中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
符号说明 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-27页 |
1.1 纤维素生物燃料产业化前景和现状 | 第13-20页 |
1.1.1 纤维素降解工艺对后续发酵的影响 | 第13-16页 |
1.1.2 提高纤维素降解效率的途径 | 第16-19页 |
1.1.3 纤维素乙醇发展的前景与展望 | 第19-20页 |
1.2 bHLH基因及其家族研究进展 | 第20-24页 |
1.2.1 bHLH基因的结构及家族构成分析 | 第20-22页 |
1.2.2 动物中不同类型bHLH蛋白功能研究进展 | 第22-23页 |
1.2.3 植物bHLH蛋白研究现状 | 第23-24页 |
1.3 本论文的立题依据与研究内容 | 第24-27页 |
第二章 SbbHLH1对木质素合成调控机制的初步探究 | 第27-47页 |
引言 | 第27页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第27-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 菌株 | 第27页 |
2.1.3 载体 | 第27-28页 |
2.1.4 主要试剂及溶液配制 | 第28-29页 |
2.1.5 主要培养基 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-32页 |
2.2.1 微量木质素含量的溴乙酰法测定 | 第29-30页 |
2.2.2 蛋白纯化 | 第30页 |
2.2.3 Western-blot | 第30-31页 |
2.2.4 植物总蛋白粗提取 | 第31页 |
2.2.5 pull-down实验 | 第31页 |
2.2.6 感受态酵母菌的制备 | 第31-32页 |
2.2.7 酵母菌的转化 | 第32页 |
2.2.8 烟草的农杆菌侵染和转化 | 第32页 |
2.3 实验结果与分析 | 第32-42页 |
2.3.1 过表达带有GFP和HIS标签的SbbHLH1拟南芥纯系木质素合成及含量分析 | 第32-35页 |
2.3.2 SbbHLH1蛋白的纯化 | 第35-36页 |
2.3.3 SbbHLH1融合蛋白与高粱茎、叶及拟南芥互作蛋白的筛选 | 第36-41页 |
2.3.3.1 酵母双杂验证pull-down实验结果中可能“互作”的蛋白 | 第37-39页 |
2.3.3.2 AtCYP98A3与SbbHLH1互作的进一步验证 | 第39-41页 |
2.3.3.2.1 AtCYP98A3的亚细胞定位 | 第39-40页 |
2.3.3.2.2 AtCYP98A3与SbbHLH1的BiFC验证 | 第40-41页 |
2.3.4 SbbHLH1转录因子和相关基因启动子序列的的EMSA结合实验 | 第41-42页 |
2.4 讨论 | 第42-47页 |
2.4.1 MYB/NAC对木质素合成的调控 | 第42-43页 |
2.4.2 SbbHLH1对木质素合成基因及其产物的作用 | 第43-44页 |
2.4.3 其他转录因子对木质素合成的调节 | 第44页 |
2.4.4 植物细胞次生壁合成的调控网络 | 第44-47页 |
第三章 SbbHLH1转基因毛白杨的生物降解 | 第47-55页 |
引言 | 第47页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第47-48页 |
3.1.1 材料 | 第47页 |
3.1.2 主要试剂 | 第47-48页 |
3.1.3 主要器材 | 第48页 |
3.2 实验方法 | 第48-51页 |
3.2.1 阳性植株的筛选 | 第48页 |
3.2.2 微量木质素测定 | 第48页 |
3.2.3 粘性多聚赖氨酸载玻片的制备 | 第48-49页 |
3.2.4 杨树石蜡切片染色 | 第49-50页 |
3.2.5 纤维素转化率测定 | 第50-51页 |
3.2.5.1 稀酸预处理 | 第50页 |
3.2.5.2 底物中纤维素含量测定 | 第50页 |
3.2.5.3 纤维素原料的酶解 | 第50-51页 |
3.2.5.4 纤维素酶解过程中糖的测定 | 第51页 |
3.3 实验结果与分析 | 第51-54页 |
3.3.1 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的筛选 | 第51页 |
3.3.2 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的木质素含量的测定 | 第51-52页 |
3.3.3 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的石蜡切片染色结果 | 第52-53页 |
3.3.4 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的纤维素转化率测定结果的分析 | 第53-54页 |
3.4 讨论 | 第54-55页 |
附录 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第66页 |