摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第1章 引言 | 第9-28页 |
1.1 血小板衍生生长因子 | 第9-11页 |
1.2 血小板衍生生长因子受体 | 第11-14页 |
1.3 配体与受体的识别 | 第14页 |
1.4 PDGF-PDGFR信号通路 | 第14-16页 |
1.4.1 PI3-K通路 | 第15页 |
1.4.2 PLCγ通路 | 第15页 |
1.4.3 Ras-MAPK通路 | 第15-16页 |
1.4.4 JAK/STAT信号通路 | 第16页 |
1.5 PDGF/PDGFR与疾病的关系 | 第16-17页 |
1.5.1 PDGF/PDGFR与创伤修复 | 第16-17页 |
1.5.2 PDGF/PDGFR与肿瘤 | 第17页 |
1.5.3 PDGF/PDGFR与纤维化疾病 | 第17页 |
1.6 靶向PDGF/PDGFR的药物 | 第17-21页 |
1.6.1 小分子药物 | 第18-19页 |
1.6.2 单克隆抗体 | 第19-20页 |
1.6.3 核酸适体 | 第20-21页 |
1.6.4 RNA干扰 | 第21页 |
1.7 Saposin-lipoprotein纳米颗粒体系 | 第21-22页 |
1.8 PDGFR酪氨酸激酶受体结构研究进展 | 第22-26页 |
1.8.1 PDGFR胞外域结构 | 第22页 |
1.8.2 PDGFR跨膜域结构 | 第22-23页 |
1.8.3 PDGFR胞内域结构 | 第23-24页 |
1.8.4 PDGFR全长结构 | 第24-26页 |
1.9 研究的内容及意义 | 第26-28页 |
第2章 材料与方法 | 第28-52页 |
2.1 实验材料 | 第28-34页 |
2.1.1 载体 | 第28页 |
2.1.2 基因 | 第28页 |
2.1.3 引物 | 第28-29页 |
2.1.4 菌株和细胞 | 第29页 |
2.1.5 实验试剂 | 第29-32页 |
2.1.6 实验仪器 | 第32-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-52页 |
2.2.1 分子克隆 | 第34-42页 |
2.2.2 基础的细胞生物学方法 | 第42-44页 |
2.2.3 蛋白的表达 | 第44-45页 |
2.2.4 稳态细胞株的构建 | 第45-46页 |
2.2.5 蛋白的纯化 | 第46-47页 |
2.2.6 PDGFRβ激酶活性的检测 | 第47-48页 |
2.2.7 负染电镜样品的制备与数据收集 | 第48页 |
2.2.8 SDS-PAGE和Westernblot | 第48-50页 |
2.2.9 Saposin-lipid纳米颗粒组装 | 第50-52页 |
第3章 具有生物学活性的PDGFRβ的表达、纯化和结构表征 | 第52-64页 |
3.1 PDGFRβ双顺反子表达载体的设计与选择 | 第52-55页 |
3.1.1 PDGFRβ双顺反子表达载体的设计 | 第52-54页 |
3.1.2 PDGFRβ双顺反子表达载体的选择 | 第54-55页 |
3.2 PDGFRβ在哺乳动物细胞上的表达 | 第55-60页 |
3.2.1 比较PDGFRβ在不同细胞株上的表达水平 | 第55-56页 |
3.2.2 PDGFRβ细胞水平的激酶活性 | 第56-57页 |
3.2.3 高表达PDGFRβ稳态细胞株的构建 | 第57-60页 |
3.2.4 PDGFRβ的大规模表达 | 第60页 |
3.3 具有激酶活性的PDGFRβ的纯化 | 第60-62页 |
3.3.1 PDGFRβ的纯化 | 第60-61页 |
3.3.2 纯化的PDGFRβ的激酶活性 | 第61-62页 |
3.4 利用负染电镜对全长PDGFRβ进行初步结构研究 | 第62-64页 |
第4章 SaposinA-lipid纳米颗粒 | 第64-68页 |
4.1 SaposinA的表达载体的设计 | 第64-65页 |
4.2 SaposinA蛋白表达菌株的选择 | 第65-66页 |
4.3 SaposinA的纯化 | 第66-67页 |
4.4 SaposinA-lipid纳米颗粒 | 第67-68页 |
第5章 研究结论及意义 | 第68-71页 |
5.1 功能性PDGFRβ的表达与纯化体系 | 第68页 |
5.2 功能性PDGFRβ的结构特征 | 第68-69页 |
5.3 Saposin-lipoprotein纳米颗粒体系建立与运用 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-84页 |