| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 研究背景 | 第12-13页 |
| 1.2 研究现状 | 第13-17页 |
| 1.2.1 哺乳动物C型凝集素在病毒感染中的作用 | 第13-14页 |
| 1.2.2 无脊椎动物C型凝集素在病毒感染中的作用 | 第14-15页 |
| 1.2.3 昆虫相关免疫蛋白的研究 | 第15-17页 |
| 1.3 免疫共沉淀联合质谱技术的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的意义与创新之处 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 昆虫 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株与病毒 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 常用试剂的配置 | 第21-23页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.2.2 Ha-lectin1重组质粒提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第25页 |
| 2.2.4 回收PCR产物 | 第25页 |
| 2.2.5 合成dsRNA | 第25-26页 |
| 2.2.6 dsRNA处理棉铃虫 | 第26-27页 |
| 2.2.7 棉铃虫血细胞RNA提取 | 第27页 |
| 2.2.8 SMART cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.9 Ha-Lectin基因扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.10 定量检测RNAi后Ha-Lectin的表达 | 第29页 |
| 2.2.11 HaNPV重组质粒提取 | 第29-30页 |
| 2.2.12 HaNPV绝对定量标准曲线的建立 | 第30页 |
| 2.2.13 血清中病毒分解检测 | 第30页 |
| 2.2.14 病毒对血细胞的吸附检测 | 第30-31页 |
| 2.2.15 病毒对脂肪体的吸附检测 | 第31页 |
| 2.2.16 病毒在血细胞和脂肪体内增殖检测 | 第31页 |
| 2.2.17 HaNPV重组蛋白包涵体复性 | 第31-32页 |
| 2.2.18 HaNPV重组蛋白纯化 | 第32页 |
| 2.2.19 HaNPV多克隆抗体的制备 | 第32-33页 |
| 2.2.20 血淋巴蛋白免疫共沉淀 | 第33页 |
| 2.2.21 Western-blotting | 第33-34页 |
| 2.2.22 质谱分析 | 第34-35页 |
| 2.2.23 血细胞膜蛋白提取 | 第35页 |
| 2.2.24 免疫共沉淀联合质谱 | 第35-36页 |
| 3 实验结果与分析 | 第36-52页 |
| 3.1 Ha-Lectin干扰结果分析 | 第36-39页 |
| 3.1.1 Ha-Lectin重组质粒提取检测 | 第36页 |
| 3.1.2 PCR引物扩增 | 第36-37页 |
| 3.1.3 PCR回收产物检测 | 第37页 |
| 3.1.4 合成的dsRNA检测 | 第37页 |
| 3.1.5 dsRNA处理后棉铃虫血细胞RNA的提取检测 | 第37-38页 |
| 3.1.6 Ha-Lectin扩增结果 | 第38页 |
| 3.1.7 Ha-Lectin沉默效果检测 | 第38-39页 |
| 3.2 HaNPV绝对定量标准曲线的建立 | 第39-40页 |
| 3.2.1 HaNPV重组质粒的提取及检测 | 第39页 |
| 3.2.2 建立HaNPV绝对定量标准曲线 | 第39-40页 |
| 3.3 Ha-Lectin在HaNPV感染过程中的作用研究 | 第40-43页 |
| 3.3.1 血清中Ha-Lectin对病毒的分解作用检测 | 第40-41页 |
| 3.3.2 Ha-Lectin对病毒与血细胞的吸附影响检测 | 第41-42页 |
| 3.3.3 Ha-Lectin对病毒与脂肪体细胞的吸附影响检测 | 第42-43页 |
| 3.3.4 Ha-Lectin对病毒在血细胞和脂肪体细胞内的增殖影响检测 | 第43页 |
| 3.4 免疫共沉淀联合质谱筛选与Ha-Lectin和NPV复合体互作蛋白 | 第43-52页 |
| 3.4.1 HaNPV重组蛋白纯化检测 | 第43-44页 |
| 3.4.2 血淋巴免疫共沉淀结果 | 第44页 |
| 3.4.3 Western-blotting检测HaNPV蛋白 | 第44-45页 |
| 3.4.4 质谱结果 | 第45-48页 |
| 3.4.5 膜蛋白免疫共沉淀结果 | 第48页 |
| 3.4.6 膜蛋白质谱结果 | 第48-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| 4.1 Ha-Lectin对HaNPV的作用 | 第52-53页 |
| 4.2 Ha-Lectin和HaNPV复合体互作蛋白分析 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第66-67页 |
