摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第1章 前言 | 第9-24页 |
1.1 膜蛋白简介 | 第9-12页 |
1.1.1 膜蛋白的定义和分类 | 第9-10页 |
1.1.2 膜蛋白的性质及研究方法 | 第10-12页 |
1.2 ErbB家族介绍 | 第12-24页 |
1.2.1 ErbB家族分类及其结构 | 第12-13页 |
1.2.2 ErbB家族蛋白的功能及其配体 | 第13-17页 |
1.2.3 ErbB家族存在自抑制机制 | 第17页 |
1.2.4 生物体内同样存在抑制ErbB家族的蛋白分子 | 第17-19页 |
1.2.5 ErbB家族相关癌症 | 第19-20页 |
1.2.6 ErbB家族相关药物 | 第20-22页 |
1.2.7 卷曲螺旋可促进蛋白的二聚化 | 第22-24页 |
第2章 材料与方法 | 第24-39页 |
2.1 实验材料 | 第24-29页 |
2.1.1 质粒载体 | 第24页 |
2.1.2 cDNA的获取及引物设计 | 第24-26页 |
2.1.3 菌株及细胞 | 第26页 |
2.1.4 实验试剂 | 第26-28页 |
2.1.5 实验仪器 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-39页 |
2.2.1 蛋白表达载体的构建 | 第29-34页 |
2.2.2 细胞复苏、传代培养及细胞冻存 | 第34-35页 |
2.2.3 细胞转染 | 第35-36页 |
2.2.4 WesternBlot | 第36-37页 |
2.2.5 Confocal(共聚焦显微镜)样品制备 | 第37-38页 |
2.2.6 酶标仪法测探针结合饱和曲线 | 第38-39页 |
第3章 EGFR靶向荧光探针的初步研究 | 第39-57页 |
3.1 EGFR-HER2异源二聚体的表达 | 第39-42页 |
3.1.1 人源EGFR和HER2蛋白表达载体的构建 | 第39-41页 |
3.1.2 EGFR/HER2蛋白的表达及其形成异源二聚体的初步探究 | 第41-42页 |
3.2 靶向EGFR荧光探针的初步研究 | 第42-57页 |
3.2.1 借助NanoDrop测量荧光探针的吸光值 | 第43-46页 |
3.2.2 用酶标仪测量荧光探针的激发发射光谱 | 第46-48页 |
3.2.3 用Confocal显微镜观察荧光探针在细胞上的静态分布 | 第48-51页 |
3.2.4 酶标仪法检测荧光探针与EGFR或HER2过表达细胞的浓度依赖性吸附与结合 | 第51-56页 |
3.2.5 用Confocal显微镜观察荧光探针在活细胞上的动态结合 | 第56-57页 |
第4章 讨论及研究结论与意义 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-69页 |
附录 | 第69-70页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-73页 |