| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-33页 |
| 1.1 课题背景 | 第17-21页 |
| 1.2 研究目的和意义 | 第21页 |
| 1.3 国内外声动力研究现状分析 | 第21-30页 |
| 1.3.1 医用超声 | 第21-23页 |
| 1.3.2 超声联合声敏剂治疗肿瘤现状与声敏剂的研发 | 第23-27页 |
| 1.3.3 声动力抑制肿瘤血管生成相关研究 | 第27-29页 |
| 1.3.4 声动力促肿瘤细胞凋亡的研究进展 | 第29-30页 |
| 1.4 本文的主要工作 | 第30-33页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第30-32页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第32-33页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第33-52页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第33-36页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第33页 |
| 2.1.2 抗体 | 第33页 |
| 2.1.3 各类其它实验试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第34-35页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第35-36页 |
| 2.1.6 主要分析软件 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-52页 |
| 2.2.1 细胞培养与复苏 | 第36-37页 |
| 2.2.2 实验分组 | 第37页 |
| 2.2.3 MTT法检测5-ALA对大鼠骨肉瘤细胞的毒性 | 第37页 |
| 2.2.4 MTT法检测单纯超声治疗对大鼠骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.5 ALA-SDT声动力作用对大鼠骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第38页 |
| 2.2.6 荧光显微镜观察5-ALA细胞内PpIX代谢情况 | 第38-39页 |
| 2.2.7 Hoechst 33342和PI染色检测细胞凋亡和坏死 | 第39-40页 |
| 2.2.8 Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
| 2.2.9 Annexin V-FITC染色结合荧光成像检测细胞凋亡 | 第41页 |
| 2.2.10 透射电镜观察细胞超微结构 | 第41-42页 |
| 2.2.11 JC-1染色检测线粒体膜电位 | 第42-43页 |
| 2.2.12 DCFH-DA荧光染色检测细胞内活性氧(ROS) | 第43页 |
| 2.2.13 钙离子荧光探针检测细胞内钙离子浓度 | 第43-44页 |
| 2.2.14 Western blot检测 | 第44-46页 |
| 2.2.15 实验动物与分组 | 第46-47页 |
| 2.2.16 测量移植瘤大小 | 第47页 |
| 2.2.17 石蜡包埋及切片 | 第47页 |
| 2.2.18 苏木素-伊红(HE)染色 | 第47-48页 |
| 2.2.19 增殖检测与图像分析 | 第48页 |
| 2.2.20 TUNEL法检测凋亡 | 第48-49页 |
| 2.2.21 免疫组化实验 | 第49-51页 |
| 2.2.22 透射电镜观察移植瘤亚细胞结构变化 | 第51页 |
| 2.2.23 统计学处理 | 第51-52页 |
| 第3章 5-氨基乙酰丙酸介导声动力对大鼠骨肉瘤细胞的毒理学实验 | 第52-66页 |
| 3.1 引言 | 第52-53页 |
| 3.2 骨肉瘤细胞形态与分组制备 | 第53页 |
| 3.3 超声装置及体外治疗方法 | 第53-54页 |
| 3.4 低强度超声联合5-ALA对大鼠骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第54-64页 |
| 3.4.1 超声辐照时间对大鼠骨肉瘤细胞存活率的影响 | 第54-56页 |
| 3.4.2 不同浓度5-ALA对大鼠骨肉瘤细胞增殖的影响 | 第56-57页 |
| 3.4.3 通过荧光分光光度计法筛选最佳药物孵育时间 | 第57-59页 |
| 3.4.4 5 -ALA介导的声动力对大鼠骨肉瘤细胞的杀伤作用 | 第59-61页 |
| 3.4.5 不同超声强度对大鼠骨肉瘤细胞增殖的影响 | 第61-62页 |
| 3.4.6 比较5-ALA联合低强度超声与单独处理组对细胞生存率影响 | 第62-64页 |
| 3.5 本章小结 | 第64-66页 |
| 第4章 5-氨基乙酰丙酸介导声动力诱导体外细胞凋亡形态学 | 第66-80页 |
| 4.1 引言 | 第66-67页 |
| 4.2 细胞形态学分析 | 第67-69页 |
| 4.3 Hoechst 33342和PI染色分析细胞凋亡与坏死 | 第69-72页 |
| 4.4 Annexin V/PI染色分析细胞凋亡 | 第72-76页 |
| 4.4.1 Annexin V/PI双染结合流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第72-75页 |
| 4.4.2 激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡情况 | 第75-76页 |
| 4.5 透射电镜观察细胞超微结构变化 | 第76-78页 |
| 4.6 本章小结 | 第78-80页 |
| 第5章 5-氨基乙酰丙酸介导声动力诱导骨肉瘤细胞体外凋亡机制 | 第80-93页 |
| 5.1 引言 | 第80-81页 |
| 5.2 活性氧ROS的检测结果分析 | 第81-84页 |
| 5.3 细胞钙超载研究分析 | 第84-86页 |
| 5.4 JC-1检测线粒体膜电位 | 第86-88页 |
| 5.5 Western blot检测凋亡相关蛋白表达 | 第88-91页 |
| 5.6 本章小结 | 第91-93页 |
| 第6章 5-氨基乙酰丙酸介导的声动力对大鼠移植瘤的抑制效应及机制 | 第93-114页 |
| 6.1 引言 | 第93-94页 |
| 6.2 裸鼠移植瘤模型建立及5-ALA在瘤体内的代谢 | 第94-96页 |
| 6.2.1 裸鼠移植瘤模型建立 | 第94页 |
| 6.2.2 5 -ALA在小鼠移植瘤体内代谢PpIX情况 | 第94-96页 |
| 6.3 超声装置与在体治疗方法 | 第96-97页 |
| 6.4 在体抑瘤效果评价 | 第97-99页 |
| 6.5 病理学分析 | 第99-100页 |
| 6.6 移植瘤细胞增殖与凋亡 | 第100-110页 |
| 6.6.1 PCNA检测细胞增殖情况 | 第100-102页 |
| 6.6.2 TUNEL检测细胞凋亡情况 | 第102-104页 |
| 6.6.3 免疫组化法检测凋亡蛋白p53表达 | 第104-105页 |
| 6.6.4 免疫组化法检测凋亡蛋白Bax表达 | 第105-106页 |
| 6.6.5 免疫组化法检测抗凋亡蛋白Bcl-2表达 | 第106-108页 |
| 6.6.6 免疫组化法检测凋亡执行蛋白Caspase-3表达 | 第108-110页 |
| 6.7 移植瘤细胞超微结构改变 | 第110-113页 |
| 6.8 本章小结 | 第113-114页 |
| 结论 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-135页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 个人简历 | 第138页 |
