摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩写表 | 第9-15页 |
1 前言 | 第15-26页 |
1.1 甘蔗宿根矮化病的研究现状 | 第15-21页 |
1.1.1 甘蔗宿根矮化病发生历史 | 第15-16页 |
1.1.2 甘蔗宿根矮化病的致病菌 | 第16页 |
1.1.3 甘蔗宿根矮化病的症状 | 第16-17页 |
1.1.4 甘蔗宿根矮化病的危害与传播 | 第17页 |
1.1.5 甘蔗宿根矮化病的诊断 | 第17-19页 |
1.1.6 甘蔗宿根矮化病的防治 | 第19-20页 |
1.1.7 甘蔗宿根矮化病的抗性育种 | 第20-21页 |
1.2 植物抗病机制研究进展 | 第21-24页 |
1.2.1 防御酶活性与植物抗病性 | 第21-23页 |
1.2.2 蛋白质组学与植物的抗病性 | 第23-24页 |
1.3 研究的目的意义 | 第24-25页 |
1.4 研究的技术路线 | 第25-26页 |
2 甘蔗宿根矮化病菌的分离培养、鉴定及多克隆抗体的制备 | 第26-38页 |
2.1 材料与方法 | 第26-29页 |
2.1.1 实验材料 | 第26页 |
2.1.2 主要生化试剂和仪器 | 第26页 |
2.1.3 样品的采集和处理 | 第26-27页 |
2.1.4 样品感染RSD病菌的PCR检测 | 第27页 |
2.1.5 RSD病菌的分离与培养 | 第27-28页 |
2.1.6 病原菌形态学鉴定 | 第28页 |
2.1.7 病原菌分子生物学鉴定 | 第28页 |
2.1.8 rDNA-ITS序列与系统发育分析 | 第28页 |
2.1.9 抗原的制备与纯化 | 第28页 |
2.1.10 抗血清的制备与纯化 | 第28-29页 |
2.1.11 多克隆抗体的效价测定 | 第29页 |
2.1.12 自制的与引进美国的RSD多克隆抗体TBIA检测的比较 | 第29页 |
2.2 结果 | 第29-35页 |
2.2.1 样品的PCR检测结果 | 第29-30页 |
2.2.2 病原菌分离纯化及形态学特征 | 第30-31页 |
2.2.3 菌液PCR检测结果 | 第31-32页 |
2.2.4 病原菌rDNA-ITS序列的BLAST比对与亲缘关系分析 | 第32-34页 |
2.2.5 RSD多克隆抗体的效价测定结果 | 第34页 |
2.2.6 自制RSD多克隆抗体与美国RSD多克隆抗体TBIA检测结果的比较 | 第34-35页 |
2.3 讨论 | 第35-36页 |
2.4 小结 | 第36-38页 |
3 宿根矮化病菌诱导下甘蔗防御酶活性的变化 | 第38-47页 |
3.1 材料与方法 | 第38-39页 |
3.1.1 供试品种 | 第38页 |
3.1.2 实验材料与处理 | 第38页 |
3.1.3 测定项目与方法 | 第38-39页 |
3.1.4 数据分析 | 第39页 |
3.2 结果与分析 | 第39-45页 |
3.2.1 DNA提取结果 | 第39-40页 |
3.2.2 PCR检测结果 | 第40-41页 |
3.2.3 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片CAT活性的影响 | 第41-42页 |
3.2.4 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片SOD活性的影响 | 第42-43页 |
3.2.5 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片POD活性的影响 | 第43页 |
3.2.6 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片APX活性的影响 | 第43-44页 |
3.2.7 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片GR活性的影响 | 第44-45页 |
3.3 讨论 | 第45-46页 |
3.4 小结 | 第46-47页 |
4 宿根矮化病菌侵染后对甘蔗蛋白质表达的影响 | 第47-66页 |
4.1 材料与方法 | 第47-52页 |
4.1.1 甘蔗品种 | 第47页 |
4.1.2 接种与采样 | 第47页 |
4.1.3 主要生化试剂 | 第47页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第47页 |
4.1.5 样品蛋白质的提取 | 第47-48页 |
4.1.6 蛋白的溶解和定量 | 第48页 |
4.1.7 双向凝胶电泳 | 第48-50页 |
4.1.8 凝胶染色 | 第50-51页 |
4.1.9 图像分析 | 第51页 |
4.1.10 差异蛋白点质谱鉴定及数据库分析 | 第51-52页 |
4.2 结果与分析 | 第52-60页 |
4.2.1 甘蔗蔗汁双向电泳体系优化 | 第52-53页 |
4.2.2 甘蔗蔗汁总蛋白单向SDS-PAGE | 第53-54页 |
4.2.3 RSD病原菌胁迫下甘蔗汁蛋白质的2-DE分析 | 第54-56页 |
4.2.4 差异蛋白质点的质谱鉴定 | 第56-59页 |
4.2.5 鉴定的蛋白质点功能分类 | 第59-60页 |
4.3 讨论 | 第60-65页 |
4.3.1 参与防卫反应的蛋白 | 第60-62页 |
4.3.2 参与代谢调节的蛋白 | 第62-63页 |
4.3.3 参与信号传导的蛋白 | 第63页 |
4.3.4 参与细胞生长、分裂的蛋白 | 第63-64页 |
4.3.5 参与蛋白加工相关蛋白 | 第64-65页 |
4.4 小结 | 第65-66页 |
5 RSD胁迫下差异基因的克隆与表达分析 | 第66-119页 |
5.1 材料与方法 | 第66-75页 |
5.1.1 试验材料及处理 | 第66页 |
5.1.2 主要试剂 | 第66页 |
5.1.3 主要仪器 | 第66-67页 |
5.1.4 甘蔗总RNA的提取 | 第67页 |
5.1.5 总RNA质量的检测 | 第67页 |
5.1.6 cDNA第一链的合成 | 第67-68页 |
5.1.7 基因cDNA全长获得 | 第68-70页 |
5.1.8 生物信息学分析 | 第70页 |
5.1.9 基因的原核表达 | 第70-73页 |
5.1.10 基因的实时荧光定量表达分析 | 第73-75页 |
5.2 结果与分析 | 第75-113页 |
5.2.1 甘蔗茎总RNA及cDNA质量 | 第75页 |
5.2.2 相关基因cDNA全长的克隆及序列分析 | 第75-113页 |
5.3 讨论 | 第113-118页 |
5.3.1 类异黄酮还原酶基因(SoIRL) | 第113-114页 |
5.3.2 乙醇脱氢酶基因(SoADHl) | 第114-116页 |
5.3.3 NADP异柠檬酸脱氢酶基因(SoNADP-1DH) | 第116-117页 |
5.3.4 咖啡酸3-O-转移酶基因(SoCOMT) | 第117-118页 |
5.4 小结 | 第118-119页 |
6 结论 | 第119-122页 |
6.1 全文总结 | 第119-121页 |
6.2 论文创新点 | 第121页 |
6.3 问题与展望 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-137页 |
附录 | 第137-138页 |
致谢 | 第138-139页 |
发表论文情况 | 第139页 |