中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩写 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-28页 |
1.1 环境胁迫对微藻的危害性 | 第14页 |
1.2 微藻抵抗环境胁迫的作用机制 | 第14-15页 |
1.3 环式电子传递的研究进展 | 第15-26页 |
1.3.1 发现 | 第15页 |
1.3.2 主要途径 | 第15-22页 |
1.3.3 生理功能 | 第22-25页 |
1.3.4 分子调控机理 | 第25-26页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-47页 |
2.1 试验材料及培养条件 | 第28页 |
2.2 试验方法 | 第28-47页 |
2.2.1 集胞藻 6803 全基因组 DNA 提取 | 第28-29页 |
2.2.2 集胞藻 6803 转座子突变体库构建和筛选 | 第29-30页 |
2.2.3 同源重组载体的构建 | 第30-34页 |
2.2.4 集胞藻 6803 的自然转化 | 第34-35页 |
2.2.5 突变体的 DNA 水平鉴定 | 第35页 |
2.2.6 突变体的转录水平鉴定 | 第35-37页 |
2.2.7 突变体的生理活性检测方法 | 第37-39页 |
2.2.8 激光共聚焦显微镜操作方法 | 第39-40页 |
2.2.9 集胞藻 6803 膜的分离 | 第40-42页 |
2.2.10 拓扑结构分析 | 第42-43页 |
2.2.11 蛋白电泳及免疫印迹 | 第43-44页 |
2.2.12 酵母双杂交 | 第44-46页 |
2.2.13 生物信息学分析 | 第46-47页 |
第三章 结果与分析 | 第47-80页 |
3.1 集胞藻 6803 高光敏感突变体的筛选和鉴定 | 第47-49页 |
3.2 ΔndhP 突变体的构建和分子鉴定 | 第49-51页 |
3.3 ΔndhP 突变体的生理活性检测 | 第51-56页 |
3.3.1 NDH-CET 活性 | 第51-53页 |
3.3.2 生长曲线和线性电子传递活性 | 第53-54页 |
3.3.3 光系统 II 的活性 | 第54-55页 |
3.3.4 光系统 I 的活性 | 第55-56页 |
3.4 ΔndhP 突变体的生化分析 | 第56-58页 |
3.4.1 NDH-1 复合体的组装效率分析 | 第56-57页 |
3.4.2 NDH-1 复合体的热稳定性分析 | 第57-58页 |
3.5 NdhP 蛋白的生物信息学分析 | 第58-60页 |
3.6 抗体的制备 | 第60-65页 |
3.6.1 同源重组构建 WT-ndhP-yfp-his6 突变株 | 第60-61页 |
3.6.2 WT-ndhP-yfp-his6 突变株的鉴定 | 第61-65页 |
3.7 NdhP 蛋白的亚细胞定位 | 第65-68页 |
3.7.1 NdhP 是一个内周类囊体膜蛋白 | 第65-66页 |
3.7.2 NdhP 蛋白的拓扑结构分析 | 第66-68页 |
3.8 分子调控机理 | 第68-80页 |
3.8.1 NdhP 是 NDH-1L 复合体所特有的亚基 | 第68-72页 |
3.8.2 NdhP 碳末端是维持 NDH-1L 复合体稳定性所必须 | 第72-77页 |
3.8.3 NdhP 与 NdhD1、NdhF1 和 NdhB 存在相互作用 | 第77-80页 |
第四章 讨论 | 第80-89页 |
4.1 NdhP 参与呼吸电子传递 | 第80-81页 |
4.2 NdhP 不参与二氧化碳吸收 | 第81-82页 |
4.3 进化过程中 NdhP 的功能发生了重大改变 | 第82-87页 |
4.4 NdhP 损伤环式电子传递可能的分子机理 | 第87-89页 |
第五章 总结与展望 | 第89-92页 |
5.1 总结 | 第89-90页 |
5.2 展望 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-105页 |
致谢 | 第105-107页 |
附录:攻读博士学位期间发表文章 | 第107页 |