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动物肠道源抗铅益生乳酸菌的分离、鉴定及其缓解铅毒性的机理研究

摘要第10-12页
英文摘要第12-14页
1 前言第15-21页
    1.1 重金属铅的概述第15页
    1.2 重金属铅的危害第15-16页
        1.2.1 对环境的影响第15页
        1.2.2 对机体的危害第15-16页
    1.3 治疗铅中毒的方法第16-17页
        1.3.1 螯合剂疗法第16页
        1.3.2 营养干预或膳食疗法第16-17页
        1.3.3 现有疗法的弊端第17页
    1.4 微生物吸附重金属的研究进展第17-18页
    1.5 乳酸菌抗重金属机制的研究进展第18-19页
        1.5.1 乳酸菌对重金属的吸附与去除第18页
        1.5.2 乳酸菌缓解机体的氧化应激第18页
        1.5.3 乳酸菌对机体肠道黏膜免疫的调节作用第18-19页
        1.5.4 乳酸菌的益生作用第19页
    1.6 研究目的和意义第19-21页
2 材料与方法第21-31页
    2.1 材料第21-23页
        2.1.1 试验试剂与菌种第21页
        2.1.2 试验动物第21页
        2.1.3 引物合成第21-22页
        2.1.4 试验仪器和设备第22-23页
    2.2 耐铅乳酸菌的分离和筛选第23页
        2.2.1 样品采集和耐铅乳酸菌的分离第23页
        2.2.2 耐铅乳酸菌的表型鉴定第23页
        2.2.3 耐铅乳酸菌的稳定性和耐受性第23页
    2.3 耐铅乳酸菌体外益生特性的测定第23-25页
        2.3.1 强酸耐受试验第23-24页
        2.3.2 耐胆盐试验第24页
        2.3.3 耐胰蛋白酶试验第24页
        2.3.4 抑菌试验第24页
        2.3.5 耐铅乳酸菌体外抗氧化试验第24-25页
    2.4 耐铅乳酸菌药敏试验第25-26页
    2.5 耐铅乳酸菌对铅的吸附试验第26页
    2.6 耐铅乳酸菌分子生物学鉴定第26页
    2.7 动物试验第26-27页
        2.7.1 小鼠醋酸铅半数致死量的确定第26-27页
        2.7.2 试验设计第27页
    2.8 样品采集第27-28页
        2.8.1 粪便样品采集第27页
        2.8.2 组织样品采集第27-28页
    2.9 样品处理第28页
        2.9.1 RNA处理第28页
        2.9.2 蛋白样品的处理第28页
    2.10 检测指标第28-30页
        2.10.1 体重变化监测第28页
        2.10.2 病理变化检测第28-29页
        2.10.3 铅含量检测第29页
        2.10.4 抗氧化指标检测第29页
        2.10.5 mRNA表达水平检测第29页
        2.10.6 P38 MAPK和NF-κB信号通路相关蛋白表达检测第29-30页
    2.11 数据分析第30-31页
3 结果第31-60页
    3.1 耐铅乳酸菌的筛选结果第31页
        3.1.1 耐铅乳酸菌的表型特征第31页
        3.1.2 耐铅乳酸菌的铅耐受性与稳定性第31页
    3.2 耐铅乳酸菌益生性质测定结果第31-33页
        3.2.1 强酸耐受性质测定结果第31页
        3.2.2 胆盐耐受性质测定结果第31页
        3.2.3 胰蛋白酶耐受性质测定结果第31-32页
        3.2.4 抑制细菌能力测定结果第32页
        3.2.5 体外抗氧化试验结果第32-33页
    3.3 耐铅乳酸菌药敏试验结果第33页
    3.4 耐性乳酸菌对铅的吸附试验结果第33页
    3.5 分离菌株的分子生物学鉴定结果第33-34页
    3.6 动物试验第34-60页
        3.6.1 铅对小鼠半数致死量的测定第34页
        3.6.2 体重的检测结果第34-35页
        3.6.3 病理学观察结果第35-39页
        3.6.4 体内残留铅含量的检测结果第39-42页
        3.6.5 各组织中抗氧化能力检测结果第42-45页
        3.6.6 mRNA表达检测结果第45-55页
        3.6.7 P38 MAPK和NF-κB信号通路相关蛋白表达检测结果第55-60页
4 讨论第60-66页
    4.1 课题设计思路第60页
    4.2 乳酸菌的益生特性第60-61页
    4.3 乳酸菌对机体的保护作用第61-65页
        4.3.1 乳酸菌缓解铅毒性导致的病理损伤第61-62页
        4.3.2 乳酸菌缓解铅毒性导致的氧化应激第62-63页
        4.3.3 乳酸菌缓解铅毒性导致的炎症反应第63页
        4.3.4 乳酸菌调节肠道粘膜屏障相关细胞因子表达第63-64页
        4.3.5 乳酸菌缓解铅毒性导致的炎症相关信号通路相关蛋白表达第64-65页
    4.4 展望第65-66页
5 结论第66-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-75页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第75页

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