摘要 | 第12-15页 |
Abstract | 第15-17页 |
缩略语表 | 第18-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-33页 |
1.1 脂氧合酶(LOXs)的基本特性 | 第21-22页 |
1.1.1 脂氧合酶的蛋白结构特征 | 第21页 |
1.1.2 脂氧合酶的分布 | 第21-22页 |
1.2 植物脂氧合酶的代谢途径 | 第22-24页 |
1.3 脂氧合酶的进化分类 | 第24-25页 |
1.4 LOX在植物成熟衰老过程中的作用 | 第25-28页 |
1.4.1 乙烯和LOX的关系 | 第26-27页 |
1.4.2 LOX与植物香气合成的关系 | 第27-28页 |
1.5 LOX与逆境胁迫的关系 | 第28-30页 |
1.5.1 LOX参与JA合成调控植物抗逆反应 | 第29页 |
1.5.2 LOX参与GLVs的合成调控植物的抗逆反应 | 第29-30页 |
1.5.3 LOX基因在其他途径中的逆境胁迫调控 | 第30页 |
1.6 LOX重组蛋白的生化特性鉴定 | 第30-31页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第31-32页 |
1.8 本研究的技术路线 | 第32-33页 |
第二章 甜瓜脂氧合酶家族成员的鉴定、分类及在甜瓜生长发育过程中的表达特性 | 第33-60页 |
2.1 材料与方法 | 第34-38页 |
2.1.1 试验材料 | 第34页 |
2.1.2 试验方法 | 第34-36页 |
2.1.3 统计方法 | 第36-38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-55页 |
2.2.1 LOXs家族成员鉴定 | 第38-42页 |
2.2.2 甜瓜LOXs基因家族的进化分析 | 第42-45页 |
2.2.3 甜瓜果实生长发育过程中果实硬度、可溶性固形物(SSC)、果皮色度和内源乙烯的变化 | 第45-47页 |
2.2.4 甜瓜果实生长发育过程中果实香气成分变化 | 第47-50页 |
2.2.5 甜瓜果实生长发育过程中果实LOX酶活性变化 | 第50-51页 |
2.2.6 LOXs基因家族成员在不同组织器官特异性表达分析 | 第51-52页 |
2.2.7 CmLOXs基因家族成员在甜瓜种子萌发过程中的表达分析 | 第52页 |
2.2.8 CmLOXs基因家族成员在甜瓜果实生长发育过程中的表达分析 | 第52-55页 |
2.3 讨论 | 第55-58页 |
2.3.1 甜瓜脂氧合酶基因家族成员的鉴定及生物信息学分析 | 第55-56页 |
2.3.2 CmLOXs基因家族成员在不同组织器官中的表达特异性 | 第56-57页 |
2.3.3 CmLOXs基因家族成员在果实发育及香气物质合成过程中的表达特异性 | 第57-58页 |
2.4 小结 | 第58-60页 |
第三章 几种采后处理对甜瓜3个CmLOXs基因家族成员的表达调控 | 第60-72页 |
3.1 材料与方法 | 第60-62页 |
3.1.1 试验材料及处理 | 第60-61页 |
3.1.2 试验方法 | 第61页 |
3.1.3 统计方法 | 第61-62页 |
3.2 结果与分析 | 第62-69页 |
3.2.1 CmLOXs基因家族候选成员的克隆 | 第62页 |
3.2.2 采后处理对薄皮甜瓜果实硬度、果皮色度、SSC及内源乙烯合成的影响 | 第62-65页 |
3.2.3 采后贮藏期间薄皮甜瓜果实不同部位之间LOX酶活性和基因表达的差异 | 第65-67页 |
3.2.4 采后乙烯和1-MCP对薄皮甜瓜果实LOX酶活性和基因表达的影响 | 第67-68页 |
3.2.5 采后乙醇和低温对薄皮甜瓜果实LOX酶活性和基因表达的影响 | 第68-69页 |
3.3 讨论 | 第69-71页 |
3.3.1 采后甜瓜中LOX基因家族成员的表达特性及乙烯调控 | 第69-70页 |
3.3.2 采后甜瓜中LOX基因家族成员对乙醇处理的应答模式 | 第70-71页 |
3.3.3 采后甜瓜中LOX基因家族成员对低温处理的应答模式 | 第71页 |
3.4 小结 | 第71-72页 |
第四章 CmLOX18在酿酒酵母中的异源蛋白表达、生化特性分析及亚细胞定位 | 第72-85页 |
4.1 材料与方法 | 第73-75页 |
4.1.1 质粒与菌株 | 第73页 |
4.1.2 主要试剂 | 第73页 |
4.1.3 CmLOX18蛋白在酿酒酵母中的真核表达 | 第73-74页 |
4.1.4 CmLOX18蛋白在酿酒酵母中的表达产物的分析 | 第74页 |
4.1.5 CmLOX18真核表达酶活测定及产物鉴定 | 第74-75页 |
4.1.6 CmLOX18的亚细胞定位 | 第75页 |
4.2 结果与分析 | 第75-82页 |
4.2.1 不同诱导时间CmLO18的真核表达 | 第75-76页 |
4.2.2 酵母表达重组pYES 2.1-CmLOX18蛋白的鉴定 | 第76-77页 |
4.2.3 CmLOX18真核表达蛋白的酶活力测定 | 第77-78页 |
4.2.4 CmLOX18真核表达蛋白的酶动力学参数 | 第78页 |
4.2.5 CmLOX18真核表达蛋白的产物鉴定 | 第78-81页 |
4.2.6 CmLOX18的亚细胞定位 | 第81-82页 |
4.3 讨论 | 第82-84页 |
4.3.1 CmLOX18蛋白的催化产物特异性 | 第82页 |
4.3.2 CmLOX18酶学特征与功能分析 | 第82-83页 |
4.3.3 CmLOX18蛋白的亚细胞定位与功能相关性 | 第83-84页 |
4.4 小结 | 第84-85页 |
第五章 CmLOX18在番茄中的遗传转化及在果实C6挥发性物质合成中的作用 | 第85-100页 |
5.1 材料与方法 | 第85-90页 |
5.1.1 试验材料 | 第85-86页 |
5.1.2 35::CmLOX18超表达载体构建及农杆菌介导番茄的遗传转化 | 第86-88页 |
5.1.3 转基因植株的PCR鉴定 | 第88页 |
5.1.4 转基因植株的Southern blot鉴定 | 第88-89页 |
5.1.5 转基因植株的Western blot鉴定 | 第89页 |
5.1.6 转基因植株的实时荧光定量检测 | 第89-90页 |
5.1.7 转基因番茄果实香气成分的分析 | 第90页 |
5.1.8 统计方法和图像分析 | 第90页 |
5.2 结果与分析 | 第90-96页 |
5.2.1 T0代转基因番茄植株的鉴定 | 第90-92页 |
5.2.2 实时荧光定量PCR检测成熟的T1代转基因和野生型番茄果实中的LOX和HPL基因表达 | 第92-95页 |
5.2.3 C5和C6挥发性物质在转基因和野生型番茄果实中的含量 | 第95-96页 |
5.3 讨论 | 第96-99页 |
5.3.1 应用转基因技术对甜瓜基因功能的验证 | 第96-98页 |
5.3.2 甜瓜CmLOX18在香气物质合成中的作用 | 第98-99页 |
5.4 小结 | 第99-100页 |
全文总结与展望 | 第100-103页 |
参考文献 | 第103-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第114页 |