摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1.1 植物脂氧合酶(LOX)的特性及种子中 LOX 的生物学作用 | 第12-13页 |
1.2 RNA 干扰(RNAi)的发现和应用 | 第13-14页 |
1.3 作物转基因的研究现状及其前景 | 第14-17页 |
1.3.1 作物转基因的方法 | 第14-15页 |
1.3.2 作物转基因改良研究现状 | 第15-17页 |
1.4 转基因植物中外源基因检测方法 | 第17-19页 |
1.5 植物转基因的遗传稳定性及转基因拷贝数的检测 | 第19-22页 |
1.5.1 转基因植物体内外源目标基因的遗传特性 | 第19-20页 |
1.5.2 转基因植物中外源基因的拷贝数及其检测方法进展 | 第20-22页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
1.7 本研究的技术路线 | 第23-24页 |
第二章 种子低脂氧合酶转基因小麦种质的创制 | 第24-35页 |
引言 | 第24页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.2 研究方法 | 第25-26页 |
2.2.1 小麦基因组 DNA 提取及电泳检测 | 第25页 |
2.2.2 目标基因 Loxi 和 bar 基因的 PCR 检测 | 第25页 |
2.2.3 小麦种子脂氧合酶粗酶活性测定 | 第25-26页 |
2.3 结果分析 | 第26-31页 |
2.3.1 转基因小麦后代连续多代 PCR 检测和筛选 | 第26-29页 |
2.3.2 转基因小麦后代连续多代种子 LOX 活性测定 | 第29-31页 |
2.4 讨论 | 第31-34页 |
2.4.1 PCR 技术检测转基因作物株系后代 | 第31-32页 |
2.4.2 转基因株系中筛选标记基因的去除 | 第32-33页 |
2.4.3 转基因的杂交转育在作物育种中应用研究 | 第33-34页 |
2.5 小结 | 第34-35页 |
第三章 小麦转基因株系外源脂氧合酶抑制基因拷贝数分析 | 第35-43页 |
引言 | 第35页 |
3.1 实验材料 | 第35-36页 |
3.2 实验方法 | 第36-37页 |
3.2.1 Taqman 探针荧光实时定量 PCR | 第36页 |
3.2.2 内参基因 Pinb 和外源基因 Loxi 定量 PCR 扩增标准曲线的建立 | 第36页 |
3.2.3 转基因小麦株系外源基因 Loxi 拷贝数的计算 | 第36-37页 |
3.2.4 数据处理及统计分析方法 | 第37页 |
3.3 结果分析 | 第37-40页 |
3.3.1 TaqMan 实时定量 PCR 扩增及标准曲线制作 | 第37-39页 |
3.3.2 转基因株系外源基因 Loxi 拷贝数的测定 | 第39页 |
3.3.3 转基因株系种子脂氧合酶活性与拷贝数比较分析 | 第39-40页 |
3.4 讨论 | 第40-43页 |
3.4.1 转基因小麦株系外源基因 Loxi 拷贝数检测 | 第40-41页 |
3.4.2 转基因小麦株系中内源脂氧合酶基因(Lox)表达水平的抑制 | 第41-42页 |
3.4.3 本研究获得的低 LOX 活性的转基因小麦种质的育种价值和用途 | 第42-43页 |
第四章 全文结论和展望 | 第43-44页 |
4.1 全文结论 | 第43页 |
4.2 创新点 | 第43页 |
4.3 展望 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |