摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6页 |
第一章 引言 | 第11-20页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)概况 | 第11-15页 |
1.1.1 病原学特点 | 第11页 |
1.1.2 分子生物学特点 | 第11-12页 |
1.1.3 流行病学特点 | 第12-13页 |
1.1.4 致病性及感染特点 | 第13-14页 |
1.1.5 诊断技术 | 第14-15页 |
1.1.6 预防及控制 | 第15页 |
1.2 原位杂交技术的研究概况及发展 | 第15-19页 |
1.2.1 经典原位杂交技术 | 第15-16页 |
1.2.2 荧光原位杂交技术 | 第16页 |
1.2.3 RNAscope?技术 | 第16-19页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 RNAscope?检测组织切片中的PRRSV方法的建立 | 第20-28页 |
2.1 材料和方法 | 第20-24页 |
2.1.1 病毒和细胞 | 第20页 |
2.1.2 实验动物及组织样本 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
2.1.4 PRRSV人工感染动物模型的建立 | 第21页 |
2.1.5 制备石蜡切片 | 第21页 |
2.1.6 病理学观察 | 第21页 |
2.1.7 RT-qPCR检测组织中PRRSV核酸 | 第21-23页 |
2.1.8 RNAscope?检测组织切片中的PRRSV核酸 | 第23-24页 |
2.1.9 数据分析 | 第24页 |
2.2 结果 | 第24-27页 |
2.2.1 成功建立PRRSV高致病毒株HuN4感染动物模型 | 第24-26页 |
2.2.2 应用RNAscope?技术检测组织切片中的PRRSV核酸 | 第26-27页 |
2.3 讨论 | 第27-28页 |
第三章 比较RNAscope?、ISH与IHC技术的敏感性 | 第28-37页 |
3.1 材料和方法 | 第28-33页 |
3.1.1 组织样本 | 第28页 |
3.1.2 主要试剂和仪器 | 第28-29页 |
3.1.3 RNAscope?技术检测组织切片中的PRRSV | 第29页 |
3.1.4 ISH检测PRRSV | 第29-32页 |
3.1.5 IHC检测PRRSV | 第32-33页 |
3.1.6 数据分析 | 第33页 |
3.2 结果 | 第33-35页 |
3.2.1 RNAscope?敏感性高于ISH和IHC技术 | 第33-35页 |
3.3 讨论 | 第35-37页 |
第四章 RNAscope?-IHC的初步应用 | 第37-44页 |
4.1 材料和方法 | 第37页 |
4.1.1 组织样本 | 第37页 |
4.1.2 主要试剂和仪器 | 第37页 |
4.2 RNAscope?与IHC双重染色检测病毒核酸与细胞标志物 | 第37-39页 |
4.2.1 双重染色 | 第37-38页 |
4.2.2 数据分析 | 第38-39页 |
4.2.3 结果 | 第39页 |
4.3 RNAscope?与IHC双重染色检测宿主基因及病毒蛋白 | 第39-42页 |
4.3.1 TUNEL染色 | 第39-40页 |
4.3.2 RT-qPCR检测凋亡相关调节基因表达水平变化 | 第40页 |
4.3.3 RNAscope?与IHC双重染色 | 第40页 |
4.3.4 数据分析 | 第40-41页 |
4.3.5 结果 | 第41-42页 |
4.4 讨论 | 第42-44页 |
第五章 全文结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54页 |