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SOCS3/4调控热应激猪肠上皮细胞NF-κB活性的分子机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩写词表第11-12页
1 SOCS3/4在动物免疫调控和疫病发生中的作用研究进展第12-20页
    1.1 热应激的一般危害第12页
    1.2 热应激与免疫抑制第12-14页
    1.3 SOCS家族第14-19页
        1.3.1 SOCS家族概述第14页
        1.3.2 SOCS家族成员结构第14-15页
        1.3.3 SOCS家族分类第15-17页
        1.3.4 SOCS介导的信号通路第17-18页
        1.3.5 猪SOCS家族的组织表达谱第18-19页
        1.3.6 SOCS家族与猪免疫调控和疾病发生的研究第19页
    1.4 研究展望第19-20页
2 猪SOCS3基因克隆、生物信息学分析及其在热应激条件下的表达第20-30页
    2.1 材料与方法第20-23页
        2.1.1 试验材料和仪器第20-21页
        2.1.2 实验方法第21-23页
    2.2 试验结果第23-28页
        2.2.1 RNA样品的鉴定第23页
        2.2.2 猪SOCS3基因的克隆第23页
        2.2.3 猪SOCS3基因序列特征第23-25页
        2.2.4 猪SOCS3基因同源性分析第25页
        2.2.5 疏水性分析第25页
        2.2.6 亚细胞定位第25-26页
        2.2.7 二级结构与三维结构分析第26页
        2.2.8 热应激条件下猪不同组织SOCS3mRNA的表达第26-28页
    2.3 讨论第28-29页
    2.4 小结第29-30页
3 猪SOCS4基因克隆、生物信息学分析及其在热应激条件下的表达第30-39页
    3.1 材料与方法第30-32页
        3.1.1 试验材料和仪器第30页
        3.1.2 实验方法第30-32页
    3.2 实验结果第32-37页
        3.2.1 RNA样品的鉴定第32页
        3.2.2 猪SOCS4基因的克隆第32页
        3.2.3 猪SOCS4基因序列特征第32-33页
        3.2.4 猪SOCS4基因同源性分析第33-34页
        3.2.5 疏水性分析第34-35页
        3.2.6 亚细胞定位第35-36页
        3.2.7 二级结构与三维结构分析第36页
        3.2.8 热应激条件下SOCS4的表达第36-37页
    3.3 讨论第37-38页
    3.4 小结第38-39页
4 SOCS3调控热应激猪肠上皮细胞NF-κB活性的分子机制第39-50页
    4.1 试验材料与仪器第39-40页
        4.1.1 主要试剂第39-40页
        4.1.2 主要仪器第40页
    4.2 试验方法第40-43页
        4.2.1 真核表达载体的构建第40页
        4.2.2 SOCS3基因敲除模型的建立第40页
        4.2.3 细胞培养第40-41页
        4.2.4 瞬时转染第41-42页
        4.2.5 试验设计第42页
        4.2.6 荧光定量PCR第42页
        4.2.7 Westernblot第42-43页
        4.2.8 荧光素酶活性的检测第43页
        4.2.9 统计分析第43页
    4.3 试验结果第43-48页
        4.3.1 真核表达载体的构建第43页
        4.3.2 共转染体系的鉴定第43-44页
        4.3.3 SOCS3对HSP70介导的NF-κB活性的影响第44-46页
        4.3.4 SOCS3基因敲除对NF-κB活性的影响第46页
        4.3.5 SOCS3经降解Mal而抑制HSP70诱导的NF-κB活化第46-48页
    4.4 讨论第48-49页
    4.5 小结第49-50页
5 SOCS4调控热应激猪肠上皮细胞NF-κB活性的分子机制第50-59页
    5.1 试验材料与仪器第50页
        5.1.1 主要试剂第50页
        5.1.2 主要仪器第50页
    5.2 试验方法第50-52页
        5.2.1 真核表达载体的构建第50-51页
        5.2.2 SOCS4基因敲除模型的建立第51页
        5.2.3 细胞培养第51页
        5.2.4 瞬时转染第51页
        5.2.5 试验设计第51页
        5.2.6 荧光定量第51-52页
        5.2.7 WesternBlot第52页
        5.2.8 荧光素酶活性检测第52页
        5.2.9 统计分析第52页
    5.3 试验结果第52-55页
        5.3.1 真核表达载体的构建第52页
        5.3.2 共转染体系的鉴定第52页
        5.3.3 SOCS4对HSP70介导的NF-κB活性的影响第52-53页
        5.3.4 SOCS4基因敲除对NF-κB活性的影响第53-55页
        5.3.5 SOCS4抑制NF-κB活性并不影响Mal蛋白的变化第55页
    5.4 讨论第55-58页
    5.5 小结第58-59页
6 结论第59-60页
参考文献第60-71页
致谢第71-72页
作者简介第72-73页
导师简介第73页

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