.4.2 用于测定愈伤ROS的培养基 | 第46页 |
| 3.1.4.3 用于水稻原生质体转化的培养基 | 第46-47页 |
| 3.1.4.4 用于Western blot的溶液 | 第47-49页 |
| 3.1.4.5 其他培养基和溶液 | 第49页 |
| 3.1.5 抗生素 | 第49页 |
| 3.2 试验方法 | 第49-57页 |
| 3.2.1 转基因水稻抗性愈伤的诱导和培养 | 第49页 |
| 3.2.2 TPS小量法转基因水稻基因组的提取 | 第49-50页 |
| 3.2.3 蛋白提取和Western blot检测 | 第50-51页 |
| 3.2.3.1 AvrBs2蛋白的提取 | 第50页 |
| 3.2.3.2 Western blot检测 | 第50-51页 |
| 3.2.4 水稻悬浮细胞ROS的测定 | 第51页 |
| 3.2.5 水稻原生质体的分离和转化 | 第51-52页 |
| 3.2.6 质粒DNA的大量提取 | 第52-53页 |
| 3.2.7 总RNA的提取和荧光定量PCR | 第53-55页 |
| 3.2.7.1 总RNA的提取 | 第53-54页 |
| 3.2.7.2 RNA的反转录 | 第54页 |
| 3.2.7.3 荧光定量PCR检测转基因水稻PR基因表达 | 第54-55页 |
| 3.2.8 AvrBs2亚细胞定位 | 第55-57页 |
| 3.2.8.1 本试验相关的载体构建 | 第55页 |
| 3.2.8.2 农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第55-56页 |
| 3.2.8.3 AvrBs2原生质体中的定位 | 第56页 |
| 3.2.8.4 AvrBs2在本生烟中的定位 | 第56-57页 |
| 3.3 结果与分析 | 第57-64页 |
| 3.3.1 转基因水稻纯合体的鉴定 | 第57页 |
| 3.3.2 AvrBs2抑制水稻愈伤组织中PTI信号传导 | 第57-59页 |
| 3.3.3 AvrBs2抑制水稻PTI信号传导并促进病原菌菌量生长 | 第59-63页 |
| 3.3.4 AvrBs2分布于整个植物细胞内 | 第63-64页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第64-65页 |
| 第四章 Xoc效应因子XopC2靶标OsSLR1和JAZs并促进病原菌在植物中生长 | 第65-91页 |
| 4.1 试验材料 | 第66-74页 |
| 4.1.1 供试细菌菌株和质粒 | 第66-69页 |
| 4.1.2 本章试验所用的引物序列 | 第69-71页 |
| 4.1.3 植物品种 | 第71页 |
| 4.1.4 培养基和溶液 | 第71-74页 |
| 4.1.4.1 用于酵母双杂交试验所用的培养基 | 第71-72页 |
| 4.1.4.2 用于pull-down试验的溶液 | 第72-73页 |
| 4.1.4.3 其他培养基和溶液 | 第73-74页 |
| 4.2 试验方法 | 第74-81页 |
| 4.2.1 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第74页 |
| 4.2.1.1 酵母感受态细胞的制备与转化 | 第74页 |
| 4.2.1.2 互作蛋白的筛选 | 第74页 |
| 4.2.2 双分子荧光互补验证互作蛋白 | 第74-75页 |
| 4.2.3 pull-down验证互作蛋白 | 第75-78页 |
| 4.2.3.1 表达菌株构建 | 第75页 |
| 4.2.3.2 融合蛋白的表达及可溶性检测 | 第75-76页 |
| 4.2.3.3 蛋白纯化 | 第76页 |
| 4.2.3.4 BCA法测蛋白浓度 | 第76-77页 |
| 4.2.3.5 体外GST pull-down实验 | 第77-78页 |
| 4.2.4 免疫共沉淀验证蛋白互作 | 第78-79页 |
| 4.2.4.1 载体构建 | 第78页 |
| 4.2.4.2 水稻原生质体的分离及转化 | 第78页 |
| 4.2.4.3 烟草接种方法 | 第78页 |
| 4.2.4.4 总蛋白提取 | 第78-79页 |
| 4.2.4.5 免疫共沉淀(Co-IP) | 第79页 |
| 4.2.5 转基因拟南芥的构建 | 第79-80页 |
| 4.2.5.1 载体构建 | 第79页 |
| 4.2.5.2 浸花侵染法构建转基因拟南芥 | 第79-80页 |
| 4.2.5.3 转基因拟南芥的筛选 | 第80页 |
| 4.2.6 转基因拟南芥JA或SA下游响应机制的检测 | 第80页 |
| 4.2.7 转基因拟南芥中菌量生长 | 第80-81页 |
| 4.3 结果与分析 | 第81-90页 |
| 4.3.1 XopC2与OsSLR1的互作验证 | 第81-82页 |
| 4.3.2 OsSLR1与OsJAZs在体内与体外互作 | 第82-83页 |
| 4.3.3 XopC2与OsJAZs在体内与体外互作 | 第83-84页 |
| 4.3.4 XopC2、OsSLR1和OsJAZ9的互作区域 | 第84-86页 |
| 4.3.5 XopC2与AtJAZs相互作用 | 第86页 |
| 4.3.6 XopC2促进拟南芥JA信号的传导 | 第86-87页 |
| 4.3.7 XopC2抑制拟南芥PR基因的表达和气孔开放 | 第87-88页 |
| 4.3.8 XopC2促进病原菌在植物中的生长 | 第88-90页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第90-91页 |
| 第五章 全文总结与研究展望 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103页 |
