| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第18-31页 |
| 1.1 谷氨酰胺转氨酶概述 | 第18-21页 |
| 1.1.1 TGase的来源 | 第18-19页 |
| 1.1.2 TGase作用机理 | 第19-20页 |
| 1.1.3 TGase活化机制及空间结构 | 第20-21页 |
| 1.2 TGase在食品中的应用 | 第21-23页 |
| 1.2.1 肉制品 | 第21-22页 |
| 1.2.2 乳制品 | 第22页 |
| 1.2.3 豆制品 | 第22页 |
| 1.2.4 水产品 | 第22-23页 |
| 1.2.5 面制品 | 第23页 |
| 1.3 TGase在其他工业中的应用 | 第23页 |
| 1.4 TGase国内外研究进展 | 第23-26页 |
| 1.4.1 发酵法 | 第23-24页 |
| 1.4.2 分离纯化 | 第24-25页 |
| 1.4.3 异源表达 | 第25-26页 |
| 1.5 枯草芽孢杆菌 | 第26-28页 |
| 1.5.1 枯草芽孢杆菌简介 | 第26-27页 |
| 1.5.2 枯草芽胞杆菌表达系统 | 第27-28页 |
| 1.6 课题研究的目的意义及主要内容 | 第28-31页 |
| 1.6.1 立题依据及意义 | 第28-29页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第29页 |
| 1.6.3 论文技术框架路线图 | 第29-31页 |
| 第二章 产TGase发酵培养基及发酵条件优化 | 第31-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第32页 |
| 2.1.3 培养基 | 第32-33页 |
| 2.1.4 培养方法 | 第33页 |
| 2.1.5 试验方法 | 第33-34页 |
| 2.1.6 分析方法 | 第34页 |
| 2.1.7 数据处理 | 第34-35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-48页 |
| 2.2.1 种子生长曲线及种龄的确定 | 第35页 |
| 2.2.2 发酵培养基的优化 | 第35-41页 |
| 2.2.3 发酵条件优化 | 第41-48页 |
| 2.3 本章小结 | 第48-50页 |
| 第三章 TGase分离纯化及酶学性质 | 第50-65页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第50-51页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第51页 |
| 3.1.3 培养方法 | 第51-52页 |
| 3.1.4 分离纯化方法 | 第52页 |
| 3.1.5 酶学性质研究方法 | 第52-53页 |
| 3.1.6 分析方法 | 第53-55页 |
| 3.1.7 数据处理 | 第55页 |
| 3.2 结果与分析 | 第55-64页 |
| 3.2.1 硫酸铵分级沉淀优化 | 第55-56页 |
| 3.2.2 超滤条件优化 | 第56-58页 |
| 3.2.3 凝胶层析 | 第58页 |
| 3.2.4 TGase各步纯化步骤酶活得率 | 第58-59页 |
| 3.2.5 纯化结果及SDS-PAGE电泳鉴定 | 第59页 |
| 3.2.6 TGase酶学性质 | 第59-64页 |
| 3.3 本章小结 | 第64-65页 |
| 第四章 TGase基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达 | 第65-80页 |
| 4.1 材料与方法 | 第65-72页 |
| 4.1.1 酶与试剂 | 第65-66页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第66页 |
| 4.1.3 菌株和质粒 | 第66-67页 |
| 4.1.4 主要溶液配制及培养基 | 第67页 |
| 4.1.5 试验方法 | 第67-71页 |
| 4.1.6 重组TGase性质分析 | 第71-72页 |
| 4.1.7 数据处理 | 第72页 |
| 4.2 结果与分析 | 第72-76页 |
| 4.2.1 pro-TGase基因克隆和重组枯草芽孢杆菌的构建 | 第72-73页 |
| 4.2.2 TGase蛋白表达及其纯化 | 第73-75页 |
| 4.2.3 重组TGase蛋白性质测定 | 第75-76页 |
| 4.3 讨论 | 第76-78页 |
| 4.3.1 枯草系统对smtg表达的影响 | 第76页 |
| 4.3.2 突变菌株成功表达分析 | 第76-78页 |
| 4.3.3 酶蛋白二级结构差异分析 | 第78页 |
| 4.4 本章小结 | 第78-80页 |
| 第五章 结论与展望 | 第80-82页 |
| 5.1 结论 | 第80-81页 |
| 5.2 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-89页 |
| 攻读学位期间的学术活动及成果清单 | 第89页 |