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氯嘧磺隆降解菌的降解特性和应用研究

摘要第11-13页
ABSTRACT第13-15页
前言第16-18页
符号与缩略语说明第18-19页
第一部分 文献综述第19-48页
    第一节 磺酰脲类除草剂的研究现状第19-33页
        1 磺酰脲类除草剂简介第19-20页
        2 磺酰脲类除草剂的作用机理第20-23页
        3 磺酰脲类除草剂的药害第23-25页
            3.1 磺酰脲类除草剂对后茬作物的药害第23页
            3.2 磺酰脲类除草剂药害发生情况第23-24页
            3.3 磺酰脲类除草剂对其它环境生物的影响第24-25页
        4 磺酰脲类除草剂的降解研究第25-29页
            4.1 磺酰脲类除草剂的微生物降解第25-27页
            4.2 磺酰脲类除草剂的化学水解第27-29页
            4.3 磺酰脲类除草剂的光解第29页
        5 磺酰脲类除草剂的检测第29-33页
            5.1 化学分析法第29-31页
            5.2 酶联免疫法第31-32页
            5.3 生物分析法第32-33页
    第二节 氯嘧磺隆的研究概况第33-36页
        1 氯嘧磺隆的品种开发简况第33页
        2 氯嘧磺隆的理化特性第33页
        3 氯嘧磺隆的作用机理第33-34页
        4 氯嘧磺隆的环境归宿第34-35页
            4.1 氯嘧磺隆的水解第34页
            4.2 氯嘧磺隆的光解第34页
            4.3 氯嘧磺隆在植物体内的降解第34页
            4.4 土壤微生物对氯嘧磺隆的降解第34-35页
        5 氯嘧磺隆使用存在的问题第35-36页
    第三节 微生物修复研究概况第36-40页
        1 生物修复的定义和分类第36页
        2 微生物修复的作用机制第36-38页
            2.1 矿化作用第36-37页
            2.2 共代谢作用第37页
            2.3 间接作用第37页
            2.4 参与微生物降解作用的生物化学过程第37-38页
        3 微生物修复的影响因素第38页
            3.1 物理化学因素第38页
            3.2 生物化学因素第38页
        4 生物强化技术第38-40页
            4.1 生物强化的种类第39页
            4.2 生物强化技术存在的问题和解决方式第39-40页
    参考文献第40-48页
第二部分 实验部分第48-134页
    第一章 氯嘧磺隆降解菌LW4的分离鉴定和降解特性研究第48-89页
        第一节 氯嘧磺隆降解菌LW4分离和鉴定第48-57页
            1 材料与方法第48-52页
                1.1 菌株、农药、试剂及培养基第48-49页
                1.2 降解菌的富集、分离和纯化第49页
                1.3 降解菌的培养特征及生理生化鉴定第49页
                1.4 菌体总DNA的提取第49页
                1.5 分离菌株的16S rDNA的PCR扩增第49-50页
                1.6 PCR产物的T/A克隆第50页
                1.7 高效感受态细胞的制备和转化第50-51页
                1.8 质粒DNA的小量提取第51页
                1.9 16S rDNA的序列测定第51页
                1.10 降解菌的系统发育分析第51页
                1.11 实验仪器第51-52页
                1.12 氯嘧磺隆的检测第52页
            2 结果与分析第52-57页
                2.1 降解菌的分离筛选第52页
                2.2 氯嘧磺隆降解菌的菌落形态和生理生化特征第52-55页
                2.3 LW4菌株的基因组DNA的提取第55页
                2.4 16S rDNA的扩增第55页
                2.5 降解菌株的系统发育分析第55-57页
        第二节 菌株LW4和LW3的生长特性比较研究第57-65页
            1 材料与方法第57-59页
                1.1 菌株、试剂与培养基第57页
                1.2 菌种制备及菌体生长量的测定方法第57-58页
                1.3 生长曲线的测定第58页
                1.4 菌株在不同碳、氮源条件下的生长第58页
                1.5 碳氮比对菌株生长的影响第58页
                1.6 温度对菌株生长的影响第58页
                1.7 培养基初始pH值对降解菌生长影响第58-59页
                1.8 通气量对菌株生长的影响第59页
                1.9 菌株的需盐性与耐盐性第59页
            2 结果与分析第59-65页
                2.1 菌株的生长曲线第59-60页
                2.2 不同碳源对菌株的生长的影响第60页
                2.3 不同氮源对菌株的生长的影响第60-61页
                2.4 碳氮比对菌株生长的影响第61-62页
                2.5 温度对菌株生长的影响第62页
                2.6 培养基初始pH对菌株生长的影响第62-63页
                2.7 通气状况对菌株生长的影响第63-64页
                2.8 菌株的耐盐性与需盐性第64-65页
        第三节 菌株LW4和LW3降解氯嘧磺隆特性的比较研究第65-76页
            1 材料与方法第65-67页
                1.1 菌株、土壤、试剂和培养基第65页
                1.2 菌株的培养和接种第65-66页
                1.3 氯嘧磺隆及其它几种磺酰脲除草剂的检测第66页
                1.4 氯嘧磺隆初始浓度对菌株降解氯嘧磺隆的影响第66页
                1.5 温度和初始pH对菌株降解氯嘧磺隆的影响第66页
                1.6 通气量和接种量对菌株降解氯嘧磺隆的影响第66-67页
                1.7 不同营养物质对菌株降解氯嘧磺隆的影响第67页
                1.8 NaCl浓度对菌株降解氯嘧磺隆的影响第67页
                1.9 金属离子对菌株降解氯嘧磺隆的影响第67页
                1.10 降解菌的降解谱第67页
                1.11 降解菌对土壤中氯嘧磺隆的降解情况第67页
            2 结果与分析第67-76页
                2.1 降解菌利用氯嘧磺隆作为唯一碳、氮源降解情况第67-69页
                2.2 氯嘧磺隆起始浓度对菌株降解氯嘧磺隆的影响第69页
                2.3 温度对菌株降解氯嘧磺隆的影响第69-70页
                2.4 初始pH值对菌株降解氯嘧磺隆的影响第70-71页
                2.5 接种量对降解菌降解氯嘧磺隆的影响第71-72页
                2.6 通气量对降解菌降解氯嘧磺隆的影响第72页
                2.7 添加营养物质对降解菌降解氯嘧磺隆的影响第72-73页
                2.8 NaCl浓度对降解菌降解氯嘧磺隆的影响第73页
                2.9 添加金属离子对降解菌降解氯嘧磺隆的影响第73-74页
                2.10 降解菌的降解谱第74-75页
                2.11 降解菌对土壤中氯嘧磺隆的降解第75-76页
        第四节 氯嘧磺隆降解菌株LW4和LW3粗酶特性的初步研究第76-83页
            1 材料与方法第76-78页
                1.1 供试菌株、培养基、试剂及仪器设备第76页
                1.2 菌株的培养第76页
                1.3 氯嘧磺隆含量的检测第76页
                1.4 粗酶液的制备第76-77页
                1.5 降解酶的定位第77页
                1.6 降解酶的类型第77页
                1.7 pH、温度,金属离子对氯嘧磺隆降解酶活性的影响第77-78页
                1.8 pH、温度对氯嘧磺隆降解酶稳定性的影响第78页
            2 结果与分析第78-83页
                2.1 氯嘧磺隆水解酶活性测定方法的建立第78页
                2.2 降解酶的细胞定位第78-79页
                2.3 pH对氯嘧磺隆酶促降解的影响第79-80页
                2.4 温度对氯嘧磺隆酶促降解的影响第80-81页
                2.5 金属离子对氯嘧磺隆酶促降解的影响第81页
                2.6 pH对氯嘧磺隆降解酶稳定性的影响第81-82页
                2.7 温度对氯嘧磺隆降解酶稳定性的影响第82-83页
        3 本章讨论第83-84页
        4 本章小结第84-86页
        参考文献第86-89页
    第二章 LW3菌株对氯嘧磺隆降解途径的研究第89-99页
        1 材料与方法第89-90页
            1.1 菌株、培养基和试剂第89页
            1.2 菌种制备第89页
            1.3 降解产物的提取与制备第89-90页
            1.4 提取物检测和定性分析第90页
        2 结果与分析第90-96页
            2.1 降解产物的HPLC检测第90-92页
            2.2 代谢中间产物的HPLC-MS分析第92-95页
            2.3 代谢途径的推测第95-96页
