中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
符号说明 | 第15-16页 |
第一章 前言 | 第16-26页 |
1.1 岩藻聚糖硫酸酯 | 第16-20页 |
1.1.1 岩藻聚糖硫酸酯概述 | 第16-18页 |
1.1.2 岩藻聚糖硫酸酯的生物活性 | 第18-20页 |
1.2 细胞凋亡 | 第20-22页 |
1.2.1 细胞凋亡概述 | 第20-22页 |
1.2.2 细胞凋亡与肿瘤 | 第22页 |
1.3 细胞自噬 | 第22-24页 |
1.3.1 细胞自噬概述 | 第22-23页 |
1.3.2 细胞自噬与细胞凋亡 | 第23-24页 |
1.3.3 细胞自噬与肿瘤 | 第24页 |
1.4 课题的研究目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 岩藻聚糖硫酸酯诱导结肠癌细胞HT-29凋亡 | 第26-44页 |
2.1 实验材料 | 第26-29页 |
2.1.1 主要试剂 | 第26-27页 |
2.1.2 主要仪器 | 第27-28页 |
2.1.3 溶液配制 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-34页 |
2.2.1 HT-29细胞的培养 | 第29页 |
2.2.2 MTT比色法检测岩藻聚糖硫酸酯对HT-29的抑制活性 | 第29-30页 |
2.2.3 光学显微镜下观察HT-29形态学的变化 | 第30页 |
2.2.4 乳酸脱氢酶(LDH)含量的测定 | 第30页 |
2.2.5 Hoechst33342细胞凋亡形态学染色 | 第30-31页 |
2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第31页 |
2.2.7 JC-1染色检测线粒体膜电位 | 第31-32页 |
2.2.8 caspase活性的检测 | 第32页 |
2.2.9 Western Blot analysis | 第32-34页 |
2.3 实验结果 | 第34-39页 |
2.3.1 岩藻聚糖硫酸酯对HT-29的抑制作用 | 第34-35页 |
2.3.2 岩藻聚糖硫酸酯诱导HT-29凋亡 | 第35-39页 |
2.4 讨论 | 第39-42页 |
2.5 本章小结 | 第42-44页 |
第三章 岩藻聚糖硫酸酯诱导结肠癌细胞HT-29自噬 | 第44-52页 |
3.1 实验材料 | 第44-45页 |
3.1.1 主要试剂 | 第44页 |
3.1.2 主要仪器 | 第44-45页 |
3.1.3 溶液配制 | 第45页 |
3.2 实验方法 | 第45-46页 |
3.2.1 MDC荧光染料检测自噬囊泡 | 第45-46页 |
3.2.2 Western Blot analysis | 第46页 |
3.3 实验结果 | 第46-49页 |
3.3.1 MDC荧光染料检测自噬囊泡 | 第46-47页 |
3.3.2 Western blot检测LC3的表达量 | 第47-49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
3.5 本章小结 | 第51-52页 |
第四章 岩藻聚糖硫酸酯诱导结肠癌细胞HT-29自噬与凋亡的关系 | 第52-62页 |
4.1 实验材料 | 第52-53页 |
4.1.1 主要试剂 | 第52页 |
4.1.2 主要仪器 | 第52-53页 |
4.2 实验方法 | 第53-54页 |
4.2.1 MTT检测自噬抑制后岩藻聚糖硫酸酯对HT-29的抑制作用 | 第53页 |
4.2.2 caspase活性的检测 | 第53页 |
4.2.3 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第53-54页 |
4.2.4 JC-1染色检测线粒体膜电位 | 第54页 |
4.2.5 MTT检测凋亡抑制后岩藻聚糖硫酸酯对HT-29的抑制作用 | 第54页 |
4.3 实验结果 | 第54-58页 |
4.3.1 MTT检测自噬抑制后岩藻聚糖硫酸酯对HT-29的抑制作用 | 第54-55页 |
4.3.2 caspase活性的检测 | 第55-56页 |
4.3.3 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第56页 |
4.3.4 JC-1染色检测线粒体膜电位 | 第56-57页 |
4.3.5 MTT检测凋亡抑制后岩藻聚糖硫酸酯对HT-29的抑制作用 | 第57-58页 |
4.4 讨论 | 第58-60页 |
4.5 本章小结 | 第60-62页 |
论文总结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
附表 | 第73页 |