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甜瓜脂氧合酶基因家族成员鉴定、表达调控及CmLOX8在果实香气合成中的作用

摘要第12-15页
Abstract第15-17页
缩略语表第18-20页
第一章 文献综述第20-33页
    1.1 脂氧合酶(LOXs)的基本特性第21-22页
        1.1.1 脂氧合酶的蛋白结构特征第21页
        1.1.2 脂氧合酶的分布第21-22页
    1.2 植物脂氧合酶的代谢途径第22-24页
    1.3 脂氧合酶的进化分类第24-25页
    1.4 LOX在植物成熟衰老过程中的作用第25-28页
        1.4.1 乙烯和LOX的关系第26-27页
        1.4.2 LOX与植物香气合成的关系第27-28页
    1.5 LOX与逆境胁迫的关系第28-30页
        1.5.1 LOX参与JA合成调控植物抗逆反应第29页
        1.5.2 LOX参与GLVs的合成调控植物的抗逆反应第29-30页
        1.5.3 LOX基因在其他途径中的逆境胁迫调控第30页
    1.6 LOX重组蛋白的生化特性鉴定第30-31页
    1.7 本研究的目的与意义第31-32页
    1.8 本研究的技术路线第32-33页
第二章 甜瓜脂氧合酶家族成员的鉴定、分类及在甜瓜生长发育过程中的表达特性第33-60页
    2.1 材料与方法第34-38页
        2.1.1 试验材料第34页
        2.1.2 试验方法第34-36页
        2.1.3 统计方法第36-38页
    2.2 结果与分析第38-55页
        2.2.1 LOXs家族成员鉴定第38-42页
        2.2.2 甜瓜LOXs基因家族的进化分析第42-45页
        2.2.3 甜瓜果实生长发育过程中果实硬度、可溶性固形物(SSC)、果皮色度和内源乙烯的变化第45-47页
        2.2.4 甜瓜果实生长发育过程中果实香气成分变化第47-50页
        2.2.5 甜瓜果实生长发育过程中果实LOX酶活性变化第50-51页
        2.2.6 LOXs基因家族成员在不同组织器官特异性表达分析第51-52页
        2.2.7 CmLOXs基因家族成员在甜瓜种子萌发过程中的表达分析第52页
        2.2.8 CmLOXs基因家族成员在甜瓜果实生长发育过程中的表达分析第52-55页
    2.3 讨论第55-58页
        2.3.1 甜瓜脂氧合酶基因家族成员的鉴定及生物信息学分析第55-56页
        2.3.2 CmLOXs基因家族成员在不同组织器官中的表达特异性第56-57页
        2.3.3 CmLOXs基因家族成员在果实发育及香气物质合成过程中的表达特异性第57-58页
    2.4 小结第58-60页
第三章 几种采后处理对甜瓜3个CmLOXs基因家族成员的表达调控第60-72页
    3.1 材料与方法第60-62页
        3.1.1 试验材料及处理第60-61页
        3.1.2 试验方法第61页
        3.1.3 统计方法第61-62页
    3.2 结果与分析第62-69页
        3.2.1 CmLOXs基因家族候选成员的克隆第62页
        3.2.2 采后处理对薄皮甜瓜果实硬度、果皮色度、SSC及内源乙烯合成的影响第62-65页
        3.2.3 采后贮藏期间薄皮甜瓜果实不同部位之间LOX酶活性和基因表达的差异第65-67页
        3.2.4 采后乙烯和1-MCP对薄皮甜瓜果实LOX酶活性和基因表达的影响第67-68页
        3.2.5 采后乙醇和低温对薄皮甜瓜果实LOX酶活性和基因表达的影响第68-69页
    3.3 讨论第69-71页
        3.3.1 采后甜瓜中LOX基因家族成员的表达特性及乙烯调控第69-70页
        3.3.2 采后甜瓜中LOX基因家族成员对乙醇处理的应答模式第70-71页
        3.3.3 采后甜瓜中LOX基因家族成员对低温处理的应答模式第71页
    3.4 小结第71-72页
第四章 CmLOX18在酿酒酵母中的异源蛋白表达、生化特性分析及亚细胞定位第72-85页
    4.1 材料与方法第73-75页
        4.1.1 质粒与菌株第73页
        4.1.2 主要试剂第73页
        4.1.3 CmLOX18蛋白在酿酒酵母中的真核表达第73-74页
        4.1.4 CmLOX18蛋白在酿酒酵母中的表达产物的分析第74页
        4.1.5 CmLOX18真核表达酶活测定及产物鉴定第74-75页
        4.1.6 CmLOX18的亚细胞定位第75页
    4.2 结果与分析第75-82页
        4.2.1 不同诱导时间CmLO18的真核表达第75-76页
        4.2.2 酵母表达重组pYES 2.1-CmLOX18蛋白的鉴定第76-77页
        4.2.3 CmLOX18真核表达蛋白的酶活力测定第77-78页
        4.2.4 CmLOX18真核表达蛋白的酶动力学参数第78页
        4.2.5 CmLOX18真核表达蛋白的产物鉴定第78-81页
        4.2.6 CmLOX18的亚细胞定位第81-82页
    4.3 讨论第82-84页
        4.3.1 CmLOX18蛋白的催化产物特异性第82页
        4.3.2 CmLOX18酶学特征与功能分析第82-83页
        4.3.3 CmLOX18蛋白的亚细胞定位与功能相关性第83-84页
    4.4 小结第84-85页
第五章 CmLOX18在番茄中的遗传转化及在果实C6挥发性物质合成中的作用第85-100页
    5.1 材料与方法第85-90页
        5.1.1 试验材料第85-86页
        5.1.2 35::CmLOX18超表达载体构建及农杆菌介导番茄的遗传转化第86-88页
        5.1.3 转基因植株的PCR鉴定第88页
        5.1.4 转基因植株的Southern blot鉴定第88-89页
        5.1.5 转基因植株的Western blot鉴定第89页
        5.1.6 转基因植株的实时荧光定量检测第89-90页
        5.1.7 转基因番茄果实香气成分的分析第90页
        5.1.8 统计方法和图像分析第90页
    5.2 结果与分析第90-96页
        5.2.1 T0代转基因番茄植株的鉴定第90-92页
        5.2.2 实时荧光定量PCR检测成熟的T1代转基因和野生型番茄果实中的LOX和HPL基因表达第92-95页
        5.2.3 C5和C6挥发性物质在转基因和野生型番茄果实中的含量第95-96页
    5.3 讨论第96-99页
        5.3.1 应用转基因技术对甜瓜基因功能的验证第96-98页
        5.3.2 甜瓜CmLOX18在香气物质合成中的作用第98-99页
    5.4 小结第99-100页
全文总结与展望第100-103页
参考文献第103-113页
致谢第113-114页
攻读学位期间发表的学术论文第114页

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