细胞色素P450 119酶的定向进化及其催化苯乙烯不对称环氧化反应的研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 材料与方法 | 第12-24页 |
| 1 实验材料 | 第12-13页 |
| 1.1 实验菌株 | 第12-13页 |
| 1.2 工具酶和引物 | 第13页 |
| 1.3 其他材料和试剂盒 | 第13页 |
| 2 实验试剂 | 第13-14页 |
| 2.1 培养基 | 第13页 |
| 2.2 化学试剂 | 第13-14页 |
| 2.3 缓冲液的配制 | 第14页 |
| 3 实验仪器 | 第14-15页 |
| 4 实验方法 | 第15-24页 |
| 4.1 易错PCR构建突变文库 | 第15-19页 |
| 4.2 突变酶的表达及含量确定 | 第19-20页 |
| 4.3 苯乙烯环氧化反应 | 第20-24页 |
| 结果 | 第24-36页 |
| 1. PET30a-CYP119质粒的提取 | 第24-25页 |
| 2. 易错PCR构建突变文库 | 第25-30页 |
| 3. 突变酶紫外扫描及含量测定 | 第30-31页 |
| 3.1 突变酶紫外扫描 | 第30页 |
| 3.2 朗伯比尔定律计算酶浓度 | 第30-31页 |
| 4. CYP119酶催化苯乙烯环氧化反应 | 第31-36页 |
| 4.1 苯乙烯和环氧苯乙烷保留时间的确定 | 第31-32页 |
| 4.2 校正因子 | 第32-33页 |
| 4.3 动力学试验 | 第33-34页 |
| 4.4 对应选择性试验 | 第34-35页 |
| 4.5 转化率试验 | 第35-36页 |
| 讨论 | 第36-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 英汉缩略词对照表 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 细胞色素P450研究进展 | 第46-54页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-62页 |
