| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第14-29页 |
| 第一章 褪黑素与生物钟基因的研究与应用 | 第14-22页 |
| 1.1 褪黑素的研究概况 | 第14-16页 |
| 1.1.1 褪黑素的合成途径 | 第15页 |
| 1.1.2 褪黑素的研究应用 | 第15-16页 |
| 1.2 昼夜节律与生物钟基因 | 第16-22页 |
| 1.2.1 生物钟基因的调节机制 | 第18-19页 |
| 1.2.2 生物钟基因的功能研究 | 第19-20页 |
| 1.2.3 生物钟基因与炎症 | 第20-22页 |
| 第二章 内质网应激研究进展 | 第22-29页 |
| 2.1 内质网应激研究概况 | 第22-24页 |
| 2.1.1 内质网应激与未折叠蛋白反应 | 第22-23页 |
| 2.1.2 内质网应激相关通路 | 第23-24页 |
| 2.2 脂肪细胞炎症概况 | 第24-27页 |
| 2.2.1 肥胖与脂肪细胞炎症 | 第25-26页 |
| 2.2.2 脂肪细胞炎症的发生机制 | 第26-27页 |
| 2.3 内质网应激与炎症 | 第27-29页 |
| 试验研究 | 第29-51页 |
| 前言 | 第29-30页 |
| 第三章 褪黑素通过调节生物节律对内质网应激的作用机制 | 第30-39页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 实验动物、菌株、质粒及细胞 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂及设备仪器 | 第30-31页 |
| 3.2 方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 小鼠基因组DNA的提取 | 第31页 |
| 3.2.2 BSP方法检测DNA甲基化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 PCR扩增 | 第32页 |
| 3.2.4 胶回收 | 第32页 |
| 3.2.5 双酶切鉴定及连接 | 第32-33页 |
| 3.2.6 质粒转化 | 第33页 |
| 3.2.7 脂肪细胞培养 | 第33页 |
| 3.2.8 双荧光素酶活性检测 | 第33页 |
| 3.2.9 流式细胞术 | 第33页 |
| 3.2.10 细胞免疫荧光染色 | 第33页 |
| 3.2.11 细胞总RNA提取 | 第33页 |
| 3.2.12 反转录及实时定量PCR | 第33页 |
| 3.2.13 细胞内钙离子染色 | 第33页 |
| 3.2.14 数据统计与分析 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 褪黑素对生物钟基因节律表达的影响 | 第34页 |
| 3.3.2 褪黑素通过DNA甲基化调节生物钟基因节律表达 | 第34-35页 |
| 3.3.3 褪黑素对内质网应激Ca2+荧光探针染色的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.4 褪黑素通过生物钟基因对内质网应激关键基因的转录调控 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 3.5 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 褪黑素对内质网应激诱导炎症的影响 | 第39-45页 |
| 4.1 材料 | 第39页 |
| 4.1.1 实验动物及细胞 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂及设备仪器 | 第39页 |
| 4.2 方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 脂肪细胞培养 | 第39页 |
| 4.2.2 反转录及实时定量PCR | 第39页 |
| 4.2.3 细胞总RNA提取流程 | 第39-40页 |
| 4.2.4 细胞总蛋白提取 | 第40页 |
| 4.2.5 WesternBlot检测 | 第40页 |
| 4.2.6 脂肪组织切片H&E染色 | 第40页 |
| 4.2.7 脂肪组织切片免疫组化染色 | 第40页 |
| 4.2.8 脂肪细胞免疫荧光染色 | 第40页 |
| 4.2.9 数据统计及分析 | 第40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-44页 |
| 4.3.1 褪黑素对脂肪细胞内质网应激诱导炎症基因表达的影响 | 第40-41页 |
| 4.3.2 褪黑素对脂肪细胞内质网应激抑制下炎症基因表达的影响 | 第41-42页 |
| 4.3.3 褪黑素对脂肪组织内质网应激诱导炎症基因表达的影响 | 第42页 |
| 4.3.4 褪黑素对脂肪组织内质网应激诱导炎症脂肪组织形态的影响 | 第42-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44页 |
| 4.5 小结 | 第44-45页 |
| 第五章 褪黑素减轻内质网应激通过巨噬细胞极化诱导炎症的作用机制 | 第45-51页 |
| 5.1 材料 | 第45-46页 |
| 5.1.1 实验动物及细胞 | 第45页 |
| 5.1.2 主要试剂及设备仪器 | 第45-46页 |
| 5.2 方法 | 第46页 |
| 5.2.1 脂肪细胞培养 | 第46页 |
| 5.2.2 反转录及实时定量PCR | 第46页 |
| 5.2.3 细胞总RNA提取流程 | 第46页 |
| 5.2.4 细胞总蛋白提取 | 第46页 |
| 5.2.5 WesternBlot检测 | 第46页 |
| 5.2.6 脂肪细胞免疫荧光染色 | 第46页 |
| 5.2.7 脂肪细胞与巨噬细胞共培养 | 第46页 |
| 5.2.8 数据统计及分析 | 第46页 |
| 5.3 结果与分析 | 第46-49页 |
| 5.3.1 褪黑素抑制内质网应激促进M1型巨噬细胞极化 | 第46-47页 |
| 5.3.2 褪黑素对内质网应激条件下巨噬细胞标志基因免疫荧光及形态的影响 | 第47-48页 |
| 5.3.3 褪黑素对内质网应激条件下炎性小体表达的影响 | 第48-49页 |
| 5.4 讨论 | 第49-50页 |
| 5.5 小结 | 第50-51页 |
| 结论、创新点以及进一步研究内容 | 第51-52页 |
| 1 结论 | 第51页 |
| 2 创新点 | 第51页 |
| 3 进一步研究内容 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-68页 |
| 附录 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
