| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 研究现状、成果 | 第17-19页 |
| 研究目的、方法 | 第19-20页 |
| 一、大鼠在体心肌I/R损伤及IPC模型的建立及验证 | 第20-31页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第20页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第20页 |
| 1.1.3 耗材 | 第20页 |
| 1.1.4 药品与试剂 | 第20-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-24页 |
| 1.2.1 主要溶液的配制 | 第21页 |
| 1.2.2 大鼠在体心肌I/R损伤及IPC模型的建立 | 第21-22页 |
| 1.2.3 实验分组与流程 | 第22页 |
| 1.2.4 模型成功与淘汰的标志 | 第22-23页 |
| 1.2.5 心血管药效学指标观测 | 第23页 |
| 1.2.6 TTC染色法测定心肌梗死范围 | 第23-24页 |
| 1.2.7 数据处理 | 第24页 |
| 1.3 结果 | 第24-30页 |
| 1.3.1 MAP | 第24页 |
| 1.3.2 HR | 第24-27页 |
| 1.3.3 ST-段 | 第27-29页 |
| 1.3.4 缺血30 min内心律失常发生情况 | 第29页 |
| 1.3.5 心肌梗死范围 | 第29-30页 |
| 1.4 小结 | 第30-31页 |
| 二、I/R-MV及IPC-MV的分离提取及鉴定 | 第31-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第31页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第31页 |
| 2.1.3 耗材 | 第31页 |
| 2.1.4 药品与试剂 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.2.1 主要溶液的配制 | 第32页 |
| 2.2.2 实验分组及处理 | 第32-33页 |
| 2.2.3 循环血中MV的分离提取 | 第33页 |
| 2.2.4 流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测PFP中的MV | 第33-35页 |
| 2.2.5 数据处理 | 第35页 |
| 2.3 结果 | 第35-39页 |
| 2.3.1 MV的分离提取 | 第35-36页 |
| 2.3.2 不同来源PFP中PMV的浓度 | 第36-38页 |
| 2.3.3 不同来源PFP中EMV的浓度 | 第38-39页 |
| 2.4 小结 | 第39-40页 |
| 三、I/Rst-MV及IPC-MV对正常H9c2细胞影响 | 第40-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.1.1 细胞 | 第40页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 3.1.3 耗材 | 第40页 |
| 3.1.4 药品与试剂 | 第40-41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-47页 |
| 3.2.1 主要溶液的配制 | 第41-42页 |
| 3.2.2 H9c2细胞的培养 | 第42-43页 |
| 3.2.3 MV的蛋白定量 | 第43页 |
| 3.2.4 实验分组及处理方案 | 第43-44页 |
| 3.2.5 MTT法检测细胞存活率 | 第44页 |
| 3.2.6 分光光度法检测细胞培养上清中LDH活性 | 第44-45页 |
| 3.2.7 Hoechst33258染色 | 第45页 |
| 3.2.8 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第45-46页 |
| 3.2.9 数据处理 | 第46-47页 |
| 3.3 结果 | 第47-51页 |
| 3.3.1 MV的蛋白定量 | 第47-48页 |
| 3.3.2 I/Rst-MV及IPC-MV对正常H9c2细胞存活率的影响 | 第48页 |
| 3.3.3 I/Rst-MV及IPC-MV对正常H9c2细胞培养上清中LDH活性的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.4 Hoechst33258染色观察细胞形态 | 第49-50页 |
| 3.3.5 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第50-51页 |
| 3.4 小结 | 第51-52页 |
| 四、I/Rst-MV及IPC-MV对缺氧/复氧损伤H9c2细胞的影响 | 第52-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 细胞 | 第52页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 4.1.3 耗材 | 第52页 |
| 4.1.4 药品与试剂 | 第52-53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-60页 |
| 4.2.1 主要溶液的配制 | 第53-54页 |
| 4.2.2 H9c2细胞的培养 | 第54页 |
| 4.2.3 缺氧/复氧诱导的H9c2细胞损伤模型的建立 | 第54-55页 |
| 4.2.4 实验分组及给药方案 | 第55页 |
| 4.2.5 MTT法检测细胞存活率 | 第55-56页 |
| 4.2.6 Hochest 33258染色 | 第56页 |
| 4.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第56页 |
| 4.2.8 caspase 3活性检测 | 第56-58页 |
| 4.2.9 Western Blot法检测H9c2细胞中p-ERK1/2及t-ERK1/2的表达 | 第58-60页 |
| 4.2.10 数据处理 | 第60页 |
| 4.3 结果 | 第60-67页 |
| 4.3.1 I/Rst-MV及IPC-MV对H/R损伤H9c2细胞存活率的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.2 Hochest33258染色观察细胞凋亡 | 第61-62页 |
| 4.3.3 Annexin V/PI双染观察细胞凋亡 | 第62-64页 |
| 4.3.4 caspase 3活力测定 | 第64-66页 |
| 4.3.5 p-Erk1/2和t-Erk1/2蛋白表达的变化 | 第66-67页 |
| 4.4 小结 | 第67-68页 |
| 讨论 | 第68-76页 |
| 1. 大鼠在体心肌I/R及IPC模型的建立 | 第68页 |
| 2. 大鼠循环血中MV的分离提取及保存 | 第68-70页 |
| 2.1 抗凝剂的选择 | 第68-69页 |
| 2.2 离心条件的选择 | 第69页 |
| 2.3 样品的储存 | 第69-70页 |
| 3. 大鼠循环血中MV的表型鉴定 | 第70-71页 |
| 3.1 表面特异标志物的选择 | 第70页 |
| 3.2 I/R及IPC处理大鼠循环血中PMV与EMV数量的变化 | 第70-71页 |
| 4. I/Rst-MV及IPC-MV对H9c2细胞的影响 | 第71-75页 |
| 4.1 I/Rst-MV及IPC-MV对正常H9c2细胞的作用 | 第71-72页 |
| 4.2 I/Rst-MV及IPC-MV对H/R损伤的H9c2细胞的作用 | 第72-75页 |
| 5. 缺血或I/R损伤性疾病中MV的作用 | 第75-76页 |
| 5.1 在缺血或I/R损伤性疾病中MV的作用 | 第75-76页 |
| 5.2 MV可能介导IPC的心肌保护作用 | 第76页 |
| 总结与展望 | 第76-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第86-87页 |
| 综述 细胞微囊泡的生物学作用及其检测方法研究进展 | 第87-102页 |
| 综述参考文献 | 第96-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
