摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-16页 |
1.1 镉对鱼体毒理效应 | 第9-11页 |
1.1.1 对鱼体抗氧化系统的影响 | 第9-10页 |
1.1.2 对鱼体组织显微结构的影响 | 第10-11页 |
1.1.3 诱导鱼体组织细胞凋亡 | 第11页 |
1.2 细胞凋亡分子机制研究概况 | 第11-14页 |
1.2.1 caspase家族研究进展 | 第12-13页 |
1.2.2 BCL-2 家族研究进展 | 第13-14页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第14-16页 |
第二章 草鱼Caspase9基因克隆、原核表达及镉胁迫下表达 | 第16-37页 |
2.1 引言 | 第16页 |
2.2 实验材料与方法 | 第16-24页 |
2.2.1 研究材料 | 第16-17页 |
2.2.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.2.3 主要仪器与设备 | 第18页 |
2.2.4 总RNA提取 | 第18-19页 |
2.2.5 草鱼Caspase9基因cDNA全长序列的获得 | 第19-21页 |
2.2.6 序列分析级系统进化树的构建 | 第21页 |
2.2.7 镉胁迫下Caspase9基因在草鱼肝胰腺表达变化 | 第21-22页 |
2.2.8 草鱼Caspase9基因原核表达、蛋白纯化 | 第22-24页 |
2.3 实验结果 | 第24-35页 |
2.3.1 草鱼Caspase9基因cDNA序列及其推导氨基酸序列特征 | 第24-26页 |
2.3.2 草鱼Caspase9氨基酸序列同源性分析 | 第26-30页 |
2.3.3 草鱼Caspase9系统进化关系分析 | 第30-31页 |
2.3.4 镉胁迫下Caspase9基因在草鱼肝胰腺中表达 | 第31-32页 |
2.3.5 草鱼Caspase9在大肠杆菌中原核表达纯化及质谱鉴定 | 第32-35页 |
2.4 讨论 | 第35-37页 |
第三章 草鱼BCL-2 基因克隆、原核表达及在镉胁迫下表达 | 第37-49页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验材料与方法 | 第37-39页 |
3.2.1 研究材料 | 第37页 |
3.2.2 总RNA的提取 | 第37页 |
3.2.3 草鱼BCL-2 基因cDNA序列全长的获得 | 第37-38页 |
3.2.4 序列分析及系统进化树的构建 | 第38页 |
3.2.5 镉胁迫下BCL-2 基因在草鱼肝胰腺表达变化 | 第38-39页 |
3.2.6 草鱼BCL-2 基因原核表达、蛋白纯化 | 第39页 |
3.3 实验结果 | 第39-47页 |
3.3.1 草鱼基因BCL-2 cDNA序列及其推导氨基酸序列特征 | 第39-40页 |
3.3.2 草鱼BCL-2 氨基酸序列同源性分析 | 第40-42页 |
3.3.3 草鱼BCL-2 系统进化关系分析 | 第42-43页 |
3.3.4 镉胁迫下BCL-2 基因在草鱼肝胰腺中表达 | 第43-44页 |
3.3.5 草鱼BCL-2 基因在大肠杆菌中的表达纯化及质谱鉴定 | 第44-47页 |
3.4 讨论 | 第47-49页 |
第四章 镉胁迫对草鱼肝抗氧化酶系统与显微结构的影响 | 第49-55页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 实验材料与方法 | 第49-51页 |
4.2.1 实验材料 | 第49页 |
4.2.2 主要实验试剂 | 第49-50页 |
4.2.3 镉染毒 | 第50页 |
4.2.4 蛋白浓度和酶活测定 | 第50页 |
4.2.5 肝组织常规石蜡切片制作 | 第50-51页 |
4.2.6 数据处理 | 第51页 |
4.3 实验结果 | 第51-53页 |
4.3.1 镉胁迫对草鱼肝显微结构影响 | 第51-52页 |
4.3.2 镉胁迫对草鱼抗氧化酶及脂质过氧化影响 | 第52-53页 |
4.4 讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
研究生期间已发表的论文 | 第64页 |