        3 本章讨论第96页
        4 本章小结第96-97页
        参考文献第97-99页
    第三章 氯嘧磺隆降解菌LW3的生态学效应与应用研究第99-134页
        第一节 氯嘧磺隆对土壤微生物和土壤酶活性的影响第99-112页
            1 材料与方法第99-103页
                1.1 供试农药与土壤第99-100页
                1.2 培养基第100页
                1.3 试验设计与数据处理第100页
                1.4 土壤细菌、放线菌及真菌的计数第100页
                1.5 土壤呼吸强度的测定第100-101页
                1.6 土壤过氧化氢酶活性的测定第101页
                1.7 壤多酚氧化酶活性的测定第101页
                1.8 土壤脱氢酶活性的测定第101-102页
                1.9 土壤蔗糖酶活性的测定第102页
                1.10 土壤脲酶活性的测定第102-103页
                1.11 土壤酸性磷酸酶活性测定第103页
            2 结果与分析第103-112页
                2.1 氯嘧磺隆对土壤微生物种群的影响第103-106页
                2.2 氯嘧磺隆对土壤呼吸强度的影响第106-107页
                2.3 氯嘧磺隆对土壤过氧化氢酶活性的影响第107页
                2.4 氯嘧磺隆对土壤多酚氧化酶活性的影响第107-108页
                2.5 氯嘧磺隆对土壤脱氢酶活性的影响第108-109页
                2.6 氯嘧磺隆对土壤蔗糖酶活性的影响第109-110页
                2.7 氯嘧磺隆对土壤脲酶活性的影响第110页
                2.8 氯嘧磺隆对土壤酸性磷酸酶活性的影响第110-112页
        第二节 氯嘧磺隆对玉米生长的抑制第112-115页
            1 材料与方法第112-113页
                1.1 供试玉米种子及处理第112页
                1.2 供试土壤第112页
                1.3 实验设计第112-113页
            2 结果与分析第113-115页
                2.1 红壤中不同浓度氯嘧磺隆对玉米生长的抑制第113页
                2.2 黄棕壤中不同浓度氯嘧磺隆对玉米生长的抑制第113-114页
                2.3 高沙土中不同浓度氯嘧磺隆对玉米生长的抑制第114-115页
        第三节 LW3菌株用于氯嘧磺隆污染土壤的修复研究第115-129页
            1 材料与方法第115-118页
                1.1 供试菌株、植株、培养基与试剂第115-116页
                1.2 供试土壤第116页
                1.3 菌种制备第116页
                1.4 土壤中降解菌株LW3的跟踪第116页
                1.5 接种量对LW3菌株降解三种土壤中氯嘧磺隆的影响第116-117页
                1.6 土壤温度对LW3菌株降解土壤中氯嘧磺隆的影响第117页
                1.7 土壤pH对LW3菌株降解土壤中氯嘧磺隆的影响第117页
                1.8 土壤含水量LW3菌株降解土壤中氯嘧磺隆的影响第117页
                1.9 土壤中氯嘧磺隆的提取及检测第117页
                1.10 LW3菌株解除氯嘧磺隆对玉米药害的研究第117-118页
            2 结果与分析第118-129页
                2.1 降解菌LW3的GFP标记第118页
                2.2 标记菌株LWBR3在土壤中的存活情况第118-119页
                2.3 LW3菌株在土壤中降解氯嘧磺隆的效果第119-120页
                2.4 降解菌接种量对土壤中氯嘧磺隆降解的影响第120-122页
                2.5 土壤温度对土壤中氯嘧磺隆降解的影响第122-124页
                2.6 土壤pH对土壤中氯嘧磺隆降解的影响第124-125页
                2.7 土壤含水量对土壤中氯嘧磺隆降解的影响第125-128页
                2.8 LW3菌株对玉米药害的解除效果第128-129页
        3 本章讨论第129-130页
        4 本章小结第130-131页
        参考文献第131-134页
全文总结第134-136页
本论文主要创新点及不足第136-137页
附录一 文中所用的培养基及试剂配方第137-139页
附录二 降解菌株的16S rDNA序列第139-141页
附录三 攻读博士学位期间发表的文章第141-143页
致谢第143页

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