摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-23页 |
1 肝损伤的研究进展 | 第12-18页 |
1.1 人类的肝损伤研究进展 | 第12-13页 |
1.2 各种动物的肝损伤研究进展 | 第13-14页 |
1.3 肝脏损伤相关机制的研究进展 | 第14-18页 |
2 鸭病毒性肝炎 | 第18-22页 |
2.1 病原 | 第18-19页 |
2.2 病理变化 | 第19-20页 |
2.3 肝损伤机制研究 | 第20-22页 |
3 研究目的、意义 | 第22-23页 |
材料和方法 | 第23-35页 |
1 材料 | 第23-26页 |
1.1 试验动物 | 第23页 |
1.2 供试毒株 | 第23页 |
1.3 试验主要仪器及试剂 | 第23-25页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
2 试验方法 | 第26-34页 |
2.1 雏鸭原代肝细胞的分离和培养 | 第26-28页 |
2.2 DHAV-1 郑株的增殖以及细胞半数感染量(TCID50)测定 | 第28页 |
2.3 DHAV-1 致原代鸭肝细胞的病变观察 | 第28页 |
2.4 油红O染色 | 第28-29页 |
2.5 试验动物的饲养和处理 | 第29页 |
2.6 DHAV-1 郑株鸭胚半数致死量(ELD50)测定 | 第29页 |
2.7 石蜡、冰冻切片的制作和HE染色 | 第29页 |
2.8 免疫组织化学染色 | 第29页 |
2.9 细胞培养液及血清生化指标的测定 | 第29-30页 |
2.10 细胞与组织总RNA的提取 | 第30页 |
2.11 细胞与组织总RNA的反转录 | 第30-31页 |
2.12 QPCR测定原代肝细胞与鸭肝脏组织中病毒含量 | 第31-33页 |
2.13 QPCR检测脂代谢相关酶的表达变化 | 第33页 |
2.14 QPCR检测雏鸭肝组织中NF-κB、MMP-9、PECAM-1、Notch1、Notch2、Jagged1基因mRNA的表达水平 | 第33-34页 |
2.15 免疫印迹试验(Western blot) | 第34页 |
3 数据统计与处理 | 第34-35页 |
结果与分析 | 第35-51页 |
1 原代肝细胞试验结果 | 第35-40页 |
1.1 雏鸭原代肝细胞的培养与鉴定结果 | 第35-36页 |
1.2 DHAV-1 郑株细胞半数感染量(TCID50)的测定结果 | 第36页 |
1.3 雏鸭原代肝细胞的病理变化 | 第36-38页 |
1.4 QPCR检测细胞中的病毒含量 | 第38页 |
1.5 DHAV-1 感染肝细胞后肝损伤相关酶的动态变化 | 第38-39页 |
1.6 原代肝细胞中的脂代谢酶的含量变化 | 第39-40页 |
1.7 FFA含量检测结果 | 第40页 |
2 动物试验结果 | 第40-51页 |
2.1 DHAV-1 郑株鸭胚半数致死量(ELD50)测定结果 | 第40-41页 |
2.2 雏鸭接种DHAV-1 后的病变 | 第41-43页 |
2.3 QPCR检测雏鸭肝组织中病毒含量 | 第43-44页 |
2.4 DHAV-1 感染雏鸭后血浆内肝损伤相关酶的动态变化 | 第44页 |
2.5 QPCR检测雏鸭肝组织中脂代谢酶相关基因的含量 | 第44-45页 |
2.6 肝脏冰冻切片油红O染色结果 | 第45-47页 |
2.7 QPCR检测雏鸭肝组织中MMP-9、NF-κB、PECAM-1、Jagged1、Notch1、Notch2基因mRNA的表达水平 | 第47-51页 |
讨论 | 第51-58页 |
1 原代肝细胞的形态特点及DHAV-1 致细胞病变特点 | 第51-52页 |
2 DHAV-1 感染雏鸭肝脏内病理学变化(组织、血清水平酶的变化) | 第52页 |
3 DHAV-1 感染后脂代谢相关酶与肝损伤的关系 | 第52-54页 |
3.1 雏鸭原代肝细胞感染DHAV-1 后脂代谢酶的变化 | 第52-54页 |
3.2 雏鸭感染DHAV-1 后肝脏中脂代谢酶的变化 | 第54页 |
4 雏鸭感染DHAV-1 后肝出血机制分析 | 第54-56页 |
5 雏鸭感染DHAV-1 后肝胆管增生机制分析 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-72页 |
致谢 | 第72页 |