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雏鸭原代肝细胞培养及DHAV-1致肝细胞损伤的研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词表第11-12页
文献综述第12-23页
    1 肝损伤的研究进展第12-18页
        1.1 人类的肝损伤研究进展第12-13页
        1.2 各种动物的肝损伤研究进展第13-14页
        1.3 肝脏损伤相关机制的研究进展第14-18页
    2 鸭病毒性肝炎第18-22页
        2.1 病原第18-19页
        2.2 病理变化第19-20页
        2.3 肝损伤机制研究第20-22页
    3 研究目的、意义第22-23页
材料和方法第23-35页
    1 材料第23-26页
        1.1 试验动物第23页
        1.2 供试毒株第23页
        1.3 试验主要仪器及试剂第23-25页
        1.4 主要试剂的配制第25-26页
    2 试验方法第26-34页
        2.1 雏鸭原代肝细胞的分离和培养第26-28页
        2.2 DHAV-1 郑株的增殖以及细胞半数感染量(TCID50)测定第28页
        2.3 DHAV-1 致原代鸭肝细胞的病变观察第28页
        2.4 油红O染色第28-29页
        2.5 试验动物的饲养和处理第29页
        2.6 DHAV-1 郑株鸭胚半数致死量(ELD50)测定第29页
        2.7 石蜡、冰冻切片的制作和HE染色第29页
        2.8 免疫组织化学染色第29页
        2.9 细胞培养液及血清生化指标的测定第29-30页
        2.10 细胞与组织总RNA的提取第30页
        2.11 细胞与组织总RNA的反转录第30-31页
        2.12 QPCR测定原代肝细胞与鸭肝脏组织中病毒含量第31-33页
        2.13 QPCR检测脂代谢相关酶的表达变化第33页
        2.14 QPCR检测雏鸭肝组织中NF-κB、MMP-9、PECAM-1、Notch1、Notch2、Jagged1基因mRNA的表达水平第33-34页
        2.15 免疫印迹试验(Western blot)第34页
    3 数据统计与处理第34-35页
结果与分析第35-51页
    1 原代肝细胞试验结果第35-40页
        1.1 雏鸭原代肝细胞的培养与鉴定结果第35-36页
        1.2 DHAV-1 郑株细胞半数感染量(TCID50)的测定结果第36页
        1.3 雏鸭原代肝细胞的病理变化第36-38页
        1.4 QPCR检测细胞中的病毒含量第38页
        1.5 DHAV-1 感染肝细胞后肝损伤相关酶的动态变化第38-39页
        1.6 原代肝细胞中的脂代谢酶的含量变化第39-40页
        1.7 FFA含量检测结果第40页
    2 动物试验结果第40-51页
        2.1 DHAV-1 郑株鸭胚半数致死量(ELD50)测定结果第40-41页
        2.2 雏鸭接种DHAV-1 后的病变第41-43页
        2.3 QPCR检测雏鸭肝组织中病毒含量第43-44页
        2.4 DHAV-1 感染雏鸭后血浆内肝损伤相关酶的动态变化第44页
        2.5 QPCR检测雏鸭肝组织中脂代谢酶相关基因的含量第44-45页
        2.6 肝脏冰冻切片油红O染色结果第45-47页
        2.7 QPCR检测雏鸭肝组织中MMP-9、NF-κB、PECAM-1、Jagged1、Notch1、Notch2基因mRNA的表达水平第47-51页
讨论第51-58页
    1 原代肝细胞的形态特点及DHAV-1 致细胞病变特点第51-52页
    2 DHAV-1 感染雏鸭肝脏内病理学变化(组织、血清水平酶的变化)第52页
    3 DHAV-1 感染后脂代谢相关酶与肝损伤的关系第52-54页
        3.1 雏鸭原代肝细胞感染DHAV-1 后脂代谢酶的变化第52-54页
        3.2 雏鸭感染DHAV-1 后肝脏中脂代谢酶的变化第54页
    4 雏鸭感染DHAV-1 后肝出血机制分析第54-56页
    5 雏鸭感染DHAV-1 后肝胆管增生机制分析第56-58页
结论第58-59页
参考文献第59-72页
致谢第72页

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