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同电荷介质促进EGFP包含体复性的研究

中文摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第一章 文献综述第8-27页
    1.1 蛋白质结构与功能第8-15页
        1.1.1 蛋白质结构及稳定性第8-9页
        1.1.2 蛋白质的变性第9-10页
        1.1.3 蛋白质的复性第10-15页
    1.2 包含体蛋白质第15-19页
        1.2.1 包含体的形成第15-16页
        1.2.2 包含体的性质及优势第16-17页
        1.2.3 包含体的分离及纯化第17-18页
        1.2.4 包含体溶解变性第18-19页
    1.3 包含体体外复性方法第19-23页
        1.3.1 蛋白质体外复性的一般方法第19-22页
        1.3.2 同电荷介质辅助蛋白质复性第22-23页
    1.4 蛋白质复性后的检测方法第23-25页
    1.5 GFP 和 EGFP 简介及研究现状第25-26页
    1.6 本文的研究内容及主要目的第26-27页
第二章 阳离子交换介质的制备第27-37页
    2.1 引言第27页
    2.2 实验药品和实验设备第27-29页
        2.2.1 实验药品第27-28页
        2.2.2 实验设备第28-29页
    2.3 实验方法第29-32页
        2.3.1 pGMA 微球的制备第29页
        2.3.2 pGMA 微球表面触须式接枝聚合反应第29-30页
        2.3.3 微球表面带电修饰-磺酸基修饰第30页
        2.3.4 微球性质的表征第30-32页
    2.4 结果与讨论第32-36页
        2.4.1 微球的电荷密度第33-34页
        2.4.2 微球的粒径分布第34页
        2.4.3 微球的外部形貌第34-35页
        2.4.4 微球表面基团的红外分析第35-36页
    2.5 小结第36-37页
第三章 EGFP包含体的表达纯化及同电荷介质辅助复性第37-53页
    3.1 引言第37-38页
    3.2 实验材料和实验设备第38-39页
        3.2.1 实验材料第38页
        3.2.2 实验设备第38-39页
    3.3 实验方法第39-44页
        3.3.1 工程菌生长曲线的测定第39-40页
        3.3.2 EGFP 包含体的表达与纯化第40页
        3.3.3 SDS-PAGE 电泳检测表达产物第40-41页
        3.3.4 Bradford 法测定蛋白质含量第41-42页
        3.3.5 EGFP 包含体变性溶解第42-43页
        3.3.6 EGFP 包含体稀释复性第43页
        3.3.7 同电荷介质辅助 EGFP 包含体复性第43页
        3.3.8 同电荷介质与尿素协同辅助 EGFP 包含体复性第43-44页
        3.3.9 介质的纯化作用及重复利用效果第44页
    3.4 结果与讨论第44-51页
        3.4.1 EGFP 表达鉴定结果第44-45页
        3.4.2 介质的电荷密度对 EGFP 包含体复性效果的影响第45-48页
        3.4.3 同电荷介质与尿素的协同作用第48-49页
        3.4.4 同电荷介质对 EGFP 包含体中杂蛋白的纯化作用第49-50页
        3.4.5 介质重复利用的效果第50-51页
    3.5 小结第51-53页
第四章 结论与展望第53-55页
    4.1 结论第53页
    4.2 主要创新点第53-54页
    4.3 展望第54-55页
参考文献第55-61页
发表论文和参加科研情况说明第61-62页
附录一 实验中部分试剂配方第62-63页
附录二 标准曲线第63-64页
附录三 EGFP质谱检测结果第64-65页
致谢第65页

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