| 摘要 | 第7-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第16-24页 |
| 1.1 蜂群崩溃现象以及蜂群损失原因 | 第16-18页 |
| 1.1.1 蜂群崩溃综合征名称由来和定义 | 第16页 |
| 1.1.2 蜂群损失现状 | 第16-17页 |
| 1.1.3 蜂群损失的原因 | 第17-18页 |
| 1.2 蜜蜂病毒病简介 | 第18-19页 |
| 1.2.1 蜜蜂病毒种类 | 第18页 |
| 1.2.2 蜜蜂病毒的传播途径 | 第18页 |
| 1.2.3 常见蜜蜂病毒病的症状和诊断方法 | 第18-19页 |
| 1.3 CBPV研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 吡虫啉简介 | 第20-23页 |
| 1.4.1 吡虫啉对昆虫的作用机理 | 第21页 |
| 1.4.2 吡虫啉的残留情况 | 第21-22页 |
| 1.4.3 亚致死剂量吡虫啉对动物和昆虫的毒性 | 第22页 |
| 1.4.4 亚致死剂量吡虫啉对蜜蜂的影响研究进展 | 第22-23页 |
| 1.5 课题研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 中国部分地区蜜蜂病毒病流行性分析 | 第24-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-25页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器及试验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 样品总RNA提取 | 第25页 |
| 2.2.2 反转录 | 第25-26页 |
| 2.2.3 引物合成与稀释 | 第26-27页 |
| 2.2.4 PCR反应 | 第27页 |
| 2.2.5 电泳 | 第27-28页 |
| 2.2.6 统计分析 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-30页 |
| 2.3.1 意蜂病毒病流行性分析 | 第28-29页 |
| 2.3.2 中蜂病毒病流行性分析 | 第29页 |
| 2.3.3 中蜂和意蜂不同病毒阳性省份和感染率统计分析 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-34页 |
| 第三章 CBPV全基因组序列克隆 | 第34-42页 |
| 3.1 材料与方法 | 第34页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器及试验试剂 | 第34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 提取RNA | 第34页 |
| 3.2.2 反转录 | 第34页 |
| 3.2.3 引物的合成和稀释 | 第34-36页 |
| 3.2.4 PCR反应 | 第36页 |
| 3.2.5 电泳 | 第36页 |
| 3.2.6 配制LB培养基 | 第36页 |
| 3.2.7 胶回收 | 第36页 |
| 3.2.8 克隆 | 第36页 |
| 3.2.9 序列分析 | 第36-37页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第37-42页 |
| 3.3.1 CBPV RNA1和CBPV RNA2序列基本信息 | 第37页 |
| 3.3.2 ORF区预测 | 第37页 |
| 3.3.3 CBPV基因拼接及全基因组进化树分析 | 第37-39页 |
| 3.3.4 CBPV RNA1 BJ株RdRp区进化分析 | 第39页 |
| 3.3.5 CBPV RNA2 BJ株全基因结构及pSP区进化分析 | 第39-42页 |
| 第四章 CBPV在蜜蜂不同组织中的复制水平分析 | 第42-48页 |
| 4.1 材料和方法 | 第42页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第42页 |
| 4.1.2 主要仪器及试验试剂 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 提取RNA | 第42页 |
| 4.2.2 反转录 | 第42-43页 |
| 4.2.3 PCR反应 | 第43页 |
| 4.2.4 电泳 | 第43页 |
| 4.2.5 标准曲线制作 | 第43-44页 |
| 4.2.6 定量不同组织CBPV含量 | 第44-45页 |
| 4.3 试验结果 | 第45-47页 |
| 4.3.1 样本检测结果 | 第45页 |
| 4.3.2 扩增曲线和标准曲线 | 第45-46页 |
| 4.3.3 样品荧光定量结果 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 五个省份蜜蜂样品中吡虫啉残留分析 | 第48-51页 |
| 5.1 材料和仪器、试剂 | 第48页 |
| 5.1.1 试验蜜蜂 | 第48页 |
| 5.1.2 试验仪器及试剂 | 第48页 |
| 5.2 试验方法 | 第48-49页 |
| 5.2.1 吡虫啉残留测定 | 第48-49页 |
| 5.2.2 统计分析 | 第49页 |
| 5.3 试验结果 | 第49-50页 |
| 5.4 讨论 | 第50-51页 |
| 第六章 吡虫啉对意大利蜜蜂的毒力测定 | 第51-53页 |
| 6.1 材料和方法 | 第51页 |
| 6.1.1 试验蜜蜂 | 第51页 |
| 6.1.2 试验试剂 | 第51页 |
| 6.1.3 试验仪器 | 第51页 |
| 6.2 试验方法及分析方法 | 第51页 |
| 6.2.1 试验方法 | 第51页 |
| 6.2.2 分析方法 | 第51页 |
| 6.3 结果与分析 | 第51-52页 |
| 6.4 讨论 | 第52-53页 |
| 第七章 亚致死剂量吡虫啉对蜜蜂体内CBPV表达量的影响 | 第53-60页 |
| 7.1 材料和方法 | 第53页 |
| 7.1.1 试验材料 | 第53页 |
| 7.1.2 主要仪器及试验试剂 | 第53页 |
| 7.2 试验方法 | 第53-55页 |
| 7.2.1 试验蜂群和粗提病毒蜜蜂病原检测 | 第53-54页 |
| 7.2.2 病毒粗提 | 第54页 |
| 7.2.3 用不同浓度吡虫啉饲喂蜜蜂 | 第54页 |
| 7.2.4 测定CBPV含量 | 第54-55页 |
| 7.3 试验结果 | 第55-58页 |
| 7.3.1 病毒检测 | 第55-56页 |
| 7.3.2 蜜蜂存活率 | 第56页 |
| 7.3.3 不同浓度吡虫啉对CBPV含量的影响 | 第56-58页 |
| 7.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第八章 全文结论 | 第60-62页 |
| 8.1 研究总结 | 第60页 |
| 8.2 前景与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
