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盐生草盐分区隔化耐盐机制研究

摘要第2-4页
Summary第4-6页
缩略词表第10-12页
前言第12-14页
第一章 文献综述第14-37页
    1.1 植物耐盐多样性第14-16页
    1.2 植物盐胁迫信号感应第16-17页
    1.3 盐生植物研究重要性第17-18页
    1.4 盐生植物多样性和进化第18-21页
    1.5 盐生植物形态、生长及渗透调节特性第21-25页
        1.5.1 解剖学、形态学特征第21-23页
        1.5.2 生长特性第23-24页
        1.5.3 盐胁迫渗透调节第24-25页
    1.6 盐生植物Na~+吸收与转运第25-37页
        1.6.1 根系Na~+吸收第25-26页
        1.6.2 木质部Na~+加载第26-29页
        1.6.3 叶肉细胞内Na~+运输第29-37页
            1.6.3.1 质膜Na~+外排第30页
            1.6.3.2 液泡Na~+区隔化第30-32页
            1.6.3.3 吞饮作用的Na+液泡区隔化第32页
            1.6.3.4 液泡中Na~+的保留第32-33页
            1.6.3.5 盐囊(盐腺)Na~+区隔化与外排第33-37页
1.7 研究目的与技术路线第37-38页
    1.7.1 研究目的第37页
    1.7.2 技术路线第37-38页
第二章 盐生草对盐胁迫响应的生理学分析第38-53页
    2.1 材料与方法第38-42页
        2.1.1 盐生草幼苗培养与NaCl胁迫处理第38-39页
        2.1.2 幼苗生长指标、植株不同组织含盐量测定第39页
        2.1.3 植株不同组织切片制备第39-40页
        2.1.4 植株叶片表面结构及不同组织盐分分布第40-41页
        2.1.5 盐生草叶片愈伤组织诱导及悬浮细胞系培养第41页
        2.1.6 盐分液泡区隔化分析第41-42页
        2.1.7 数据统计与分析第42页
    2.2 结果与分析第42-49页
        2.2.1 NaCl胁迫对盐生草幼苗生长的影响第42页
        2.2.2 盐胁迫下叶片中Na~+、K~+积累分析第42-44页
        2.2.3 植株组织结构分析第44-46页
        2.2.4 植株不同组织Na~+、K~+积累分析第46-47页
        2.2.5 叶片贮水组织及其细胞液泡Na~+区隔化分析第47-49页
    2.3 讨论第49-52页
        2.3.1 盐生草耐盐性强,为典型组织耐盐性盐生植物第49-50页
        2.3.2 Na~+在植株根、茎、叶片中的分布呈现器官区隔化第50-51页
        2.3.3 叶片贮水组织是其叶片盐分富集的最主要部位第51-52页
    2.4 结论第52-53页
第三章 盐生草叶片盐胁迫响应转录组学分析第53-73页
    3.1 材料与方法第54-58页
        3.1.1 NaCl胁迫处理及采样第54页
        3.1.2 RNA提取和cDNA文库构建第54页
        3.1.3 转录组测序和de novo组装第54-55页
        3.1.4 unigene序列方向确定及编码区预测第55页
        3.1.5 unigene功能注释和表达量评估第55-56页
        3.1.6 NaCl胁迫响应差异表基因鉴定及qRT-PCR分析第56页
        3.1.7 SSR与SNP检测第56-58页
    3.2 结果分析第58-68页
        3.2.1 De novo组装和Illumina测序质量评估第58-60页
        3.2.2 unigene注释分析第60-63页
        3.2.3 盐胁迫差异表达基因(DEGs)分析第63-67页
        3.2.4 SSR和SNP的鉴定第67-68页
    3.3 讨论第68-72页
        3.3.1 转录组测序unigene序列组装及注释第68-69页
        3.3.2 盐胁迫差异表达基因分析第69页
        3.3.3 离子转运相关基因第69-70页
        3.3.4 活性氧清除相关基因第70页
        3.3.5 能量代谢和激素调控相关基因第70-71页
        3.3.6 响应胁迫相关基因第71-72页
    3.4 结论第72-73页
第四章 盐生草叶片悬浮细胞系盐胁迫响应蛋白质组学分析第73-90页
    4.1 材料与方法第74-77页
        4.1.1 盐生草悬浮细胞系培养和NaCl胁迫处理第74页
        4.1.2 悬浮细胞活力及Na~+、K~+含量测定第74页
        4.1.3 样品蛋白提取和iTRAQ标记第74-75页
        4.1.4 肽段分类与LC-ESI-MS/MS分析第75-76页
        4.1.5 数据库搜索和蛋白质定量第76-77页
    4.2 结果与分析第77-84页
        4.2.1 NaCl胁迫处理后细胞形态结构及离子积累情况第77-78页
        4.2.2 NaCl胁迫处理下悬浮细胞蛋白质组学特征第78-80页
        4.2.3 NaCl胁迫调控的蛋白表达第80-81页
        4.2.4 NaCl胁迫下Na+转运相关蛋白表达第81-84页
    4.3 讨论第84-89页
        4.3.1 盐生草悬浮细胞Na~+积累分析第84-85页
        4.3.2 蛋白质鉴定和NaCl胁迫表达调控第85页
        4.3.3 能量和碳水化合物代谢相关蛋白第85-86页
        4.3.4 胁迫防御和信号转导相关蛋白第86-87页
        4.3.5 与其他代谢途径相关蛋白第87-88页
        4.3.6 调控盐胁迫下离子平衡相关蛋白第88-89页
    4.4 结论第89-90页
第五章 全长转录组测序分析盐生草叶片盐胁迫响应机制第90-111页
    5.1 材料与方法第91-95页
        5.1.1 植物材料与NaCl胁迫处理第91页
        5.1.2 分离和观察叶片组织细胞原生质体第91页
        5.1.3 叶片中Na~+、K~+含量测定第91页
        5.1.4 转录组测序准备第91-92页
        5.1.5 单分子测序文库构建第92页
        5.1.6 Iso-Seq测序的生物信息分析第92-93页
        5.1.7 BGISEQ-500 RNA-seq文库构建及测序第93-94页
        5.1.8 差异表达isoform分析第94-95页
        5.1.9 差异表达isoform的qRT-PCR验证第95页
    5.2 结果与分析第95-105页
        5.2.1 盐胁迫下叶片细胞中Na~+的迅速积累第95-96页
        5.2.2 盐生草PacBio Iso-Seq分析第96-98页
        5.2.3 转录组中盐胁迫调控差异表达isoform(DEIs)分析第98-100页
        5.2.4 DEIs参与的GO生物学过程分析第100-103页
        5.2.5 核心差异表达isoform的功能注释分析第103-104页
        5.2.6 Isoform表达量验证第104-105页
    5.3 讨论第105-110页
        5.3.1 叶片中isoform的盐胁迫响应表达第105-106页
        5.3.2 盐胁迫下离子转运体表达调控第106-108页
        5.3.3 NHX和SOS1在盐胁迫下保持离子平衡中的作用第108页
        5.3.4 盐生草叶片中Na~+转运体仍需进一步研究第108-110页
    5.4 结论第110-111页
第六章 全文结论及后续研究展望第111-113页
参考文献第113-130页
附录第130-158页
致谢第158-160页
导师简介第160-161页
个人简介第161-163页

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