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蓝藻NdhP蛋白在抵抗高光胁迫中的分子机理研究

中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩写第12-14页
第一章 文献综述第14-28页
    1.1 环境胁迫对微藻的危害性第14页
    1.2 微藻抵抗环境胁迫的作用机制第14-15页
    1.3 环式电子传递的研究进展第15-26页
        1.3.1 发现第15页
        1.3.2 主要途径第15-22页
        1.3.3 生理功能第22-25页
        1.3.4 分子调控机理第25-26页
    1.4 本研究的目的和意义第26-28页
第二章 材料与方法第28-47页
    2.1 试验材料及培养条件第28页
    2.2 试验方法第28-47页
        2.2.1 集胞藻 6803 全基因组 DNA 提取第28-29页
        2.2.2 集胞藻 6803 转座子突变体库构建和筛选第29-30页
        2.2.3 同源重组载体的构建第30-34页
        2.2.4 集胞藻 6803 的自然转化第34-35页
        2.2.5 突变体的 DNA 水平鉴定第35页
        2.2.6 突变体的转录水平鉴定第35-37页
        2.2.7 突变体的生理活性检测方法第37-39页
        2.2.8 激光共聚焦显微镜操作方法第39-40页
        2.2.9 集胞藻 6803 膜的分离第40-42页
        2.2.10 拓扑结构分析第42-43页
        2.2.11 蛋白电泳及免疫印迹第43-44页
        2.2.12 酵母双杂交第44-46页
        2.2.13 生物信息学分析第46-47页
第三章 结果与分析第47-80页
    3.1 集胞藻 6803 高光敏感突变体的筛选和鉴定第47-49页
    3.2 ΔndhP 突变体的构建和分子鉴定第49-51页
    3.3 ΔndhP 突变体的生理活性检测第51-56页
        3.3.1 NDH-CET 活性第51-53页
        3.3.2 生长曲线和线性电子传递活性第53-54页
        3.3.3 光系统 II 的活性第54-55页
        3.3.4 光系统 I 的活性第55-56页
    3.4 ΔndhP 突变体的生化分析第56-58页
        3.4.1 NDH-1 复合体的组装效率分析第56-57页
        3.4.2 NDH-1 复合体的热稳定性分析第57-58页
    3.5 NdhP 蛋白的生物信息学分析第58-60页
    3.6 抗体的制备第60-65页
        3.6.1 同源重组构建 WT-ndhP-yfp-his6 突变株第60-61页
        3.6.2 WT-ndhP-yfp-his6 突变株的鉴定第61-65页
    3.7 NdhP 蛋白的亚细胞定位第65-68页
        3.7.1 NdhP 是一个内周类囊体膜蛋白第65-66页
        3.7.2 NdhP 蛋白的拓扑结构分析第66-68页
    3.8 分子调控机理第68-80页
        3.8.1 NdhP 是 NDH-1L 复合体所特有的亚基第68-72页
        3.8.2 NdhP 碳末端是维持 NDH-1L 复合体稳定性所必须第72-77页
        3.8.3 NdhP 与 NdhD1、NdhF1 和 NdhB 存在相互作用第77-80页
第四章 讨论第80-89页
    4.1 NdhP 参与呼吸电子传递第80-81页
    4.2 NdhP 不参与二氧化碳吸收第81-82页
    4.3 进化过程中 NdhP 的功能发生了重大改变第82-87页
    4.4 NdhP 损伤环式电子传递可能的分子机理第87-89页
第五章 总结与展望第89-92页
    5.1 总结第89-90页
    5.2 展望第90-92页
参考文献第92-105页
致谢第105-107页
附录:攻读博士学位期间发表文章第107页

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