摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-17页 |
1.1 缺硒对心肌损伤的研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 缺硒对心肌形态学及生化指标的影响 | 第11-12页 |
1.1.2 缺硒性心肌凋亡的研究进展 | 第12-13页 |
1.2 Mir-30b的概述 | 第13-15页 |
1.2.1 MicroRNA生物合成 | 第13-14页 |
1.2.2 MicroRNA作用机制 | 第14页 |
1.2.3 Mir-30b的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 Oxidation Resistance 1(Oxr1)的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 主要仪器与试剂 | 第17-18页 |
2.1.1 主要仪器 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.2 试验方法 | 第18-28页 |
2.2.1 试验动物分组与采样 | 第18页 |
2.2.2 鸡心肌组织超微结构的观察 | 第18-19页 |
2.2.3 qPCR法对缺硒鸡心肌中mir-30b表达的检测 | 第19-22页 |
2.2.4 缺硒鸡心肌中Caspase-3、Bcl-2、Bax和Oxr1 mRNA水平的检测 | 第22-23页 |
2.2.5 鸡心肌组织中氧化损伤指标检测 | 第23页 |
2.2.6 鸡心肌细胞的原代培养 | 第23页 |
2.2.7 Mir-30b敲低和过表达体外培养鸡心肌细胞模型的建立 | 第23-24页 |
2.2.8 生物信息学方法预测mir-30b的靶基因 | 第24-25页 |
2.2.9 插入Oxr13’UTR的pMIR-REPORT-Oxr1重组质粒的构建 | 第25-27页 |
2.2.10 突变型Oxr13’UTR的pMIR-REPORT-Oxr1重组质粒的构建 | 第27页 |
2.2.11 荧光素酶报告基因检测试验 | 第27页 |
2.2.12 MiR-30b对体外培养鸡心肌细胞ROS水平和凋亡影响的检测 | 第27-28页 |
2.3 试验数据的统计与分析 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-41页 |
3.1 鸡心肌组织超微结构观察结果 | 第29页 |
3.2 缺硒对肉鸡心肌mir-30b和Oxr1表达影响的检测结果 | 第29-30页 |
3.3 缺硒对心肌组织中Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达影响的检测结果 | 第30-31页 |
3.4 缺硒心肌组织中氧化应激指标的检测结果 | 第31-33页 |
3.4.1 缺硒心肌组织中GPx、CAT、GSH和SOD活性的检测结果 | 第31-32页 |
3.4.2 心肌组织中H2O2、·OH含量的检测结果 | 第32-33页 |
3.4.3 心肌组织中iNOS活性、NO含量的检测结果 | 第33页 |
3.4.4 心肌组织中MDA含量的检测结果 | 第33页 |
3.5 体外心肌细胞mir-30b的mimic和inhibitor模型的建立 | 第33-34页 |
3.6 Mir-30b靶基因Oxr1的验证结果 | 第34-36页 |
3.6.1 Mir-30b靶基因的预测结果 | 第34-35页 |
3.6.2 荧光素酶报告基因验证靶基因的检测结果 | 第35-36页 |
3.7 敲低和过表达mir-30b后靶基因Oxr1mRNA表达的检测结果 | 第36页 |
3.8 敲低和过表达mir-30b心肌细胞中ROS水平的检测结果 | 第36-37页 |
3.9 Mir-30b对体外培养鸡心肌细胞Caspase-3、Bax、Bcl-2 的mRNA表达影响的检测结果 | 第37-38页 |
3.10 心肌细胞凋亡水平的检测结果 | 第38-41页 |
4 讨论 | 第41-45页 |
4.1 缺硒对心肌mir-30b表达影响 | 第41-42页 |
4.2 Mir-30b靶基因的预测与验证 | 第42页 |
4.3 Mir-30b对缺硒鸡心肌氧化应激的影响 | 第42-43页 |
4.4 Mir-30b对缺硒鸡心肌凋亡的影响 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |