| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1. 文献综述 | 第10-15页 |
| ·水的重要作用 | 第10页 |
| ·水分利用效率的定义和内涵 | 第10页 |
| ·植物水分利用效率的规律影响植物水分利用效率的因素 | 第10-12页 |
| ·Ci与水分利用效率的关系 | 第10页 |
| ·作物种类与水分利用效率的关系 | 第10-11页 |
| ·植物叶片生长与水分利用效率的关系 | 第11-12页 |
| ·植物根系及水分传导速率和水分利用效率的关系 | 第12页 |
| ·植物水分利用效率相关基因的研究进展 | 第12-13页 |
| ·水分利用效率基因HVA1的研究 | 第12-13页 |
| ·水分利用效率基因ERECTA的研究 | 第13页 |
| ·水分利用效率基因HARDY的研究 | 第13页 |
| ·水分利用效率基因GPA1的研究 | 第13页 |
| ·水分利用效率基因GTL1的研究 | 第13页 |
| ·研究的目的意义 | 第13-15页 |
| 2. 欧美杨NE-19 PdERECTA基因的克隆与分析 | 第15-27页 |
| ·材料与方法 | 第15-19页 |
| ·植物材料 | 第15页 |
| ·仪器和试剂 | 第15页 |
| ·培养基及抗生素 | 第15页 |
| ·欧美杨NE-19 PdERECTA基因的分离 | 第15-18页 |
| ·CTAB法提取黑杨总RNA | 第15-16页 |
| ·反转录 | 第16-17页 |
| ·PCR扩增 | 第17页 |
| ·目的片段的回收与纯化 | 第17-18页 |
| ·日的片段与pGEM-T Easy载体连接 | 第18页 |
| ·转化大肠杆菌感受态 | 第18页 |
| ·大肠杆菌阳性克隆的PCR鉴定 | 第18页 |
| ·欧美杨NE-19 PdERECTA基因的蛋白结构分析 | 第18-19页 |
| ·结果与分析 | 第19-25页 |
| ·欧美黑杨NE-19 PdERECTA基因的分离 | 第19页 |
| ·欧美杨NE-19 PdERECTA基因序列分析 | 第19-20页 |
| ·欧美杨NE-19 PdERECTA基因的蛋白结构分析 | 第20页 |
| ·进化树分析 | 第20-25页 |
| ·讨论 | 第25-27页 |
| 3. PdERECTA的表达特征及亚细胞定位分析 | 第27-36页 |
| ·材料与方法 | 第27-32页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·质粒及菌株 | 第27页 |
| ·植物材料处理 | 第27页 |
| ·欧美杨NE-19不同组织部位PdERECTA基因的半定量分析 | 第27-28页 |
| ·欧美杨NE-19不同组织部位PdERECTA基因的实时定量分析 | 第28页 |
| ·表达载体的构建 | 第28-32页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·加入酶切位点的目的基因 | 第29-30页 |
| ·DNA的回收与纯化 | 第30页 |
| ·目的片段与pGEM-T Easy载体连接 | 第30页 |
| ·转化大肠杆菌感受态 | 第30页 |
| ·大肠杆菌阳性克隆的PCR鉴定 | 第30页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·酶切及连接体系 | 第31页 |
| ·连接产物的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·基因枪法转化洋葱表皮及亚细胞定位的观察 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·欧美杨NE-19 PdERECTA基因不同组织部位的半定量表达分析 | 第32页 |
| ·欧美杨NE-19 PdERECTA基因不同组织部位的荧光定量表达分析 | 第32-34页 |
| ·PdERECTA基因的细胞定位 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·PdERECTA基因表达特征 | 第34-35页 |
| ·PdERECTA亚细胞定位分析 | 第35-36页 |
| 4. 欧美杨NE-19 PdERECTA基因转化拟南芥及转基因拟南芥的检测 | 第36-44页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·工程菌株与质粒载体 | 第36页 |
| ·工程酶和主要实验试剂 | 第36页 |
| ·常用培养基 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·重组表达载体35S:PdERECTA:GFP的构建与鉴定 | 第37页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化与阳性克隆的鉴定 | 第37-38页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及质粒向农杆菌GV3101的转化 | 第37-38页 |
| ·农杆菌菌液PCR检测 | 第38页 |
| ·农杆菌的活化与培养 | 第38页 |
| ·欧美杨NE-19 PdERECTA基因转化拟南芥 | 第38-41页 |
| ·拟南芥的种植与管理 | 第38-39页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第39页 |
| ·转基因植株的筛选与检测 | 第39-41页 |
| ·潮霉素抗性筛选 | 第39页 |
| ·超表达PdERECTA转基因植株的分子生物学鉴定 | 第39-41页 |
| ·T1代转基因株系的DNA水平检测 | 第39-40页 |
| ·T1代转基因株系的RNA水平检测 | 第40-41页 |
| ·T3代拟南芥植株的获得 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的筛选与分子鉴定 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·酶切连接效率 | 第42页 |
| ·潮霉素的筛选浓度 | 第42-44页 |
| 5. 在er-105突变体和野生型拟南芥中超表达PdERECTA的转基因植株相关表征分析 | 第44-58页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·仪器设备 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·拟南芥根长的测定方法 | 第44页 |
| ·叶面积的测定方法 | 第44页 |
| ·转基因拟南芥株高的测定方法 | 第44页 |
| ·稳定碳同位素的测定 | 第44页 |
| ·光合作用相关参数的测定 | 第44-45页 |
| ·长期水分利用效率的测定 | 第45页 |
| ·CO_2响应曲线的测定方法 | 第45页 |
| ·Rubisco最大羧化速率及最大电子传递速率的计算方法 | 第45页 |
| ·气孔密度的测定 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-56页 |
| ·拟南芥根长的测定结果 | 第45-46页 |
| ·叶面积的测定结果 | 第46-47页 |
| ·拟南芥株高的测定 | 第47-49页 |
| ·稳定碳同位素的测定 | 第49-50页 |
| ·利用称重法测定拟南芥长期水分利用效率 | 第50-51页 |
| ·光合速率,蒸腾速率及瞬时水分利用效率的测定 | 第51-53页 |
| ·CO_2响应曲线的测定结果 | 第53-54页 |
| ·光合作用Rubisco最大羧化速率(V_(max))和电子传递最大速率(J_(max))的计算 | 第54页 |
| ·拟南芥叶片气孔密度的测定 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 6 结论与展望 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| ·展望 | 第59-60页 |
| ·创新点 | 第59页 |
| ·进一步研究的内容 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 个人简介 | 第64-65页 |
| 导师简介 | 第65-66页 |
| 获得成果目录清单 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
