| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-27页 |
| 1.1 前言 | 第7页 |
| 1.2 p53 蛋白的结构、功能与修饰 | 第7-17页 |
| 1.2.1 p53 蛋白的基本结构与主要功能 | 第7-11页 |
| 1.2.2 p53 蛋白的活化和翻译后修饰 | 第11-15页 |
| 1.2.3 p53 蛋白突变体的类型和功能 | 第15-16页 |
| 1.2.4 p53C 蛋白的基本结构与突变类型 | 第16-17页 |
| 1.3 p53C 蛋白的外源表达 | 第17-20页 |
| 1.4 p53C 蛋白的纯化 | 第20-25页 |
| 1.4.1 p53C 蛋白的初步处理 | 第20-21页 |
| 1.4.2 离子交换色谱 | 第21-23页 |
| 1.4.3 凝胶过滤色谱 | 第23-24页 |
| 1.4.4 亲和色谱 | 第24-25页 |
| 1.5 本研究的意义 | 第25-26页 |
| 1.6 本研究的主要内容 | 第26-27页 |
| 第二章 基因重组菌高效表达 p53C 蛋白 | 第27-43页 |
| 2.1 前言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第27-29页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实验设备 | 第28-29页 |
| 2.2.3 受体细胞和质粒 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.3.1 重组菌的构建 | 第29-30页 |
| 2.3.2 重组菌的培养 | 第30-31页 |
| 2.3.3 生长曲线的测定 | 第31页 |
| 2.3.4 不同诱导时机对 p53C 表达的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.5 不同诱导时间对 p53C 表达的影响 | 第32页 |
| 2.3.6 不同诱导剂浓度对 p53C 表达的影响 | 第32页 |
| 2.3.7 SDS-PAGE 电泳检测目标蛋白 | 第32-33页 |
| 2.3.8 Bradford 法测定蛋白质含量 | 第33-34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-42页 |
| 2.4.1 重组菌的构建 | 第34-35页 |
| 2.4.2 E.coli BL21（DE3）的生长曲线 | 第35-36页 |
| 2.4.3 不同诱导时机对 p53C 表达的影响 | 第36-38页 |
| 2.4.4 不同诱导时间对 p53C 表达的影响 | 第38-40页 |
| 2.4.5 不同诱导剂浓度对 p53C 表达的影响 | 第40-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 p53C 蛋白的色谱纯化 | 第43-65页 |
| 3.1 前言 | 第43-44页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第44-45页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.2.2 实验设备 | 第45页 |
| 3.3 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.3.1 色谱操作方法 | 第46页 |
| 3.3.2 离子交换色谱法分离纯化 p53C 蛋白 | 第46-47页 |
| 3.3.3 凝胶过滤色谱分离纯化 p53C 蛋白 | 第47页 |
| 3.3.4 超滤浓缩 | 第47-48页 |
| 3.3.5 亲和色谱分离纯化 p53C 蛋白 | 第48页 |
| 3.3.6 蛋白质的 SDS-PAGE 电泳分析及 Bradford 测定方法 | 第48页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第48-64页 |
| 3.4.1 离子交换色谱法分离纯化 p53C 蛋白 | 第48-61页 |
| 3.4.2 凝胶过滤色谱分离纯化 p53C 蛋白 | 第61-62页 |
| 3.4.3 亲和色谱分离纯化 p53C 蛋白 | 第62-64页 |
| 3.5 小结 | 第64-65页 |
| 第四章 结论与展望 | 第65-67页 |
| 4.1 结论 | 第65-66页 |
| 4.2 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
