摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第13-27页 |
1.1 汞污染的现状 | 第13-17页 |
1.1.1 汞在环境中的存在方式和来源 | 第13-15页 |
1.1.2 汞污染对人体健康的危害 | 第15-17页 |
1.2 汞的检测方法 | 第17-26页 |
1.2.1 原子吸收光谱法 | 第17-18页 |
1.2.2 原子发射光谱法 | 第18-20页 |
1.2.3 原子荧光光谱法 | 第20页 |
1.2.4 电感耦合等离子体质谱法 | 第20-22页 |
1.2.5 全细胞生物传感器 | 第22-26页 |
1.3 本文研究目的 | 第26-27页 |
第二章 全细胞生物传感器的构建 | 第27-41页 |
2.1 材料与方法 | 第28-36页 |
2.1.1 材料 | 第28-31页 |
2.1.1.1 菌种和质粒 | 第28-29页 |
2.1.1.2 培养基 | 第29页 |
2.1.1.3 试剂与仪器 | 第29-30页 |
2.1.1.4 实验仪器及设备 | 第30-31页 |
2.1.2 实验方法 | 第31-36页 |
2.1.2.1 MerR 基因序列 PCR 扩增 | 第31-32页 |
2.1.2.2 PCR 产物的电泳检测 | 第32页 |
2.1.2.3 扩增片段的回收 | 第32-33页 |
2.1.2.4 感受态制备 | 第33-34页 |
2.1.2.5 目的片段与 pUC19 载体相连 | 第34页 |
2.1.2.6 化学法转化 | 第34-35页 |
2.1.2.7 挑取阳性克隆进行验证 | 第35-36页 |
2.1.2.8 生物传感器测定 Hg~(2+)含量 | 第36页 |
2.2 结果与讨论 | 第36-40页 |
2.2.1 最佳荧光蛋白信号的选择 | 第36-37页 |
2.2.2 生物传感器的构建 | 第37-38页 |
2.2.3 生物传感器的评价 | 第38-40页 |
2.2.3.1 质粒拷贝数对生物传感器的影响 | 第38-39页 |
2.2.3.2 不同金属离子对生物传感器的影响 | 第39-40页 |
2.3 小结 | 第40-41页 |
第三章 MerR 基因定向进化提高生物传感器灵敏度 | 第41-52页 |
3.1 材料与方法 | 第41-44页 |
3.1.1 材料 | 第41-43页 |
3.1.2 方法 | 第43-44页 |
3.1.2.1 随机突变文库构建 | 第43-44页 |
3.1.2.2 突变文库的筛选 | 第44页 |
3.1.2.3 突变菌株测 | 第44页 |
3.2 结果与讨论 | 第44-51页 |
3.2.1 MerR 基因突变文库构建 | 第44-46页 |
3.2.2 突变文库的筛选 | 第46-48页 |
3.2.3 突变菌株的评价 | 第48-51页 |
3.2.3.1 突变菌株对 Hg~(2+)专一性评价 | 第48-49页 |
3.2.3.2 突变菌株对 Hg~(2+)反应时间评价 | 第49-50页 |
3.2.3.3 突变菌株对 Hg~(2+)浓度评价 | 第50-51页 |
3.3 小结 | 第51-52页 |
第四章 全细胞生物传感器构建及应用 | 第52-58页 |
4.1 材料与方法 | 第52-54页 |
4.1.1 材料 | 第52-53页 |
4.1.2 方法 | 第53-54页 |
4.2 结果与讨论 | 第54-57页 |
4.2.1 标准曲线 | 第54页 |
4.2.2 北京城区内地表水样 Hg~(2+)含量测定 | 第54-57页 |
4.3 小结 | 第57-58页 |
第五章 结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
致谢 | 第65页 |