| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第7-17页 |
| 1.1 神经干细胞的研究 | 第7-9页 |
| 1.1.1 神经干细胞研究 | 第7页 |
| 1.1.2 神经干细胞相关疾病研究 | 第7-9页 |
| 1.2 LNCRNA的研究 | 第9-12页 |
| 1.2.1 lncRNA概述 | 第9-10页 |
| 1.2.2 神经系统lncRNA的研究 | 第10-11页 |
| 1.2.3 LncRNA相关疾病 | 第11-12页 |
| 1.3 高通量测序与转录组 | 第12-15页 |
| 1.3.1 高通量测序技术 | 第12-13页 |
| 1.3.2 转录组分析 | 第13-15页 |
| 1.4 本论文的研究意义 | 第15-17页 |
| 第2章 实验材料 | 第17-20页 |
| 2.1 实验设备和试剂耗材 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验主要设备及器材 | 第17-18页 |
| 2.1.2 试剂耗材 | 第18页 |
| 2.2 抗体信息 | 第18-19页 |
| 2.3 引物信息 | 第19页 |
| 2.4 细胞来源 | 第19页 |
| 2.5 病毒 | 第19-20页 |
| 第3章 实验方法 | 第20-33页 |
| 3.1 LNC400和ANP32A序列获取及引物设计 | 第20-21页 |
| 3.2 NPC复苏 | 第21页 |
| 3.3 NPC传代 | 第21-22页 |
| 3.4 NPC冻存 | 第22页 |
| 3.5 293T细胞复苏 | 第22-23页 |
| 3.6 293T细胞传代 | 第23页 |
| 3.7 免疫荧光染色 | 第23-24页 |
| 3.8 细胞预感染实验 | 第24页 |
| 3.9 细胞感染实验 | 第24页 |
| 3.10 组织和细胞总RNA提取 | 第24-25页 |
| 3.11 去基因组DNA | 第25-26页 |
| 3.12 逆转录 | 第26-27页 |
| 3.13 PCR验证及测序 | 第27-28页 |
| 3.14 RNA逆转录成cDNA | 第28页 |
| 3.15 Q-PCR实时定量PCR | 第28-29页 |
| 3.16 WESTERN BLOT | 第29-33页 |
| 3.16.1 蛋白质的裂解 | 第29-30页 |
| 3.16.2 BCA蛋白定量 | 第30页 |
| 3.16.3 Western Blot | 第30-33页 |
| 第4章 结果与分析 | 第33-56页 |
| 4.1 引物有效性验证及产物测序分析 | 第33-37页 |
| 4.1.1 验证引物的有效性 | 第33-34页 |
| 4.1.2 PCR产物测序分析 | 第34-35页 |
| 4.1.3 Lnc400序列保守性 | 第35-37页 |
| 4.2 NPC的培养和鉴定 | 第37页 |
| 4.3 病毒感染NPC | 第37-41页 |
| 4.3.1 病毒预感染确定NPC感染条件 | 第37-39页 |
| 4.3.2 在NPC中敲低和过表达lnc400 | 第39-40页 |
| 4.3.3 Q-PCR检测敲低lnc400后anp32a表达量变化 | 第40-41页 |
| 4.4 WESTERN BLOT检测ANP23A蛋白 | 第41-43页 |
| 4.4.1 蛋白标准曲线定量 | 第41-42页 |
| 4.4.2 Western Blot | 第42-43页 |
| 4.5 转录组测序分析 | 第43-56页 |
| 4.5.1 相关性分析 | 第43-45页 |
| 4.5.2 差异表达基因分析 | 第45-52页 |
| 4.5.3 信号通路分析 | 第52-56页 |
| 第5章 讨论 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
