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高粱转录因子SbbHLH1调控木质素合成代谢网络的初步研究

中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
符号说明第11-13页
第一章 文献综述第13-27页
    1.1 纤维素生物燃料产业化前景和现状第13-20页
        1.1.1 纤维素降解工艺对后续发酵的影响第13-16页
        1.1.2 提高纤维素降解效率的途径第16-19页
        1.1.3 纤维素乙醇发展的前景与展望第19-20页
    1.2 bHLH基因及其家族研究进展第20-24页
        1.2.1 bHLH基因的结构及家族构成分析第20-22页
        1.2.2 动物中不同类型bHLH蛋白功能研究进展第22-23页
        1.2.3 植物bHLH蛋白研究现状第23-24页
    1.3 本论文的立题依据与研究内容第24-27页
第二章 SbbHLH1对木质素合成调控机制的初步探究第27-47页
    引言第27页
    2.1 实验材料与试剂第27-29页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 菌株第27页
        2.1.3 载体第27-28页
        2.1.4 主要试剂及溶液配制第28-29页
        2.1.5 主要培养基第29页
    2.2 实验方法第29-32页
        2.2.1 微量木质素含量的溴乙酰法测定第29-30页
        2.2.2 蛋白纯化第30页
        2.2.3 Western-blot第30-31页
        2.2.4 植物总蛋白粗提取第31页
        2.2.5 pull-down实验第31页
        2.2.6 感受态酵母菌的制备第31-32页
        2.2.7 酵母菌的转化第32页
        2.2.8 烟草的农杆菌侵染和转化第32页
    2.3 实验结果与分析第32-42页
        2.3.1 过表达带有GFP和HIS标签的SbbHLH1拟南芥纯系木质素合成及含量分析第32-35页
        2.3.2 SbbHLH1蛋白的纯化第35-36页
        2.3.3 SbbHLH1融合蛋白与高粱茎、叶及拟南芥互作蛋白的筛选第36-41页
            2.3.3.1 酵母双杂验证pull-down实验结果中可能“互作”的蛋白第37-39页
            2.3.3.2 AtCYP98A3与SbbHLH1互作的进一步验证第39-41页
                2.3.3.2.1 AtCYP98A3的亚细胞定位第39-40页
                2.3.3.2.2 AtCYP98A3与SbbHLH1的BiFC验证第40-41页
        2.3.4 SbbHLH1转录因子和相关基因启动子序列的的EMSA结合实验第41-42页
    2.4 讨论第42-47页
        2.4.1 MYB/NAC对木质素合成的调控第42-43页
        2.4.2 SbbHLH1对木质素合成基因及其产物的作用第43-44页
        2.4.3 其他转录因子对木质素合成的调节第44页
        2.4.4 植物细胞次生壁合成的调控网络第44-47页
第三章 SbbHLH1转基因毛白杨的生物降解第47-55页
    引言第47页
    3.1 实验材料与试剂第47-48页
        3.1.1 材料第47页
        3.1.2 主要试剂第47-48页
        3.1.3 主要器材第48页
    3.2 实验方法第48-51页
        3.2.1 阳性植株的筛选第48页
        3.2.2 微量木质素测定第48页
        3.2.3 粘性多聚赖氨酸载玻片的制备第48-49页
        3.2.4 杨树石蜡切片染色第49-50页
        3.2.5 纤维素转化率测定第50-51页
            3.2.5.1 稀酸预处理第50页
            3.2.5.2 底物中纤维素含量测定第50页
            3.2.5.3 纤维素原料的酶解第50-51页
            3.2.5.4 纤维素酶解过程中糖的测定第51页
    3.3 实验结果与分析第51-54页
        3.3.1 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的筛选第51页
        3.3.2 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的木质素含量的测定第51-52页
        3.3.3 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的石蜡切片染色结果第52-53页
        3.3.4 SbbHLH1转基因毛白杨阳性植株的纤维素转化率测定结果的分析第53-54页
    3.4 讨论第54-55页
附录第55-57页
参考文献第57-65页
致谢第65-66页
学位论文评阅及答辩情况表第66页

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