| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 节瓜枯萎病及其研究进展 | 第9-11页 |
| 1.1.1 节瓜简介 | 第9页 |
| 1.1.2 节瓜枯萎病的危害 | 第9页 |
| 1.1.3 节瓜枯萎病菌 | 第9-10页 |
| 1.1.4 节瓜枯萎病的防治措施 | 第10页 |
| 1.1.5 节瓜的分子生物学研究 | 第10-11页 |
| 1.2 植物 WRKY 转录因子基因的结构与功能研究进展 | 第11-16页 |
| 1.2.1 WRKY 转录因子的结构及分类 | 第11-12页 |
| 1.2.2 WRKY 转录因子的生物学功能 | 第12-16页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第16-18页 |
| 2 节瓜 CQWRKY1 转录因子的克隆及生物信息学分析 | 第18-35页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.3.1 节瓜幼苗的培育及处理 | 第19页 |
| 2.3.2 总 RNA 的提取 | 第19-20页 |
| 2.3.3 cDNA 的合成 | 第20-21页 |
| 2.3.4 3′RACE 克隆 | 第21-24页 |
| 2.3.5 5′RACE 克隆 | 第24-29页 |
| 2.4 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.4.1 CqWRKY1 的 3′ RACE 和 5′ RACE 片段分析 | 第29页 |
| 2.4.2 CqWRKY1 基因全长 cDNA 序列分析 | 第29-32页 |
| 2.4.3 CqWRKY1 转录因子的结构、定位和功能预测 | 第32页 |
| 2.4.4 CqWRKY1 蛋白的同源性及系统发育树分析 | 第32-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-35页 |
| 3 节瓜内参基因的筛选及 CQWRKY1 基因表达分析 | 第35-47页 |
| 3.1 前言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第35页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第35页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第35-36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.3.1 节瓜幼苗的培育及处理 | 第36页 |
| 3.3.2 总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第36页 |
| 3.3.3 实时荧光定量 PCR 引物的设计 | 第36-37页 |
| 3.3.4 目的片段的普通 PCR 扩增检测 | 第37页 |
| 3.3.5 各基因荧光定量 PCR 扩增 | 第37-38页 |
| 3.3.6 标准曲线分析及引物扩增效率的验证 | 第38页 |
| 3.3.7 数据处理和分析 | 第38页 |
| 3.4 结果与分析 | 第38-44页 |
| 3.4.1 总 RNA 的质量检测 | 第38-39页 |
| 3.4.2 候选内参及 WRKY 基因片段的普通 PCR 扩增 | 第39页 |
| 3.4.3 候选内参及 WRKY 基因 qRT-PCR 分析 | 第39-41页 |
| 3.4.4 候选内参基因表达稳定性分析 | 第41-42页 |
| 3.4.5 CqWRKY1 基因表达分析 | 第42-44页 |
| 3.5 讨论 | 第44-47页 |
| 3.5.1 内参基因的筛选 | 第44-45页 |
| 3.5.2 CqWRKY1 基因表达 | 第45-47页 |
| 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
