| 符号说明 | 第5-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 1 前言 | 第17-37页 |
| 1.1 国内外抗性杂草发生简述 | 第17-18页 |
| 1.2 植物的ACCase与ACCase抑制剂类除草剂 | 第18-21页 |
| 1.2.1 植物的ACCase | 第18-19页 |
| 1.2.2 ACCase抑制剂类除草剂 | 第19页 |
| 1.2.3 ACCase抑制剂类除草剂的作用机理与选择性机理 | 第19-21页 |
| 1.2.3.1 ACCase抑制剂类除草剂的作用机理 | 第19-21页 |
| 1.2.3.2 ACCase抑制剂类除草剂的选择性机理 | 第21页 |
| 1.3 杂草抗药性的产生 | 第21-22页 |
| 1.4 禾本科杂草对ACCase抑制剂类除草剂的抗性机理 | 第22-30页 |
| 1.4.1 靶标抗性机理 | 第23-25页 |
| 1.4.1.1 靶标酶敏感性降低 | 第23-24页 |
| 1.4.1.2 靶标酶的过量表达 | 第24-25页 |
| 1.4.2 非靶标抗性机理 | 第25-30页 |
| 1.4.2.1 增强的代谢作用 | 第26-28页 |
| 1.4.2.2 吸收、转运的减少 | 第28-29页 |
| 1.4.2.3 不同抗性机理导致的交互抗性 | 第29-30页 |
| 1.5 抗性杂草的检测方法 | 第30-34页 |
| 1.5.1 整株水平 | 第30-31页 |
| 1.5.1.1 整株植物测定法 | 第30-31页 |
| 1.5.1.2 幼苗检测法 | 第31页 |
| 1.5.1.3 先正达公司的RISQ法 | 第31页 |
| 1.5.1.4 等温量热法 | 第31页 |
| 1.5.1.5 叶绿素荧光造影法 | 第31页 |
| 1.5.2 器官或组织水平测定 | 第31-32页 |
| 1.5.2.1 培养皿内种子检测法 | 第31-32页 |
| 1.5.2.2 分蘖法 | 第32页 |
| 1.5.2.3 花粉萌发法 | 第32页 |
| 1.5.2.4 叶圆片法 | 第32页 |
| 1.5.3 细胞水平的检测 | 第32-33页 |
| 1.5.3.1 叶片叶绿素荧光法 | 第32页 |
| 1.5.3.2 离体叶绿体法 | 第32-33页 |
| 1.5.3.3 光合速率法 | 第33页 |
| 1.5.4 生化水平的检测 | 第33页 |
| 1.5.5 分子水平的检测 | 第33-34页 |
| 1.5.5.1 靶标酶编码基因测序法 | 第33页 |
| 1.5.5.2 AS-PCR法 | 第33页 |
| 1.5.5.3 (d)CAPS法 | 第33-34页 |
| 1.5.5.4 SNaPshot法 | 第34页 |
| 1.5.5.5 LAMP法 | 第34页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第34-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-56页 |
| 2.1 供试杂草与除草剂 | 第37-39页 |
| 2.1.1 供试杂草 | 第37-39页 |
| 2.1.1.1 供试杂草种子的采集 | 第37-38页 |
| 2.1.1.2 供试杂草种子的萌发及杂草的培养 | 第38-39页 |
| 2.2 供试除草剂与施药方法 | 第39页 |
| 2.3 蔺草对ACCase抑制剂类除草剂及其它作用位点除草剂的抗性水平 | 第39-42页 |
| 2.3.1 蔺草对精噁唑禾草灵抗性初筛 | 第39页 |
| 2.3.2 蔺草对精噁唑禾草灵的抗性水平 | 第39-40页 |
| 2.3.3 抗精噁唑禾草灵蔺草对其它药剂的抗性 | 第40-42页 |
| 2.3.4 数据处理 | 第42页 |
| 2.4 蔺草对精噁唑禾草灵的抗性机理 | 第42-56页 |
| 2.4.1 谷胱甘肽-S-转移酶的活性 | 第42-43页 |
| 2.4.1.1 供试材料 | 第42页 |
| 2.4.1.2 供试药剂 | 第42页 |
| 2.4.1.3 仪器设备 | 第42页 |
| 2.4.1.4 GST的提取与酶液浓度测定 | 第42-43页 |
| 2.4.1.5 GST活性的测定 | 第43页 |
| 2.4.2 细胞色素P450单加氧酶的活性 | 第43-44页 |
| 2.4.3 ACCase CT区域编码基因的差异 | 第44-46页 |
| 2.4.3.1 供试材料 | 第44页 |
| 2.4.3.2 供试试剂 | 第44页 |
| 2.4.3.3 主要仪器设备 | 第44页 |
| 2.4.3.4 蔺草总DNA的提取 | 第44页 |
| 2.4.3.5 CT区域编码基因的克隆 | 第44-45页 |
| 2.4.3.6 PCR产物目的条带的回收 | 第45-46页 |
| 2.4.3.7 目的DNA的连接、转化及测序比对 | 第46页 |
| 2.4.4 (d)CAPS法分析ACCase基因特定位点的单核苷酸多态性 | 第46-51页 |
| 2.4.4.1 Ile_(2041)Asn的CAPS分析 | 第47-48页 |
| 2.4.4.2 Gly_(2096)Ala的CAPS分析 | 第48-50页 |
| 2.4.4.3 Trp_(2027)Cys的dCAPS分析 | 第50-51页 |
| 2.4.5 ACCase的表达量 | 第51-56页 |
| 2.4.5.1 供试材料 | 第51页 |
| 2.4.5.2 供试试剂 | 第51-52页 |
| 2.4.5.3 总RAN的提取及质量检测 | 第52页 |
| 2.4.5.4 cDNA第一链的合成 | 第52-53页 |
| 2.4.5.5 常规PCR验证 | 第53-54页 |
| 2.4.5.6 熔解曲线分析 | 第54页 |
| 2.4.5.7 扩增效率验证 | 第54页 |
| 2.4.5.8 SYBR Green法分析抗敏种群ACCase基因转录水平的差异 | 第54-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-77页 |
| 3.1 蔺草对ACCase抑制剂类除草剂及其它作用位点除草剂的抗性水平 | 第56-65页 |
| 3.1.1 蔺草对精噁唑禾草灵抗性初筛 | 第56页 |
| 3.1.2 菵草对精噁唑禾草灵的抗性水平 | 第56-58页 |
| 3.1.3 菵草对其它除草剂的抗性 | 第58-65页 |
| 3.2 蔺草对精噁唑禾草灵产生抗性的机理 | 第65-77页 |
| 3.2.1 谷胱甘肽-S-转移酶的活性 | 第65-66页 |
| 3.2.2 细胞色素P450单加氧酶的活性 | 第66-67页 |
| 3.2.3 ACCaseCT区域编码基因的差异 | 第67-71页 |
| 3.2.4 (d)CAPS分析ACCase基因特定位点的单核苷酸多态性 | 第71-74页 |
| 3.2.4.1 Ile_(2041)Asn的CAPS分析 | 第71-72页 |
| 3.2.4.2 Gly_(2096)Ala的CAPS分析 | 第72-73页 |
| 3.2.4.3 Trp_(2027)Cys的dCAPS分析 | 第73-74页 |
| 3.2.5 ACCase的表达量 | 第74-77页 |
| 3.2.5.1 总RAN的提取、质量检测及cDNA克隆 | 第74页 |
| 3.2.5.2 常规PCR验证 | 第74-75页 |
| 3.2.5.3 熔解曲线分析 | 第75页 |
| 3.2.5.4 扩增效率分析 | 第75-76页 |
| 3.2.5.5 抗敏种群ACCase基因转录水平的差异 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-84页 |
| 4.1 抗性菵草的发生 | 第77页 |
| 4.2 菵草对精噁唑禾草灵的抗性机理 | 第77-80页 |
| 4.2.1 靶标抗性机理的多态性 | 第77-79页 |
| 4.2.2 非靶标抗性普遍存在 | 第79-80页 |
| 4.3 菵草对其它ACCase抑制剂类除草剂的抗性 | 第80-82页 |
| 4.3.1 对炔草酯的抗性 | 第80页 |
| 4.3.2 对烯禾啶和烯草酮的抗性 | 第80-81页 |
| 4.3.3 对唑啉草酯的抗性 | 第81-82页 |
| 4.4 蔺草对ALS抑制剂类除草剂剂的抗性 | 第82页 |
| 4.5 (d)CAPS分析方法的准确性 | 第82-84页 |
| 5 结论 | 第84-86页 |
| 6 参考文献 | 第86-103页 |
| 7 致谢 | 第103-104页 |
| 8 攻读学位期间论文发表情况 | 第104页 |
