| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-33页 |
| 1.1 根毛是快速生长的极性细胞 | 第14-16页 |
| 1.1.1 根毛的起始过程 | 第14-15页 |
| 1.1.2 根毛的极性生长 | 第15-16页 |
| 1.2 ROP的研究现状 | 第16-23页 |
| 1.2.1 ROP的分类 | 第17-18页 |
| 1.2.2 ROP的调控机理 | 第18-21页 |
| 1.2.2.1 ROP的调控因子GEF、GAP和GDI | 第18-21页 |
| 1.2.2.2 ROP下游的效应蛋白 | 第21页 |
| 1.2.3 ROS参与根毛的极性生长 | 第21-23页 |
| 1.3 囊泡运输的功能 | 第23-28页 |
| 1.3.1 TGN/EE囊泡分选中心 | 第24-25页 |
| 1.3.2 RAB介导的囊泡运输途径 | 第25-26页 |
| 1.3.3 ARF介导的囊泡运输途径 | 第26-28页 |
| 1.4 RhoGTPases极性定位的研究进展 | 第28-29页 |
| 1.5 荧光漂白恢复技术简介 | 第29-31页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-46页 |
| 2.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第33页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第33页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第33-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-46页 |
| 2.2.1 构建转基因植物的表达载体 | 第34-40页 |
| 2.2.1.1 PCR引物设计 | 第34页 |
| 2.2.1.2 PCR反应(试剂盒法) | 第34-35页 |
| 2.2.1.3 PCR产物回收(试剂盒法) | 第35-36页 |
| 2.2.1.4 TOPO连接反应 | 第36页 |
| 2.2.1.5 大肠杆菌转化及质粒提取(试剂盒法) | 第36-39页 |
| 2.2.1.6 DNA序列测定 | 第39页 |
| 2.2.1.7 LR反应 | 第39页 |
| 2.2.1.8 质粒DNA的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化及突变体的鉴定 | 第40-42页 |
| 2.2.2.1 农杆菌转化及鉴定 | 第40页 |
| 2.2.2.2 拟南芥的栽培和转化 | 第40-41页 |
| 2.2.2.3 植物基因组DNA提取(小量法) | 第41-42页 |
| 2.2.3 突变体基因组水平及转录水平鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2.3.1 植物总RNA的提取(试剂盒法) | 第42-43页 |
| 2.2.3.2 反转录 | 第43页 |
| 2.2.4 药剂处理及荧光染料染色 | 第43-44页 |
| 2.2.4.1 FM4-64染色 | 第43页 |
| 2.2.4.2 BFA处理 | 第43-44页 |
| 2.2.4.3 Wortmannin处理 | 第44页 |
| 2.2.4.4 ROS染色及量化 | 第44页 |
| 2.2.5 激光共聚焦显微镜观察及图像处理 | 第44-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-63页 |
| 3.1 GDI1在根毛起始与生长中的作用 | 第46-49页 |
| 3.1.1 GDI1调控ROP2在根毛顶端质膜的动态定位 | 第46页 |
| 3.1.2 GDI1保证根毛维持一个极性生长点 | 第46-49页 |
| 3.2 囊泡运输对ROP2顶端定位的调控作用 | 第49-58页 |
| 3.2.1 药剂学的方法干扰囊泡运输途径 | 第49-53页 |
| 3.2.1.1 BFA处理抑制scn1-1突变体根毛的多个起始 | 第49-51页 |
| 3.2.1.2 Wortmannin阻断的液泡降解途径不影响scn1-1突变体的多个起始 | 第51-53页 |
| 3.2.2 利用遗传手段阻断相关囊泡运输途径 | 第53-58页 |
| 3.2.2.1 ARF1介导的囊泡运输与GDI1共同调控ROP2的极性定位 | 第53-55页 |
| 3.2.2.2 AP1介导的蛋白分选机制参与调控ROP2的动态定位 | 第55-56页 |
| 3.2.2.3 RabA4b调控根毛的快速生长 | 第56-57页 |
| 3.2.2.4 ARA7调控的液泡降解途径对根毛极性生长没有贡献 | 第57-58页 |
| 3.3 GDI1与囊泡运输协同调控ROP2的极性定位 | 第58-63页 |
| 3.3.1 BFA敏感的囊泡运输调控ROP2的动态定位 | 第58-61页 |
| 3.3.2 GDI1与囊泡运输协同调控ROP2的极性定位 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| (1) GDI1通过调控ROP2定位影响根毛的极性生长 | 第63页 |
| (2) 囊泡运输调控ROP2的极性定位 | 第63-64页 |
| (3) GDI1与囊泡运输协同调控ROP2的极性定位 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第80页 |
