| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 牛轮状病毒的分子生物学及基于PCR技术的检测方法的研究进展 | 第16-27页 |
| 1 牛轮状病毒重要蛋白的功能及分子特征 | 第16-22页 |
| 1.1 VP4结构蛋白的功能及分子特征 | 第17-18页 |
| 1.2 VP6结构蛋白的功能及分子特性 | 第18-20页 |
| 1.3 VP7结构蛋白的功能及分子特征 | 第20-21页 |
| 1.4 NSP4非结构蛋白的功能及分子特征 | 第21-22页 |
| 2 牛轮状病毒PCR检测方法的研究进展 | 第22-25页 |
| 2.1 RT-PCR技术 | 第23页 |
| 2.2 荧光定量RT-PCR技术 | 第23-24页 |
| 2.3 巢式RT-PCR技术 | 第24页 |
| 2.4 双重及多重RT-PCR技术 | 第24-25页 |
| 2.5 恒温隔绝式PCR技术 | 第25页 |
| 3 小结与展望 | 第25-27页 |
| 第二章 牦牛源轮状病毒的分离鉴定 | 第27-33页 |
| 1 材料与方法 | 第27-29页 |
| 1.1 细胞系及临床样本 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第27-28页 |
| 1.3 临床样本的处理 | 第28页 |
| 1.4 病毒的分离培养 | 第28页 |
| 1.5 分离病毒的RT-PCR鉴定 | 第28-29页 |
| 1.6 病毒细胞培养物的间接免疫荧光的鉴定 | 第29页 |
| 2 结果 | 第29-31页 |
| 2.1 牦牛源轮状病毒的分离 | 第29页 |
| 2.2 牦牛源轮状病毒的RT-PCR鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3 分离得到的病毒的间接免疫荧光的鉴定 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-32页 |
| 4 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 基于恒温隔绝式RT-PCR技术现场检测牦牛源轮状病毒的试剂盒的研制与应用 | 第33-43页 |
| 1 材料与方法 | 第34-37页 |
| 1.1 病毒株、菌株、虫株与临床样本 | 第34页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第34页 |
| 1.3 引物的设计与合成 | 第34-35页 |
| 1.4 核酸的提取 | 第35页 |
| 1.5 牦牛源RV阳性标准品的制备 | 第35页 |
| 1.6 反应体系的优化 | 第35-36页 |
| 1.7 特异性评价 | 第36页 |
| 1.8 灵敏度评价 | 第36页 |
| 1.9 重复性评价 | 第36页 |
| 1.10 检测牦牛源RV的ii RT-PCR检测试剂盒的研制 | 第36页 |
| 1.11 与现有检测方法的比较 | 第36-37页 |
| 1.12 临床应用 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-41页 |
| 2.1 优化的反应体系 | 第37页 |
| 2.2 特异性评价 | 第37-38页 |
| 2.3 灵敏度评价 | 第38页 |
| 2.4 重复性评价 | 第38页 |
| 2.5 检测牦牛源RV的ii RT-PCR检测试剂的研制 | 第38-39页 |
| 2.6 与现有检测方法的比较 | 第39-40页 |
| 2.7 临床应用 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 4 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 川西北草原牦牛源轮状病毒的病原流行病学调查 | 第43-52页 |
| 1 材料与方法 | 第43-46页 |
| 1.1 病毒株、菌株、虫株与临床样本 | 第43-44页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第44页 |
| 1.3 引物的设计与合成 | 第44页 |
| 1.4 核酸的提取与cDNA合成 | 第44页 |
| 1.5 牦牛源RV阳性标准品的制备 | 第44页 |
| 1.6 反应体系及条件的优化 | 第44页 |
| 1.7 特异性评价 | 第44-45页 |
| 1.8 灵敏度测定 | 第45页 |
| 1.9 稳定性评价 | 第45页 |
| 1.10 与现有检测方法的比较 | 第45页 |
| 1.11 病原流行病学的调查 | 第45-46页 |
| 2 结果 | 第46-49页 |
| 2.1 优化的RT-PCR反应体系及条件 | 第46页 |
| 2.2 特异性评价 | 第46页 |
| 2.3 灵敏度测定 | 第46-47页 |
| 2.4 稳定性评价 | 第47-48页 |
| 2.5 与现有检测方法的比较 | 第48-49页 |
| 2.6 病原流行病学调查 | 第49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 结论及创新点 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-64页 |
| 附录一 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
