| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-41页 |
| 1.1 植物抗干旱胁迫机制的研究 | 第13-21页 |
| 1.1.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第14-15页 |
| 1.1.2 干旱胁迫信号转导过程 | 第15-17页 |
| 1.1.3 植物抗干旱的生理与分子生物学机制 | 第17-21页 |
| 1.2 植物气孔运动的研究 | 第21-33页 |
| 1.2.1 气孔运动与CO_2 | 第22-23页 |
| 1.2.2 气孔运动与光信号 | 第23-24页 |
| 1.2.3 气孔运动与ABA | 第24-27页 |
| 1.2.4 气孔运动与代谢物质 | 第27-28页 |
| 1.2.5 气孔运动与植物免疫 | 第28-29页 |
| 1.2.6 气孔运动与ROS | 第29-31页 |
| 1.2.7 电生理在气孔运动研究中的作用 | 第31-33页 |
| 1.3 线粒体丙酮酸转运体的研究进展 | 第33-38页 |
| 1.3.1 线粒体丙酮酸转运体的发现 | 第33-36页 |
| 1.3.2 线粒体丙酮酸转运体的研究进展 | 第36-38页 |
| 1.4 课题依据和主要内容 | 第38-41页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第41-75页 |
| 2.1 植物材料 | 第41页 |
| 2.2 主要试剂 | 第41页 |
| 2.3 主要载体和菌株 | 第41-42页 |
| 2.4 主要仪器 | 第42页 |
| 2.5 实验方法 | 第42-75页 |
| 2.5.1 植物材料生长条件和种植 | 第42-43页 |
| 2.5.2 质粒小量提取(碱法) | 第43-44页 |
| 2.5.3 大肠杆菌感受态细胞(Trans-T1)的制备及转化 | 第44-46页 |
| 2.5.4 农杆菌感受态细胞(GV3101)的制备及转化 | 第46-47页 |
| 2.5.5 酵母感受态的制备及转化 | 第47-49页 |
| 2.5.6 植物基因组DNA的提取 | 第49-50页 |
| 2.5.7 植物总RNA的提取、反转录和Real-time PCR | 第50-52页 |
| 2.5.8 基因的克隆 | 第52页 |
| 2.5.9 PCR扩增产物(或酶切产物片段)的回收 | 第52-54页 |
| 2.5.10 连接反应和酶切反应 | 第54-56页 |
| 2.5.11 AtMPC1序列分析 | 第56页 |
| 2.5.12 AtMPC1线粒体丙酮酸转运体(MPC)活性验证 | 第56-57页 |
| 2.5.13 AtMPC1 T-DNA插入突变体mpc1的鉴定 | 第57-59页 |
| 2.5.14 AtMPC1过表达和功能恢复株系的构建 | 第59-64页 |
| 2.5.15 AtMPC1细胞表达模式分析:亚细胞定位 | 第64-68页 |
| 2.5.16 AtMPC1组织表达模式分析:GUS染色 | 第68-69页 |
| 2.5.17 丙酮酸含量的测定 | 第69页 |
| 2.5.18 免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第69-70页 |
| 2.5.19 ROS产物荧光染色 | 第70-71页 |
| 2.5.20 生理性状实验 | 第71-72页 |
| 2.5.21 电生理学实验 | 第72-75页 |
| 第三章 结果与分析 | 第75-105页 |
| 3.1 AtMPC1在酵母中能够恢复MPC1缺失的活性 | 第75-76页 |
| 3.2 AtMPC1表达模式的分析 | 第76-80页 |
| 3.2.1 AtMPC1的细胞表达模式分析 | 第76-79页 |
| 3.2.2 AtMPC1的组织表达模式分析 | 第79-80页 |
| 3.3 AtMPC1的T-DNA插入突变体mpc1及AtMPC1过表达、功能恢复株系的鉴定 | 第80-82页 |
| 3.3.1 T-DNA插入突变体mpc1的功能缺失鉴定 | 第80-81页 |
| 3.3.2 AtMPC1过表达和功能恢复株系的筛选鉴定 | 第81-82页 |
| 3.4 AtMPC1对气孔的关闭过程起负调控作用 | 第82-85页 |
| 3.5 AtMPC1各株系的离体叶片失水率实验和植株干旱实验 | 第85-86页 |
| 3.6 AtMPC1参与对慢速阴离子通道的调控 | 第86-88页 |
| 3.7 ABA处理和干旱胁迫引起胞质丙酮酸含量提高 | 第88-89页 |
| 3.8 丙酮酸促进气孔关闭 | 第89-91页 |
| 3.9 丙酮酸促进慢速阴离子通道电流增加 | 第91-92页 |
| 3.10 丙酮酸诱导ROS产生 | 第92-96页 |
| 3.10.1 丙酮酸增加保卫细胞中ROS的含量 | 第92-93页 |
| 3.10.2 RbohD和RbohF双突变体气孔运动对丙酮酸处理不敏感 | 第93-94页 |
| 3.10.3 丙酮酸不能激活RbohD和RbohF双突变体的阴离子通道 | 第94-96页 |
| 3.11 AtMPC1与NRGA1是互作蛋白 | 第96-100页 |
| 3.11.1 AtMPC1和NRGA1免疫共沉淀实验 | 第96-97页 |
| 3.11.2 mpc1/nrga1双突变体的构建 | 第97-98页 |
| 3.11.3 mpc1/nrga1气孔运动实验 | 第98-99页 |
| 3.11.4 mpc1/nrga1离体叶片失水率实验 | 第99-100页 |
| 3.12 结果讨论 | 第100-105页 |
| 第四章 总结与展望 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-123页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及专利 | 第123-125页 |
| 致谢 | 第125-128页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第128页 |
