| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 引言 | 第12-28页 |
| 1.1 概述 | 第12页 |
| 1.2 蛋白质的聚乙二醇修饰 | 第12-19页 |
| 1.2.1 PEG修饰改善成药特性的机制 | 第12-13页 |
| 1.2.2 现有PEG修饰现状和问题 | 第13-15页 |
| 1.2.3 外源蛋白修饰后新免疫原性的产生 | 第15页 |
| 1.2.4 药用蛋白PEG修饰的新策略 | 第15-19页 |
| 1.2.5 药用蛋白修饰的综合性新策略:用新型Branched PEG分子进行定点修饰 | 第19页 |
| 1.3 转铁蛋白偶联 | 第19-26页 |
| 1.3.1 转铁蛋白的一级结果分析 | 第20-23页 |
| 1.3.2 转铁蛋白的结构与功能关系 | 第23-24页 |
| 1.3.3 转铁蛋白参与血脑屏障的物质转运 | 第24-25页 |
| 1.3.4 转铁蛋白在药物靶向递送中的应用 | 第25-26页 |
| 1.3.5 转铁蛋白在脑部靶向递送研究中的进展 | 第26页 |
| 1.4 立题依据及研究思路 | 第26-28页 |
| 第2章 重组人睫状神经营养因子的纯化制备与表征 | 第28-43页 |
| 2.1 材料与设备 | 第28-29页 |
| 2.1.1 菌种与培养基 | 第28页 |
| 2.1.2 试剂与设备 | 第28-29页 |
| 2.2 试剂配制与分析方法 | 第29-31页 |
| 2.2.1 试剂配制 | 第29-30页 |
| 2.2.2 蛋白质分析方法 | 第30-31页 |
| 2.3 重组人睫状神经营养因子的制备 | 第31-33页 |
| 2.3.1 重组人睫状神经营养因子的发酵 | 第31-32页 |
| 2.3.2 重组人睫状神经营养因子的破碎与纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.3 重组人睫状神经营养因子的鉴定 | 第33页 |
| 2.4 实验结果 | 第33-41页 |
| 2.4.1 睫状神经营养因子制备 | 第33-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-42页 |
| 2.6 本章小结 | 第42-43页 |
| 第3章 重组睫状神经营养因子的聚乙二醇20k修饰与转铁蛋白偶联修饰及其表征 | 第43-52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-46页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.1.2 聚乙二醇20k-马来酰亚胺修饰重组CNTF的制备 | 第44页 |
| 3.1.3 转铁蛋白-PEG5k-睫状神经营养因子偶合物的制备 | 第44-45页 |
| 3.1.4 反相-高效液相色谱分析 | 第45页 |
| 3.1.5 SDS-PAGE分析 | 第45-46页 |
| 3.1.6 凝胶过滤层析检测方法 | 第46页 |
| 3.1.7 动态光散射分析 | 第46页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第46-50页 |
| 3.2.1 聚乙二醇20k修饰重组CNTF | 第46-47页 |
| 3.2.2 转铁蛋白-PEG5k-CNTF耦合物 | 第47页 |
| 3.2.3 反相色谱分析聚乙二醇20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF的纯度 | 第47-48页 |
| 3.2.4 高效凝胶过滤分析聚乙二醇20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF的纯度 | 第48-50页 |
| 3.2.5 动态光散射分析聚乙二醇20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF的纯度 | 第50页 |
| 3.3 本章小结 | 第50-52页 |
| 第4章 聚乙二醇20k修饰和转铁蛋白偶联修饰睫状神经营养因子的生物活性对比评价 | 第52-57页 |
| 4.1 材料与方法 | 第52-54页 |
| 4.1.1 细胞活性的对比考察 | 第52页 |
| 4.1.2 抗体亲和力测定 | 第52-53页 |
| 4.1.3 大鼠体内代谢动力学试验 | 第53页 |
| 4.1.4 小鼠体重减轻试验 | 第53页 |
| 4.1.5 荧光活体成像 | 第53页 |
| 4.1.6 蛋白质浓度测定 | 第53-54页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第54-57页 |
| 4.2.1 细胞增殖试验和抗体结合能力比较 | 第54-55页 |
| 4.2.2 药代动力学试验 | 第55页 |
| 4.2.3 药效学试验 | 第55-56页 |
| 4.2.4 小鼠荧光活体成像 | 第56-57页 |
| 第5章 结论 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简历及发表文章 | 第68页 |
