摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第1章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 免疫综述 | 第14-15页 |
1.1.1 先天性免疫 | 第14页 |
1.1.2 适应性免疫 | 第14-15页 |
1.1.3 先天性免疫和适应性免疫的关系 | 第15页 |
1.2 硬骨鱼类免疫系统 | 第15-17页 |
1.2.1 免疫组织和器官 | 第15-16页 |
1.2.2 免疫细胞 | 第16页 |
1.2.3 体液免疫因子 | 第16-17页 |
1.3 硬骨鱼类免疫球蛋白 | 第17-24页 |
1.3.1 硬骨鱼类免疫球蛋白的结构 | 第17-18页 |
1.3.2 硬骨鱼类免疫球蛋白的种类 | 第18-20页 |
1.3.3 硬骨鱼类免疫球蛋白基因座 | 第20-21页 |
1.3.4 硬骨鱼类免疫球蛋白多样性产生机制 | 第21-24页 |
第2章 绪论 | 第24-26页 |
2.1 选题背景及意义 | 第24页 |
2.2 研究目的和研究内容 | 第24-26页 |
2.2.1 研究目的 | 第24页 |
2.2.2 主要研究内容 | 第24-26页 |
第3章 尼罗罗非鱼IgM、IgT重链基因cDNA的克隆及生物信息学分析 | 第26-38页 |
3.1 引言 | 第26页 |
3.2 实验材料和仪器 | 第26-27页 |
3.2.1 实验动物 | 第26页 |
3.2.2 实验菌株 | 第26页 |
3.2.3 实验试剂及仪器 | 第26-27页 |
3.3 实验方法 | 第27-32页 |
3.3.1 尼罗罗非鱼IgM、IgT重链基因cDNA核心片段的获得 | 第27-30页 |
3.3.2 尼罗罗非鱼IgM、IgT重链5'和3 '端cDNA序列获得 | 第30-31页 |
3.3.3 尼罗罗非鱼IgM、IgT cDNA序列生物信息学分析 | 第31-32页 |
3.4 实验结果 | 第32-35页 |
3.4.1 尼罗罗非鱼IgM重链基因cDNA的克隆及生物信息学分析 | 第32页 |
3.4.2 尼罗罗非鱼IgT重链基因cDNA的克隆及生物信息学分析 | 第32-35页 |
3.5 讨论 | 第35-38页 |
3.5.1 尼罗罗非鱼IgM重链基因cDNA的生物信息学分析 | 第35-36页 |
3.5.2 尼罗罗非鱼IgT重链基因cDNA的生物信息学分析 | 第36-38页 |
第4章 尼罗罗非鱼IgM、IgT的表达模式研究 | 第38-44页 |
4.1 引言 | 第38页 |
4.2 实验材料和仪器 | 第38页 |
4.2.1 实验动物 | 第38页 |
4.2.2 实验菌株 | 第38页 |
4.2.3 实验试剂及仪器 | 第38页 |
4.3 实验方法 | 第38-40页 |
4.3.1 尼罗罗非鱼IgM、IgT的组织分布 | 第38-39页 |
4.3.2 嗜水气单孢菌对IgM、IgT表达的影响 | 第39-40页 |
4.4 实验结果 | 第40-42页 |
4.4.1 尼罗罗非鱼IgM、IgT RT-PCR结果 | 第40-41页 |
4.4.2 尼罗罗非鱼IgM、IgT qPCR结果 | 第41-42页 |
4.5 讨论 | 第42-44页 |
4.5.1 RT-PCR结果分析 | 第42页 |
4.5.2 qPCR结果分析 | 第42-44页 |
第5章 尼罗罗非鱼IgM、IgT的原核表达及纯化 | 第44-52页 |
5.1 引言 | 第44页 |
5.2 实验材料 | 第44-45页 |
5.2.1 实验动物 | 第44页 |
5.2.2 实验菌株和载体 | 第44页 |
5.2.3 实验试剂及仪器 | 第44-45页 |
5.3 实验方法 | 第45-48页 |
5.3.1 IgM、IgT cDNA片段的扩增 | 第45页 |
5.3.2 IgM、IgT重组载体的构建 | 第45-46页 |
5.3.3 重组蛋白的表达及检测 | 第46-47页 |
5.3.4 重组蛋白的纯化 | 第47-48页 |
5.4 实验结果 | 第48-50页 |
5.4.1 尼罗罗非鱼IgM CH2-4重组蛋白的诱导及纯化 | 第49页 |
5.4.2 尼罗罗非鱼IgT重组蛋白的诱导及纯化 | 第49-50页 |
5.5 讨论 | 第50-52页 |
第6章 抗尼罗罗非鱼IgM、IgT抗体的制备及特异性分析 | 第52-60页 |
6.1 引言 | 第52页 |
6.2 实验材料和仪器 | 第52-53页 |
6.2.1 实验动物 | 第52页 |
6.2.2 实验试剂及仪器 | 第52-53页 |
6.3 实验方法 | 第53-56页 |
6.3.1 免疫小鼠 | 第53页 |
6.3.2 抗血清效价检测 | 第53页 |
6.3.3 抗尼罗罗非鱼IgT单克隆抗体的制备 | 第53-55页 |
6.3.4 Western-blotting分析 | 第55-56页 |
6.3.5 ELISA检测抗体特异性 | 第56页 |
6.4 实验结果 | 第56-58页 |
6.4.1 抗尼罗罗非鱼IgM CH2-4抗体的制备及特异性分析 | 第56-58页 |
6.5 讨论 | 第58-60页 |
6.5.1 抗尼罗罗非鱼IgM CH2-4抗体特异性分析 | 第58-59页 |
6.5.2 抗尼罗罗非鱼PET-28a-IgT CH2-3单克隆抗体特异性分析 | 第59-60页 |
结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
致谢 | 第70-72页 |
发表论文 | 第72页 |