摘要 | 第2-4页 |
Summary | 第4-6页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-37页 |
1.1 植物耐盐多样性 | 第14-16页 |
1.2 植物盐胁迫信号感应 | 第16-17页 |
1.3 盐生植物研究重要性 | 第17-18页 |
1.4 盐生植物多样性和进化 | 第18-21页 |
1.5 盐生植物形态、生长及渗透调节特性 | 第21-25页 |
1.5.1 解剖学、形态学特征 | 第21-23页 |
1.5.2 生长特性 | 第23-24页 |
1.5.3 盐胁迫渗透调节 | 第24-25页 |
1.6 盐生植物Na~+吸收与转运 | 第25-37页 |
1.6.1 根系Na~+吸收 | 第25-26页 |
1.6.2 木质部Na~+加载 | 第26-29页 |
1.6.3 叶肉细胞内Na~+运输 | 第29-37页 |
1.6.3.1 质膜Na~+外排 | 第30页 |
1.6.3.2 液泡Na~+区隔化 | 第30-32页 |
1.6.3.3 吞饮作用的Na+液泡区隔化 | 第32页 |
1.6.3.4 液泡中Na~+的保留 | 第32-33页 |
1.6.3.5 盐囊(盐腺)Na~+区隔化与外排 | 第33-37页 |
1.7 研究目的与技术路线 | 第37-38页 |
1.7.1 研究目的 | 第37页 |
1.7.2 技术路线 | 第37-38页 |
第二章 盐生草对盐胁迫响应的生理学分析 | 第38-53页 |
2.1 材料与方法 | 第38-42页 |
2.1.1 盐生草幼苗培养与NaCl胁迫处理 | 第38-39页 |
2.1.2 幼苗生长指标、植株不同组织含盐量测定 | 第39页 |
2.1.3 植株不同组织切片制备 | 第39-40页 |
2.1.4 植株叶片表面结构及不同组织盐分分布 | 第40-41页 |
2.1.5 盐生草叶片愈伤组织诱导及悬浮细胞系培养 | 第41页 |
2.1.6 盐分液泡区隔化分析 | 第41-42页 |
2.1.7 数据统计与分析 | 第42页 |
2.2 结果与分析 | 第42-49页 |
2.2.1 NaCl胁迫对盐生草幼苗生长的影响 | 第42页 |
2.2.2 盐胁迫下叶片中Na~+、K~+积累分析 | 第42-44页 |
2.2.3 植株组织结构分析 | 第44-46页 |
2.2.4 植株不同组织Na~+、K~+积累分析 | 第46-47页 |
2.2.5 叶片贮水组织及其细胞液泡Na~+区隔化分析 | 第47-49页 |
2.3 讨论 | 第49-52页 |
2.3.1 盐生草耐盐性强,为典型组织耐盐性盐生植物 | 第49-50页 |
2.3.2 Na~+在植株根、茎、叶片中的分布呈现器官区隔化 | 第50-51页 |
2.3.3 叶片贮水组织是其叶片盐分富集的最主要部位 | 第51-52页 |
2.4 结论 | 第52-53页 |
第三章 盐生草叶片盐胁迫响应转录组学分析 | 第53-73页 |
3.1 材料与方法 | 第54-58页 |
3.1.1 NaCl胁迫处理及采样 | 第54页 |
3.1.2 RNA提取和cDNA文库构建 | 第54页 |
3.1.3 转录组测序和de novo组装 | 第54-55页 |
3.1.4 unigene序列方向确定及编码区预测 | 第55页 |
3.1.5 unigene功能注释和表达量评估 | 第55-56页 |
3.1.6 NaCl胁迫响应差异表基因鉴定及qRT-PCR分析 | 第56页 |
3.1.7 SSR与SNP检测 | 第56-58页 |
3.2 结果分析 | 第58-68页 |
3.2.1 De novo组装和Illumina测序质量评估 | 第58-60页 |
3.2.2 unigene注释分析 | 第60-63页 |
3.2.3 盐胁迫差异表达基因(DEGs)分析 | 第63-67页 |
3.2.4 SSR和SNP的鉴定 | 第67-68页 |
3.3 讨论 | 第68-72页 |
3.3.1 转录组测序unigene序列组装及注释 | 第68-69页 |
3.3.2 盐胁迫差异表达基因分析 | 第69页 |
3.3.3 离子转运相关基因 | 第69-70页 |
3.3.4 活性氧清除相关基因 | 第70页 |
3.3.5 能量代谢和激素调控相关基因 | 第70-71页 |
3.3.6 响应胁迫相关基因 | 第71-72页 |
3.4 结论 | 第72-73页 |
第四章 盐生草叶片悬浮细胞系盐胁迫响应蛋白质组学分析 | 第73-90页 |
4.1 材料与方法 | 第74-77页 |
4.1.1 盐生草悬浮细胞系培养和NaCl胁迫处理 | 第74页 |
4.1.2 悬浮细胞活力及Na~+、K~+含量测定 | 第74页 |
4.1.3 样品蛋白提取和iTRAQ标记 | 第74-75页 |
4.1.4 肽段分类与LC-ESI-MS/MS分析 | 第75-76页 |
4.1.5 数据库搜索和蛋白质定量 | 第76-77页 |
4.2 结果与分析 | 第77-84页 |
4.2.1 NaCl胁迫处理后细胞形态结构及离子积累情况 | 第77-78页 |
4.2.2 NaCl胁迫处理下悬浮细胞蛋白质组学特征 | 第78-80页 |
4.2.3 NaCl胁迫调控的蛋白表达 | 第80-81页 |
4.2.4 NaCl胁迫下Na+转运相关蛋白表达 | 第81-84页 |
4.3 讨论 | 第84-89页 |
4.3.1 盐生草悬浮细胞Na~+积累分析 | 第84-85页 |
4.3.2 蛋白质鉴定和NaCl胁迫表达调控 | 第85页 |
4.3.3 能量和碳水化合物代谢相关蛋白 | 第85-86页 |
4.3.4 胁迫防御和信号转导相关蛋白 | 第86-87页 |
4.3.5 与其他代谢途径相关蛋白 | 第87-88页 |
4.3.6 调控盐胁迫下离子平衡相关蛋白 | 第88-89页 |
4.4 结论 | 第89-90页 |
第五章 全长转录组测序分析盐生草叶片盐胁迫响应机制 | 第90-111页 |
5.1 材料与方法 | 第91-95页 |
5.1.1 植物材料与NaCl胁迫处理 | 第91页 |
5.1.2 分离和观察叶片组织细胞原生质体 | 第91页 |
5.1.3 叶片中Na~+、K~+含量测定 | 第91页 |
5.1.4 转录组测序准备 | 第91-92页 |
5.1.5 单分子测序文库构建 | 第92页 |
5.1.6 Iso-Seq测序的生物信息分析 | 第92-93页 |
5.1.7 BGISEQ-500 RNA-seq文库构建及测序 | 第93-94页 |
5.1.8 差异表达isoform分析 | 第94-95页 |
5.1.9 差异表达isoform的qRT-PCR验证 | 第95页 |
5.2 结果与分析 | 第95-105页 |
5.2.1 盐胁迫下叶片细胞中Na~+的迅速积累 | 第95-96页 |
5.2.2 盐生草PacBio Iso-Seq分析 | 第96-98页 |
5.2.3 转录组中盐胁迫调控差异表达isoform(DEIs)分析 | 第98-100页 |
5.2.4 DEIs参与的GO生物学过程分析 | 第100-103页 |
5.2.5 核心差异表达isoform的功能注释分析 | 第103-104页 |
5.2.6 Isoform表达量验证 | 第104-105页 |
5.3 讨论 | 第105-110页 |
5.3.1 叶片中isoform的盐胁迫响应表达 | 第105-106页 |
5.3.2 盐胁迫下离子转运体表达调控 | 第106-108页 |
5.3.3 NHX和SOS1在盐胁迫下保持离子平衡中的作用 | 第108页 |
5.3.4 盐生草叶片中Na~+转运体仍需进一步研究 | 第108-110页 |
5.4 结论 | 第110-111页 |
第六章 全文结论及后续研究展望 | 第111-113页 |
参考文献 | 第113-130页 |
附录 | 第130-158页 |
致谢 | 第158-160页 |
导师简介 | 第160-161页 |
个人简介 | 第161-163页 |