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宿根矮化病菌侵染后甘蔗防御酶活性和蛋白质表达的变化

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩写表第9-15页
1 前言第15-26页
    1.1 甘蔗宿根矮化病的研究现状第15-21页
        1.1.1 甘蔗宿根矮化病发生历史第15-16页
        1.1.2 甘蔗宿根矮化病的致病菌第16页
        1.1.3 甘蔗宿根矮化病的症状第16-17页
        1.1.4 甘蔗宿根矮化病的危害与传播第17页
        1.1.5 甘蔗宿根矮化病的诊断第17-19页
        1.1.6 甘蔗宿根矮化病的防治第19-20页
        1.1.7 甘蔗宿根矮化病的抗性育种第20-21页
    1.2 植物抗病机制研究进展第21-24页
        1.2.1 防御酶活性与植物抗病性第21-23页
        1.2.2 蛋白质组学与植物的抗病性第23-24页
    1.3 研究的目的意义第24-25页
    1.4 研究的技术路线第25-26页
2 甘蔗宿根矮化病菌的分离培养、鉴定及多克隆抗体的制备第26-38页
    2.1 材料与方法第26-29页
        2.1.1 实验材料第26页
        2.1.2 主要生化试剂和仪器第26页
        2.1.3 样品的采集和处理第26-27页
        2.1.4 样品感染RSD病菌的PCR检测第27页
        2.1.5 RSD病菌的分离与培养第27-28页
        2.1.6 病原菌形态学鉴定第28页
        2.1.7 病原菌分子生物学鉴定第28页
        2.1.8 rDNA-ITS序列与系统发育分析第28页
        2.1.9 抗原的制备与纯化第28页
        2.1.10 抗血清的制备与纯化第28-29页
        2.1.11 多克隆抗体的效价测定第29页
        2.1.12 自制的与引进美国的RSD多克隆抗体TBIA检测的比较第29页
    2.2 结果第29-35页
        2.2.1 样品的PCR检测结果第29-30页
        2.2.2 病原菌分离纯化及形态学特征第30-31页
        2.2.3 菌液PCR检测结果第31-32页
        2.2.4 病原菌rDNA-ITS序列的BLAST比对与亲缘关系分析第32-34页
        2.2.5 RSD多克隆抗体的效价测定结果第34页
        2.2.6 自制RSD多克隆抗体与美国RSD多克隆抗体TBIA检测结果的比较第34-35页
    2.3 讨论第35-36页
    2.4 小结第36-38页
3 宿根矮化病菌诱导下甘蔗防御酶活性的变化第38-47页
    3.1 材料与方法第38-39页
        3.1.1 供试品种第38页
        3.1.2 实验材料与处理第38页
        3.1.3 测定项目与方法第38-39页
        3.1.4 数据分析第39页
    3.2 结果与分析第39-45页
        3.2.1 DNA提取结果第39-40页
        3.2.2 PCR检测结果第40-41页
        3.2.3 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片CAT活性的影响第41-42页
        3.2.4 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片SOD活性的影响第42-43页
        3.2.5 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片POD活性的影响第43页
        3.2.6 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片APX活性的影响第43-44页
        3.2.7 RSD病原菌胁迫对甘蔗茎、叶片GR活性的影响第44-45页
    3.3 讨论第45-46页
    3.4 小结第46-47页
4 宿根矮化病菌侵染后对甘蔗蛋白质表达的影响第47-66页
    4.1 材料与方法第47-52页
        4.1.1 甘蔗品种第47页
        4.1.2 接种与采样第47页
        4.1.3 主要生化试剂第47页
        4.1.4 主要仪器设备第47页
        4.1.5 样品蛋白质的提取第47-48页
        4.1.6 蛋白的溶解和定量第48页
        4.1.7 双向凝胶电泳第48-50页
        4.1.8 凝胶染色第50-51页
        4.1.9 图像分析第51页
        4.1.10 差异蛋白点质谱鉴定及数据库分析第51-52页
    4.2 结果与分析第52-60页
        4.2.1 甘蔗蔗汁双向电泳体系优化第52-53页
        4.2.2 甘蔗蔗汁总蛋白单向SDS-PAGE第53-54页
        4.2.3 RSD病原菌胁迫下甘蔗汁蛋白质的2-DE分析第54-56页
        4.2.4 差异蛋白质点的质谱鉴定第56-59页
        4.2.5 鉴定的蛋白质点功能分类第59-60页
    4.3 讨论第60-65页
        4.3.1 参与防卫反应的蛋白第60-62页
        4.3.2 参与代谢调节的蛋白第62-63页
        4.3.3 参与信号传导的蛋白第63页
        4.3.4 参与细胞生长、分裂的蛋白第63-64页
        4.3.5 参与蛋白加工相关蛋白第64-65页
    4.4 小结第65-66页
5 RSD胁迫下差异基因的克隆与表达分析第66-119页
    5.1 材料与方法第66-75页
        5.1.1 试验材料及处理第66页
        5.1.2 主要试剂第66页
        5.1.3 主要仪器第66-67页
        5.1.4 甘蔗总RNA的提取第67页
        5.1.5 总RNA质量的检测第67页
        5.1.6 cDNA第一链的合成第67-68页
        5.1.7 基因cDNA全长获得第68-70页
        5.1.8 生物信息学分析第70页
        5.1.9 基因的原核表达第70-73页
        5.1.10 基因的实时荧光定量表达分析第73-75页
    5.2 结果与分析第75-113页
        5.2.1 甘蔗茎总RNA及cDNA质量第75页
        5.2.2 相关基因cDNA全长的克隆及序列分析第75-113页
    5.3 讨论第113-118页
        5.3.1 类异黄酮还原酶基因(SoIRL)第113-114页
        5.3.2 乙醇脱氢酶基因(SoADHl)第114-116页
        5.3.3 NADP异柠檬酸脱氢酶基因(SoNADP-1DH)第116-117页
        5.3.4 咖啡酸3-O-转移酶基因(SoCOMT)第117-118页
    5.4 小结第118-119页
6 结论第119-122页
    6.1 全文总结第119-121页
    6.2 论文创新点第121页
    6.3 问题与展望第121-122页
参考文献第122-137页
附录第137-138页
致谢第138-139页
发表论文情况第139页

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