| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 符号说明 | 第14-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-23页 |
| 1 透明质酸的结构与生物活性 | 第17页 |
| 2 HA的制备和应用以及HA衍生物的研究进展 | 第17-18页 |
| 3 HA合酶的研究进展 | 第18-19页 |
| 4 糖核苷酸在糖链合成中的应用 | 第19-20页 |
| 5 化学酶法合成寡糖的研究进展 | 第20-21页 |
| 6 一锅多酶法合成HA寡糖以及其TFA修饰的HA衍生物的意义 | 第21页 |
| 7 本课题研究的内容及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 重组pmHAS的表达纯化及活性验证 | 第23-43页 |
| 1 实验材料 | 第23-26页 |
| 1.1 试剂 | 第23-24页 |
| 1.2 仪器 | 第24页 |
| 1.3 溶液 | 第24-26页 |
| 2 重组蛋白pmHAS的表达纯化 | 第26-33页 |
| 2.1 重组表达载体pET28a-pmHAS的构建 | 第26-29页 |
| 2.1.1 获取双酶切质粒pET28a | 第26-28页 |
| 2.1.2 获取双酶切的pmHAS基因 | 第28页 |
| 2.1.3 重组质粒pET28a-pmHAS的构建 | 第28-29页 |
| 2.2 重组蛋白pmHAS的表达纯化 | 第29-30页 |
| 2.3 SDS-PAGE电泳分析检测重组蛋白pmHAS | 第30-31页 |
| 2.4 实验结果 | 第31-33页 |
| 3 重组蛋白pmHAS的活性验证 | 第33-41页 |
| 3.1 重组蛋白pmHAS活性验证底物的制备 | 第33-36页 |
| 3.2 验证重组蛋白pmHAS活性 | 第36-37页 |
| 3.3 实验结果 | 第37-41页 |
| 3.3.1 重组蛋白pmHAS活性验证底物制备的结果 | 第37-40页 |
| 3.3.2 pmHAS活性验证结果 | 第40-41页 |
| 4 本章小结 | 第41-43页 |
| 第三章 重组蛋白pmHAS的底物适应性研究 | 第43-62页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| 1.1 试剂 | 第43页 |
| 1.2 仪器 | 第43页 |
| 1.3 溶液 | 第43-44页 |
| 2 pmHAS底物的化学酶法合成 | 第44-53页 |
| 2.1 化学酶法合成HS寡糖 | 第44-46页 |
| 2.2 化学酶法合成CS寡糖 | 第46-48页 |
| 2.3 化学酶法合成UDP-GlcNTFA | 第48-49页 |
| 2.4 化学酶法合成pmHAS底物的结果 | 第49-53页 |
| 2.4.1 HS寡糖酶法合成结果 | 第49-51页 |
| 2.4.2 化学酶法合成CS寡糖结果 | 第51-52页 |
| 2.4.3 化学酶法合成UDP-GlcNTFA的结果 | 第52-53页 |
| 3 重组蛋白pmHAS底物适应性的研究 | 第53-61页 |
| 3.1 验证pmHAS的底物适应性 | 第53-55页 |
| 3.2 重组蛋白pmHAS底物适应性研究结果 | 第55-61页 |
| 4 本章小结 | 第61-62页 |
| 第四章 一锅多酶法合成HA寡糖及TFA修饰的HA衍生物 | 第62-73页 |
| 1 实验材料 | 第62-63页 |
| 1.1 试剂 | 第62页 |
| 1.2 仪器 | 第62页 |
| 1.3 溶液 | 第62-63页 |
| 2 实验步骤 | 第63-66页 |
| 2.1 UDP-GlcUA酶法合成 | 第63-65页 |
| 2.1.1 重组表达载体pET28a-AtGlcAK的构建 | 第63页 |
| 2.1.2 重组蛋白AtGlcAK与USP的表达纯化 | 第63-64页 |
| 2.1.3 酶法合成UDP-GlcUA过程 | 第64-65页 |
| 2.2 pmHAS酶学性质的研究方法 | 第65页 |
| 2.3 一锅多酶法合成HA寡糖及TFA修饰的HA衍生物 | 第65-66页 |
| 3 实验结果 | 第66-71页 |
| 3.1 酶法合成UDP-GlcUA结果 | 第66-68页 |
| 3.2 pmHAS酶学性质的研究结果 | 第68-69页 |
| 3.3 一锅多酶法合成HA寡糖及TFA修饰的HA衍生物的结果 | 第69-71页 |
| 4 本章小结 | 第71-73页 |
| 总结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第80-81页 |
| 附文 | 第81-88页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |
