| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 大黄鱼简介 | 第11页 |
| 1.2 大黄鱼病害 | 第11-12页 |
| 1.2.1 细菌性疾病 | 第11页 |
| 1.2.2 寄生虫病 | 第11-12页 |
| 1.2.3 病毒性疾病 | 第12页 |
| 1.3 鱼类的免疫系统 | 第12-14页 |
| 1.3.1 免疫器官和组织 | 第12-13页 |
| 1.3.2 免疫细胞 | 第13页 |
| 1.3.3 体液免疫因子 | 第13-14页 |
| 1.4 凝集素概述 | 第14-17页 |
| 1.4.1 半乳糖凝集素 | 第14-15页 |
| 1.4.2 C-型凝集素 | 第15-17页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第2章 大黄鱼galectin-9（LcGal-9）的表达和功能分析 | 第18-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第18-19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验菌株和载体 | 第19页 |
| 2.1.4 引物 | 第19-20页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.6 培养基配制 | 第21页 |
| 2.1.7 常用溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-36页 |
| 2.2.1 大黄鱼健康组织取样 | 第22页 |
| 2.2.2 LPS、PolyI:C和副溶血弧菌免疫刺激和取样 | 第22页 |
| 2.2.3 刺激隐核虫免疫感染和取样 | 第22-23页 |
| 2.2.4 组织总RNA提取 | 第23页 |
| 2.2.5 cDNA第一条链的合成及检测 | 第23-24页 |
| 2.2.6 LcGal-9 cDNA序列筛选及同源序列验证 | 第24-26页 |
| 2.2.7 LcGal-9 生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.2.8 LcGal-9 实时荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第27页 |
| 2.2.9 LcGal-9 原核表达与蛋白纯化 | 第27-32页 |
| 2.2.10 Anti-r LcGal-9 多克隆抗体的制备 | 第32页 |
| 2.2.11 酶联免疫吸附实验（ELISA）测定抗血清效价 | 第32-33页 |
| 2.2.12 多克隆抗体的纯化 | 第33页 |
| 2.2.13 Western blot检测抗体特异性 | 第33-34页 |
| 2.2.14 大黄鱼正常组织总蛋白的提取 | 第34页 |
| 2.2.15 Western blot检测LcGal-9 蛋白的组织分布 | 第34页 |
| 2.2.16 rLcGal-9 红细胞凝集实验 | 第34-35页 |
| 2.2.17 rLcGal-9 糖抑制实验 | 第35页 |
| 2.2.18 rLcGal-9 细菌凝集实验 | 第35-36页 |
| 2.2.19 组织包埋和切片 | 第36页 |
| 2.2.20 免疫组化 | 第36页 |
| 2.3 结果 | 第36-53页 |
| 2.3.1 RNA提取及cDNA检测 | 第36-37页 |
| 2.3.2 LcGal-9 生物信息学分析 | 第37-42页 |
| 2.3.3 LcGal-9 mRNA组织分布及免疫刺激后表达模式的变化 | 第42-45页 |
| 2.3.4 LcGal-9 重组表达与纯化 | 第45-49页 |
| 2.3.5 Anti-r LcGal-9 多克隆抗体的制备、纯化与检测 | 第49-50页 |
| 2.3.6 Western blot检测LcGal-9 蛋白的组织分布 | 第50页 |
| 2.3.7 rLcGal-9 红细胞凝集活性 | 第50-51页 |
| 2.3.8 rLcGal-9 糖类特异性结合能力 | 第51-52页 |
| 2.3.9 rLcGal-9 细菌凝集活性 | 第52-53页 |
| 2.3.10 LcGal-9 免疫组化检测 | 第53页 |
| 2.4 讨论 | 第53-56页 |
| 第3章 大黄鱼Nattectin-like凝集素（LcNTC）的表达和功能分析 | 第56-76页 |
| 3.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第56页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第56页 |
| 3.1.3 实验菌株和载体 | 第56页 |
| 3.1.4 引物 | 第56-57页 |
| 3.1.5 仪器设备 | 第57页 |
| 3.1.6 培养基配制 | 第57页 |
| 3.1.7 常用溶液配制 | 第57页 |
| 3.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 3.2.1 大黄鱼健康组织取样 | 第57页 |
| 3.2.2 LPS、PolyI:C和副溶血弧菌免疫刺激和取样 | 第57页 |
| 3.2.3 刺激隐核虫免疫刺激和取样 | 第57-58页 |
| 3.2.4 组织总RNA提取 | 第58页 |
| 3.2.5 cDNA第一条链的合成及检测 | 第58页 |
| 3.2.6 LcNTC cDNA序列筛选及同源序列验证 | 第58页 |
| 3.2.7 LcNTC生物信息学分析 | 第58页 |
| 3.2.8 LcNTC实时荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第58页 |
| 3.2.9 LcNTC原核表达及蛋白纯化 | 第58-59页 |
| 3.2.10 rLcNTC红细胞凝集实验 | 第59页 |
| 3.2.11 rLcNTC糖抑制实验 | 第59页 |
| 3.2.12 rLcNTC细菌凝集实验 | 第59页 |
| 3.3 结果 | 第59-73页 |
| 3.3.1 RNA提取及cDNA检测 | 第59-60页 |
| 3.3.2 LcNTC生物信息学分析 | 第60-64页 |
| 3.3.3 LcNTC的组织分布及免疫刺激后表达模式的变化 | 第64-67页 |
| 3.3.4 LcNTC重组蛋白表达、纯化和脱盐 | 第67-70页 |
| 3.3.5 rLcNTC红细胞凝集活性 | 第70-71页 |
| 3.3.6 rLcNTC糖类特异性结合能力 | 第71-72页 |
| 3.3.7 rLcNTC细菌凝集活性 | 第72-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-76页 |
| 第4章 结论、创新点与展望 | 第76-78页 |
| 4.1 研究结论 | 第76页 |
| 4.2 创新点 | 第76-77页 |
| 4.3 研究展望 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 在学期间科研成果情况 | 第87页 |
