致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第20-31页 |
1.1 引言 | 第20-21页 |
1.2 苹果酸分泌调控机制 | 第21-25页 |
1.2.1 苹果酸转运蛋白的发现 | 第21页 |
1.2.2 模式Ⅰ植物小麦苹果酸分泌调控机制 | 第21-23页 |
1.2.3 模式Ⅱ植物拟南芥苹果酸分泌调控机制 | 第23-24页 |
1.2.4 其他植物苹果酸分泌调控机制 | 第24-25页 |
1.3 柠檬酸分泌调控机制 | 第25-29页 |
1.3.1 柠檬酸转运蛋白的发现 | 第25页 |
1.3.2 高粱柠檬酸分泌调控机制 | 第25-26页 |
1.3.3 大麦柠檬酸分泌调控机制 | 第26-27页 |
1.3.4 拟南芥柠檬酸分泌调控机制 | 第27-28页 |
1.3.5 小麦柠檬酸分泌调控机制 | 第28-29页 |
1.3.6 其他植物柠檬酸分泌调控机制 | 第29页 |
1.4 草酸分泌调控机制 | 第29-31页 |
第二章 问题的提出、技术路线及拟解决的关键问题 | 第31-35页 |
2.1 问题的提出 | 第31-33页 |
2.2 技术路线 | 第33-34页 |
2.3 拟解决的关键问题 | 第34-35页 |
第三章 铝诱导饭豆根尖 VuMATE1表达和柠檬酸分泌调控机理初探 | 第35-53页 |
3.1 材料与方法 | 第36-39页 |
3.1.1 植物材料和培养方法 | 第36页 |
3.1.2 处理方法 | 第36-37页 |
3.1.3 不同处理下VuMATE1表达和柠檬酸分泌量测定 | 第37页 |
3.1.4 VuMATE1启动子的克隆 | 第37-38页 |
3.1.5 VuMATE1_p::GUS转基因株系GUS表达分析 | 第38-39页 |
3.2 结果与分析 | 第39-49页 |
3.2.1 铝处理不同时间段VuMATE1表达和柠檬酸分泌模式 | 第39-41页 |
3.2.2 La对饭豆根尖VuMATE1表达和柠檬酸分泌的影响 | 第41页 |
3.2.3 蛋白重新合成与铝诱导饭豆根尖VuMATE1表达和柠檬酸分泌相关 | 第41-45页 |
3.2.4 蛋白磷酸化与VuMATE1表达和柠檬酸分泌相关 | 第45-48页 |
3.2.5 VuMATE1基因GUS组织定位分析 | 第48-49页 |
3.3 讨论 | 第49-53页 |
第四章 饭豆 VuMATE1启动子根尖特异铝响应元件的分离 | 第53-66页 |
4.1 材料与方法 | 第53-57页 |
4.1.1 植物材料与培养条件 | 第53-54页 |
4.1.2 2Kb VuMATE1启动子的克隆 | 第54页 |
4.1.3 VuMATE1启动子顺式元件分析和转录起始位点确定 | 第54-55页 |
4.1.4 启动子缺失表达载体的构建和转基因材料的获得 | 第55-56页 |
4.1.5 VuMATE1_(Pros)::GUS转基因植株GUS表达分析 | 第56页 |
4.1.6 酵母单杂交试验 | 第56-57页 |
4.2 结果与分析 | 第57-63页 |
4.2.1 VuMATE1启动子顺式元件分析和转录起始位点确定 | 第57-59页 |
4.2.2 VuMATE1_(Pros)::GUS系列拟南芥转基因株系的获得 | 第59页 |
4.2.3 VuMATE1_(Pros)::GUS转基因株系GUS表达分析 | 第59-61页 |
4.2.4 候选片段生物信息学分析 | 第61页 |
4.2.5 候选片段与VuSTOP1转录因子酵母单杂交试验 | 第61-63页 |
4.3 讨论 | 第63-66页 |
第五章 VuMATE1在饭豆铁营养中的功能研究 | 第66-78页 |
5.1 材料与方法 | 第66-69页 |
5.1.1 植物材料和培养方法 | 第66-67页 |
5.1.2 基因表达分析和柠檬酸分泌量测定 | 第67页 |
5.1.3 VuMATE1基因组织和细胞学定位 | 第67-68页 |
5.1.4 拟南芥frd3-1突变体回复实验 | 第68-69页 |
5.2 结果与分析 | 第69-76页 |
5.2.1 VuMATE1组织定位分析 | 第69-71页 |
5.2.2 VuMATE1不能回复拟南芥frd3-1突变体缺铁表型 | 第71-73页 |
5.2.3 VuMATE1细胞特异性定位 | 第73-74页 |
5.2.4 缺铁对饭豆根系柠檬酸分泌的影响 | 第74页 |
5.2.5 缺铁对VuMATE1表达的影响 | 第74-76页 |
5.3 讨论 | 第76-78页 |
第六章 饭豆 VuMATE2基因的克隆和功能研究 | 第78-94页 |
6.1 材料与方法 | 第78-83页 |
6.1.1 植物材料与培养条件 | 第78页 |
6.1.2 VuMATE2 cDNA、基因组DNA和启动子序列的克隆 | 第78-80页 |
6.1.3 VuMATE2基因结构和生物信息学分析 | 第80页 |
6.1.4 VuMATE2基因表达分析 | 第80页 |
6.1.5 VuMATE2细胞定位 | 第80-82页 |
6.1.6 VuMATE2基因功能研究 | 第82-83页 |
6.2 结果与分析 | 第83-91页 |
6.2.1 VuMATE2基因克隆和序列分析 | 第83-85页 |
6.2.2 VuMATE2表达分析 | 第85-87页 |
6.2.3 VuMATE2细胞定位 | 第87页 |
6.2.4 超表达株系和回复株系耐铝性分析 | 第87-89页 |
6.2.5 铝含量与耐铝性相关性分析 | 第89-91页 |
6.3 讨论 | 第91-94页 |
第七章 结论与展望 | 第94-96页 |
7.1 结论 | 第94页 |
7.2 展望 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-106页 |
个人简历 | 第106-107页 |
博士期间发表论文情况 | 第107页 |