| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 抗体及其酶解机理 | 第11-15页 |
| 1.2.1 抗体的结构及其酶切位点 | 第11-13页 |
| 1.2.2 木瓜蛋白酶降解抗体 | 第13-15页 |
| 1.2.3 胃蛋白酶降解抗体 | 第15页 |
| 1.3 抗体片段的分离纯化 | 第15-22页 |
| 1.3.1 概述 | 第15-16页 |
| 1.3.2 凝胶过滤层析 | 第16-17页 |
| 1.3.3 离子交换层析 | 第17-19页 |
| 1.3.4 亲和层析 | 第19-20页 |
| 1.3.5 混合模式层析 | 第20-22页 |
| 1.3.6 其它新型分离方法 | 第22页 |
| 1.4 本文研究思路 | 第22-25页 |
| 第二章 木瓜蛋白酶降解人免疫球蛋白G | 第25-33页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.2 hIgG的酶解 | 第26页 |
| 2.2.2.1 酶解pH | 第26页 |
| 2.2.2.2 酶加入量影响 | 第26页 |
| 2.2.2.3 半胱氨酸浓度影响 | 第26页 |
| 2.2.2.4 酶解时间曲线 | 第26页 |
| 2.2.3 蛋白质鉴定和纯度测定 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-30页 |
| 2.3.1 hIgG和酶解片段的电泳和HPLC分析 | 第27-28页 |
| 2.3.2 hIgG酶解条件优化 | 第28-30页 |
| 2.3.2.1 酶解pH | 第28-29页 |
| 2.3.2.2 酶加入量 | 第29页 |
| 2.3.2.3 半胱氨酸浓度 | 第29-30页 |
| 2.3.2.4 酶解时间 | 第30页 |
| 2.4 本章小结 | 第30-33页 |
| 第三章 人免疫球蛋白G的Fab和Fc片段制备 | 第33-39页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 材料与方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 仪器与试剂 | 第33页 |
| 3.2.2 hIgG的酶解 | 第33-34页 |
| 3.2.3 Protein A介质初步纯化酶解液 | 第34页 |
| 3.2.4 DEAE Sepharose FF介质纯化Fab片段 | 第34页 |
| 3.2.5 蛋白质鉴定和纯度测定 | 第34页 |
| 3.2.6 产品收率分析 | 第34-35页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第35-37页 |
| 3.3.1 Protein A亲和层析分离Fc片段 | 第35-36页 |
| 3.3.2 DEAE阴离子交换层析分离Fab片段 | 第36-37页 |
| 3.4 本章小结 | 第37-39页 |
| 第四章 混合模式层析介质对人IgG、Fab和Fc片段的吸附比较 | 第39-53页 |
| 4.1 引言 | 第39页 |
| 4.2 材料与方法 | 第39-41页 |
| 4.2.1 仪器与试剂 | 第39-40页 |
| 4.2.2 层析实验 | 第40页 |
| 4.2.3 Protein A亲和层析 | 第40页 |
| 4.2.4 MEP HyperCel疏水电荷诱导层析 | 第40页 |
| 4.2.5 Capto adhere混合模式层析 | 第40页 |
| 4.2.6 TOYOPEARL MX-Trp-650M混合模式层析 | 第40-41页 |
| 4.2.7 样品吸附率分析 | 第41页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第41-50页 |
| 4.3.1 Protein A亲和层析 | 第41-42页 |
| 4.3.2 MEP HyperCel疏水电荷诱导层析分离 | 第42-44页 |
| 4.3.3 Capto adhere混合模式层析分离 | 第44-47页 |
| 4.3.4 TOYOPEARL MX-Trp-650M混合模式层析分离 | 第47-50页 |
| 4.4. 本章小结 | 第50-53页 |
| 第五章 混合模式层析分离Fab和Fc片段 | 第53-57页 |
| 5.1 引言 | 第53页 |
| 5.2 材料与方法 | 第53-54页 |
| 5.2.1 仪器与试剂 | 第53页 |
| 5.2.2 hIgG的酶解 | 第53-54页 |
| 5.2.3 Capto adhere纯化酶解液 | 第54页 |
| 5.2.4 蛋白质鉴定和纯度鉴定 | 第54页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第54-56页 |
| 5.3.1 Capto adhere混合模式层析分离酶解液 | 第54-55页 |
| 5.3.2 Capto adhere穿透峰组分鉴定 | 第55-56页 |
| 5.3.3 Capto adhere洗脱峰组分鉴定 | 第56页 |
| 5.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第六章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 6.1 结论 | 第57-58页 |
| 6.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 个人简历 | 第62页 |
