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Mir-30b抑制Oxr1在鸡缺硒性心肌细胞凋亡中作用机制的研究

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第11-17页
    1.1 缺硒对心肌损伤的研究进展第11-13页
        1.1.1 缺硒对心肌形态学及生化指标的影响第11-12页
        1.1.2 缺硒性心肌凋亡的研究进展第12-13页
    1.2 Mir-30b的概述第13-15页
        1.2.1 MicroRNA生物合成第13-14页
        1.2.2 MicroRNA作用机制第14页
        1.2.3 Mir-30b的研究进展第14-15页
    1.3 Oxidation Resistance 1(Oxr1)的研究进展第15-16页
    1.4 本研究的目的与意义第16-17页
2 材料与方法第17-29页
    2.1 主要仪器与试剂第17-18页
        2.1.1 主要仪器第17页
        2.1.2 主要试剂第17-18页
    2.2 试验方法第18-28页
        2.2.1 试验动物分组与采样第18页
        2.2.2 鸡心肌组织超微结构的观察第18-19页
        2.2.3 qPCR法对缺硒鸡心肌中mir-30b表达的检测第19-22页
        2.2.4 缺硒鸡心肌中Caspase-3、Bcl-2、Bax和Oxr1 mRNA水平的检测第22-23页
        2.2.5 鸡心肌组织中氧化损伤指标检测第23页
        2.2.6 鸡心肌细胞的原代培养第23页
        2.2.7 Mir-30b敲低和过表达体外培养鸡心肌细胞模型的建立第23-24页
        2.2.8 生物信息学方法预测mir-30b的靶基因第24-25页
        2.2.9 插入Oxr13’UTR的pMIR-REPORT-Oxr1重组质粒的构建第25-27页
        2.2.10 突变型Oxr13’UTR的pMIR-REPORT-Oxr1重组质粒的构建第27页
        2.2.11 荧光素酶报告基因检测试验第27页
        2.2.12 MiR-30b对体外培养鸡心肌细胞ROS水平和凋亡影响的检测第27-28页
    2.3 试验数据的统计与分析第28-29页
3 结果第29-41页
    3.1 鸡心肌组织超微结构观察结果第29页
    3.2 缺硒对肉鸡心肌mir-30b和Oxr1表达影响的检测结果第29-30页
    3.3 缺硒对心肌组织中Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达影响的检测结果第30-31页
    3.4 缺硒心肌组织中氧化应激指标的检测结果第31-33页
        3.4.1 缺硒心肌组织中GPx、CAT、GSH和SOD活性的检测结果第31-32页
        3.4.2 心肌组织中H2O2、·OH含量的检测结果第32-33页
        3.4.3 心肌组织中iNOS活性、NO含量的检测结果第33页
        3.4.4 心肌组织中MDA含量的检测结果第33页
    3.5 体外心肌细胞mir-30b的mimic和inhibitor模型的建立第33-34页
    3.6 Mir-30b靶基因Oxr1的验证结果第34-36页
        3.6.1 Mir-30b靶基因的预测结果第34-35页
        3.6.2 荧光素酶报告基因验证靶基因的检测结果第35-36页
    3.7 敲低和过表达mir-30b后靶基因Oxr1mRNA表达的检测结果第36页
    3.8 敲低和过表达mir-30b心肌细胞中ROS水平的检测结果第36-37页
    3.9 Mir-30b对体外培养鸡心肌细胞Caspase-3、Bax、Bcl-2 的mRNA表达影响的检测结果第37-38页
    3.10 心肌细胞凋亡水平的检测结果第38-41页
4 讨论第41-45页
    4.1 缺硒对心肌mir-30b表达影响第41-42页
    4.2 Mir-30b靶基因的预测与验证第42页
    4.3 Mir-30b对缺硒鸡心肌氧化应激的影响第42-43页
    4.4 Mir-30b对缺硒鸡心肌凋亡的影响第43-45页
5 结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-55页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第55页

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