摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第11-12页 |
1 SOCS3/4在动物免疫调控和疫病发生中的作用研究进展 | 第12-20页 |
1.1 热应激的一般危害 | 第12页 |
1.2 热应激与免疫抑制 | 第12-14页 |
1.3 SOCS家族 | 第14-19页 |
1.3.1 SOCS家族概述 | 第14页 |
1.3.2 SOCS家族成员结构 | 第14-15页 |
1.3.3 SOCS家族分类 | 第15-17页 |
1.3.4 SOCS介导的信号通路 | 第17-18页 |
1.3.5 猪SOCS家族的组织表达谱 | 第18-19页 |
1.3.6 SOCS家族与猪免疫调控和疾病发生的研究 | 第19页 |
1.4 研究展望 | 第19-20页 |
2 猪SOCS3基因克隆、生物信息学分析及其在热应激条件下的表达 | 第20-30页 |
2.1 材料与方法 | 第20-23页 |
2.1.1 试验材料和仪器 | 第20-21页 |
2.1.2 实验方法 | 第21-23页 |
2.2 试验结果 | 第23-28页 |
2.2.1 RNA样品的鉴定 | 第23页 |
2.2.2 猪SOCS3基因的克隆 | 第23页 |
2.2.3 猪SOCS3基因序列特征 | 第23-25页 |
2.2.4 猪SOCS3基因同源性分析 | 第25页 |
2.2.5 疏水性分析 | 第25页 |
2.2.6 亚细胞定位 | 第25-26页 |
2.2.7 二级结构与三维结构分析 | 第26页 |
2.2.8 热应激条件下猪不同组织SOCS3mRNA的表达 | 第26-28页 |
2.3 讨论 | 第28-29页 |
2.4 小结 | 第29-30页 |
3 猪SOCS4基因克隆、生物信息学分析及其在热应激条件下的表达 | 第30-39页 |
3.1 材料与方法 | 第30-32页 |
3.1.1 试验材料和仪器 | 第30页 |
3.1.2 实验方法 | 第30-32页 |
3.2 实验结果 | 第32-37页 |
3.2.1 RNA样品的鉴定 | 第32页 |
3.2.2 猪SOCS4基因的克隆 | 第32页 |
3.2.3 猪SOCS4基因序列特征 | 第32-33页 |
3.2.4 猪SOCS4基因同源性分析 | 第33-34页 |
3.2.5 疏水性分析 | 第34-35页 |
3.2.6 亚细胞定位 | 第35-36页 |
3.2.7 二级结构与三维结构分析 | 第36页 |
3.2.8 热应激条件下SOCS4的表达 | 第36-37页 |
3.3 讨论 | 第37-38页 |
3.4 小结 | 第38-39页 |
4 SOCS3调控热应激猪肠上皮细胞NF-κB活性的分子机制 | 第39-50页 |
4.1 试验材料与仪器 | 第39-40页 |
4.1.1 主要试剂 | 第39-40页 |
4.1.2 主要仪器 | 第40页 |
4.2 试验方法 | 第40-43页 |
4.2.1 真核表达载体的构建 | 第40页 |
4.2.2 SOCS3基因敲除模型的建立 | 第40页 |
4.2.3 细胞培养 | 第40-41页 |
4.2.4 瞬时转染 | 第41-42页 |
4.2.5 试验设计 | 第42页 |
4.2.6 荧光定量PCR | 第42页 |
4.2.7 Westernblot | 第42-43页 |
4.2.8 荧光素酶活性的检测 | 第43页 |
4.2.9 统计分析 | 第43页 |
4.3 试验结果 | 第43-48页 |
4.3.1 真核表达载体的构建 | 第43页 |
4.3.2 共转染体系的鉴定 | 第43-44页 |
4.3.3 SOCS3对HSP70介导的NF-κB活性的影响 | 第44-46页 |
4.3.4 SOCS3基因敲除对NF-κB活性的影响 | 第46页 |
4.3.5 SOCS3经降解Mal而抑制HSP70诱导的NF-κB活化 | 第46-48页 |
4.4 讨论 | 第48-49页 |
4.5 小结 | 第49-50页 |
5 SOCS4调控热应激猪肠上皮细胞NF-κB活性的分子机制 | 第50-59页 |
5.1 试验材料与仪器 | 第50页 |
5.1.1 主要试剂 | 第50页 |
5.1.2 主要仪器 | 第50页 |
5.2 试验方法 | 第50-52页 |
5.2.1 真核表达载体的构建 | 第50-51页 |
5.2.2 SOCS4基因敲除模型的建立 | 第51页 |
5.2.3 细胞培养 | 第51页 |
5.2.4 瞬时转染 | 第51页 |
5.2.5 试验设计 | 第51页 |
5.2.6 荧光定量 | 第51-52页 |
5.2.7 WesternBlot | 第52页 |
5.2.8 荧光素酶活性检测 | 第52页 |
5.2.9 统计分析 | 第52页 |
5.3 试验结果 | 第52-55页 |
5.3.1 真核表达载体的构建 | 第52页 |
5.3.2 共转染体系的鉴定 | 第52页 |
5.3.3 SOCS4对HSP70介导的NF-κB活性的影响 | 第52-53页 |
5.3.4 SOCS4基因敲除对NF-κB活性的影响 | 第53-55页 |
5.3.5 SOCS4抑制NF-κB活性并不影响Mal蛋白的变化 | 第55页 |
5.4 讨论 | 第55-58页 |
5.5 小结 | 第58-59页 |
6 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72-73页 |
导师简介 | 第73页 |